本發(fā)明涉及一株中華根瘤菌96-4微生物菌肥及其應(yīng)用，屬于微生物。

背景技術(shù)：

1、隨著惡劣氣候的加劇和過渡放牧，草地土壤退化、草地生產(chǎn)力驟降是我國草原生態(tài)系統(tǒng)面臨的嚴(yán)重問題；施肥可以迅速給草地補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)，改善土壤養(yǎng)分狀況，促進(jìn)植被恢復(fù)，增加植物群落蓋度和高度，是提高草地生產(chǎn)力的主要方式。

2、化肥是目前用于提高草地生產(chǎn)力方面常見的肥料，然而，過量施用化肥會(huì)導(dǎo)致土地板結(jié)、土壤養(yǎng)分比例失調(diào)，在提高草地生產(chǎn)力的同時(shí)也造成土壤環(huán)境日益惡化，生態(tài)平衡破壞等問題。因此，亟需尋找可代替或部分代替化肥的肥料。微生物肥料既可以保證植物生長(zhǎng)不可或缺的養(yǎng)分，還可以改土、促生、抗病和增產(chǎn)。

3、土壤中常見的微生物包括細(xì)菌（如假單胞菌、鞘氨醇單胞菌、芽孢桿菌、放線菌）和真菌（如擔(dān)子菌、子囊菌和木霉菌），這些微生物在土壤生物地球化學(xué)過程中各司其職，對(duì)提高土壤生態(tài)功能極為重要。目前，大部分微生物肥料的制備添加較多的是細(xì)菌中的芽孢桿菌和真菌中的里氏木霉，現(xiàn)有的研究表明這兩類微生物可以顯著提高地上部分和地下部分生物量，提高土壤養(yǎng)分含量。然而，大部分研究均是將微生物與秸稈、木屑混合，大大增加了財(cái)力、物力和人力成本；因此，當(dāng)務(wù)之急是找到一種既可提質(zhì)增效，又可節(jié)約成本的微生物菌及肥料。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一株中華根瘤菌96-4，從土壤中分離得到，其保藏號(hào)為cctcc?no:m?2024318，保藏日期為：2024年02月26日，保藏單位為：中國典型培養(yǎng)物保藏中心（地址：湖北省武漢市武昌區(qū)八一路299號(hào)）；?中華根瘤菌96-4的16s?rdna序列如seq?id?no:1所示；分類命名為中華根瘤菌（sinorhizobium?sp.）。

2、而且，所述中華根瘤菌96-4同時(shí)具有多種功能，包括：解磷、解鉀、固氮、產(chǎn)多糖和吲哚乙酸。

3、而且，所述中華根瘤菌96-4屬革蘭氏陰性，在有氧及厭氧環(huán)境下皆會(huì)生長(zhǎng)。

4、而且，中華根瘤菌96-4的制備方法如下：

5、a）稱取圍封處理下的土壤樣品5?g，置于盛有50?ml無菌水的100?ml三角瓶中，震蕩30?min，充分混勻，得到土壤懸濁液，濃度為1/10；

6、b）吸取0.5?ml上述土壤懸濁液于放入盛有4.5?ml無菌水的無菌離心管中，混勻，使溶液濃度為1/100，重復(fù)以上步驟將溶液稀釋至終濃度為1/1000000；

7、c）吸取100?μl稀釋后的土壤懸濁液，涂布于pko固體培養(yǎng)基中，25℃純化培養(yǎng)7d，得到中華根瘤菌96-4。

8、另一方面，本發(fā)明提供一種利用中華根瘤菌96-4制備的中華根瘤菌微生物菌肥。

9、而且，所述中華根瘤菌微生物菌肥的制備方法如下：將中華根瘤菌96-4在r2a培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)，之后離心去除培養(yǎng)基成分，得到的菌體用無菌生理鹽水稀釋，得到中華根瘤菌微生物菌肥。

10、而且，所述r2a培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為28±0.5℃、ph值為7.2±0.2。

11、另一方面，本發(fā)明提供一種中華根瘤菌微生物菌肥的應(yīng)用；

12、而且，用于制備種子包衣。

13、而且，用于促生草種。

14、而且，用于提高土壤養(yǎng)分含量。

15、有益效果：

16、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于：

17、1、本發(fā)明提供的中華根瘤菌96-4及其微生物菌肥，兼具多種功能，僅使用單一菌劑就可達(dá)到解磷、解鉀、固氮、產(chǎn)吲哚乙酸的作用，一種菌劑可代替多種化肥發(fā)揮相同的作用，既可以保證植物生長(zhǎng)不可或缺的養(yǎng)分，促進(jìn)植物生長(zhǎng)，還可以提高土壤養(yǎng)分含量，保護(hù)土壤環(huán)境。

18、2、本發(fā)明提供的中華根瘤菌96-4及其微生物菌肥，從土壤中便可獲取，取材簡(jiǎn)單廣泛，無需與其他肥料聯(lián)用，使用方便，效果顯著。

技術(shù)特征：

1.一株中華根瘤菌96-4，其特征在于，從土壤中分離得到，其保藏號(hào)為cctcc?no:m2024318，16s?rdna序列如seq?id?no:1所示,分類命名為中華根瘤菌（sinorhizobiumsp.）。

2.如權(quán)利要求1所述的一株中華根瘤菌96-4，其特征在于，所述中華根瘤菌96-4屬革蘭氏陰性，在有氧及厭氧環(huán)境下皆會(huì)生長(zhǎng)；所述中華根瘤菌96-4具有解磷、解鉀、固氮、產(chǎn)吲哚乙酸的作用。

3.利用權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)所述的中華根瘤菌96-4制備的中華根瘤菌微生物菌肥。

4.如權(quán)利要求3所述的中華根瘤菌微生物菌肥，其特征在于，所述中華根瘤菌微生物菌肥的制備方法如下：將中華根瘤菌96-4在r2a培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)，之后離心去除培養(yǎng)基成分，得到的菌體用無菌生理鹽水洗滌，得到中華根瘤菌微生物菌肥。

5.如權(quán)利要求4所述的中華根瘤菌微生物菌肥，其特征在于，所述r2a培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為28±0.5℃、ph值為7.2±0.2。

6.如權(quán)利要求5所述的中華根瘤菌微生物菌肥的應(yīng)用。

7.如權(quán)利要求6所述的中華根瘤菌微生物菌肥的應(yīng)用，其特征在于，用于制備種子包衣。

8.如權(quán)利要求6所述的中華根瘤菌微生物菌肥的應(yīng)用，其特征在于，用于促生草種。

9.如權(quán)利要求6所述的中華根瘤菌微生物菌肥的應(yīng)用，其特征在于，用于提高土壤養(yǎng)分含量。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供一株中華根瘤菌96?4及其微生物菌肥、微生物菌肥的制備方法與應(yīng)用，中華根瘤菌96?4從土壤中分離得到，其保藏號(hào)為CCTCC?NO:M?2024318，本發(fā)明提供的中華根瘤菌96?4及其微生物菌肥，兼具多種功能，僅使用單一菌劑就可達(dá)到解磷、解鉀、固氮、產(chǎn)吲哚乙酸的作用，一種菌劑可代替多種化肥發(fā)揮相同的作用，既可以保證植物生長(zhǎng)不可或缺的養(yǎng)分，促進(jìn)植物生長(zhǎng)，還可以提高土壤養(yǎng)分含量，保護(hù)土壤環(huán)境。

技術(shù)研發(fā)人員：王珍,賈麗娟,金軻,屠詳建,姜沈毅
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院草原研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/9/9