本發(fā)明涉及生物，具體涉及一種特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群及其篩選方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、抗氧劑168是一種廣泛使用的抗氧化劑，屬于有機亞磷酸酯家族。這種化合物廣泛用于制造各種聚合物，如聚乙烯、聚丙烯、聚酯、聚酰胺和聚氯乙烯。它通常在塑料、合成橡膠和其他易氧化材料的生產(chǎn)中用作穩(wěn)定劑?？寡鮿?68是各種工業(yè)應(yīng)用中常用的有機亞磷酸酯抗氧化劑，如塑料、橡膠、粘合劑和潤滑劑。盡管有用，但抗氧劑168的廣泛使用導(dǎo)致其在環(huán)境中廣泛存在，從而對人類健康和生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生潛在的重大負(fù)面影響。眾所周知，抗氧劑168在環(huán)境中具有持久性，可在土壤、沉積物和水系統(tǒng)中累積，并在水生生物中生物累積，導(dǎo)致潛在毒性。

2、抗氧劑168(三(2，4-二叔丁基苯基亞磷酸酯))是一種常見的抗氧化劑，廣泛用于聚烯烴行業(yè)，以防止聚合物在加工過程中老化和氧化。然而，抗氧劑168可能會降解成幾種降解產(chǎn)物，如2，4-二叔丁基苯酚、1，3-二叔丁基苯、三(2，4-二叔丁基苯基)磷酸酯(抗氧劑168的氧化形式)。

3、此外，抗氧劑168可發(fā)生光化學(xué)降解，導(dǎo)致形成可損害活生物體的活性中間體。然而，抗氧劑168在環(huán)境中的持久性和潛在毒性引起了人們對其對人類健康和生態(tài)系統(tǒng)影響的擔(dān)憂。抗氧劑168對環(huán)境的潛在負(fù)面影響導(dǎo)致人們對其命運、遷移和對生態(tài)系統(tǒng)影響的研究興趣增加。幾項研究報告了在各種環(huán)境基質(zhì)中檢測到抗氧劑168的情況，包括土壤、沉積物和水系統(tǒng)。例如，zhang等人(2021年)的一項研究報告稱，從中國湘江采集的土壤和沉積物樣本中廣泛存在抗氧劑168。同樣，賈尼等人(2019年)的一項研究報告稱，在從地中海采集的幾種魚類組織中檢測到了抗氧劑168?？寡鮿?68在各種工業(yè)應(yīng)用中的廣泛使用導(dǎo)致其廣泛存在于環(huán)境中，可能對人類健康和生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生負(fù)面影響。因此，如何降解抗氧劑168成為急需解決的問題之一。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群及其篩選方法和應(yīng)用，其可降解抗氧劑168以及其代謝產(chǎn)物。

2、在本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明提出了一種特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群。根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述復(fù)合菌群包括單菌菌懸液體積比為1:1的沙雷氏菌(serratiasp.ly-1)和太平洋芽胞桿菌(bacilluspacificus)。

3、在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明提出了一種特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群的篩選方法。根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述方法包括以下步驟：

4、將含有微生物的污泥樣品分別接種在含有抗氧劑168和雙2,4-二叔丁基苯基磷酸氫鹽的無機鹽培養(yǎng)基中進行富集培養(yǎng)；而后通過梯度稀釋的方法逐漸分離出以降解抗氧劑168和雙2,4-二叔丁基苯基磷酸氫鹽為目的的菌株，基于它們的外觀和顏色進一步表征和鑒定這些菌落，使用劃線平板法從混合群體中分離并獲得細(xì)菌的純培養(yǎng)物，培養(yǎng)后，觀察平板上單個細(xì)菌菌落的生長，然后鑒定并分離出相似的菌落。以高效降解抗氧劑168和雙2,4-二叔丁基苯基磷酸氫鹽的菌株進行單菌菌懸液體積比1:1的復(fù)配構(gòu)建合成菌群并用于降解抗氧劑168。

5、另外，根據(jù)本發(fā)明上述實施例的一種特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群的篩選方法，還可以具有如下附加的技術(shù)特征：

6、在本發(fā)明的一些實施例中，所述污水樣品在接種前需要進行預(yù)處理，處理方法如下，在污水樣品中加入pbs緩沖液進行混合，振蕩離心，倒出上清液，該過程重復(fù)多次，以完全去除樣品中的有機物。

7、在本發(fā)明的一些實施例中，含有抗氧劑16的無機鹽培養(yǎng)基制備方法如下，將2.5008克/升kh2po4、1.5003克/升k2hpo4、1.0001克/升nh4cl、0.5002克/升mgso4·7h2o溶解在1升蒸餾水中制備礦物鹽溶液，將ph值調(diào)節(jié)至7.0，調(diào)節(jié)ph值后，將加入微量元素和抗氧劑168。

8、在本發(fā)明的一些實施例中，抗氧劑168的加入量為10毫克/升。

9、在本發(fā)明的一些實施例中，使用naoh調(diào)節(jié)ph。

10、在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明提出了一種所述的特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群在降解污水中抗氧劑168的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的實施例，將復(fù)合菌群加入污水中并攪拌均勻。

11、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

12、抗氧劑168的微生物降解尚未報道，本發(fā)明采用復(fù)合菌種降解抗氧劑168，在72小時內(nèi)可以100％降解抗氧劑168，而抗氧劑168降解的單一菌株僅降解60％的降解抗氧劑168。

技術(shù)特征：

1.一種特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群，其特征在于：所述復(fù)合菌群包括單菌菌懸液體積比為1:1的沙雷氏菌(serratia?sp.ly-1)和太平洋芽胞桿菌(bacilluspacificus)。

2.一種特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群的篩選方法，其特征在于，包括以下步驟：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群的篩選方法，其特征在于：所述污泥樣品在接種前需要進行預(yù)處理，處理方法如下，在污泥樣品中加入pbs緩沖液進行混合，振蕩離心，倒出上清液，該過程重復(fù)多次，以完全去除樣品中的有機物。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群的篩選方法，其特征在于：分別含有抗氧劑168和雙2,4-二叔丁基苯基磷酸氫鹽的無機鹽培養(yǎng)基制備方法如下，將2.5008克/升kh2po4、1.5003克/升k2hpo4、1.0001克/升nh4cl、0.5002克/升mgso4·7h2o溶解在1升蒸餾水中制備礦物鹽溶液，將ph值調(diào)節(jié)至7.0，加入微量元素后，分別加入抗氧劑168和雙2,4-二叔丁基苯基磷酸氫鹽。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群的篩選方法，其特征在于：所述抗氧劑168的加入量為10毫克/升。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群的篩選方法，其特征在于：使用naoh調(diào)節(jié)ph。

7.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群在降解污水中抗氧劑168的應(yīng)用，其特征在于：將復(fù)合菌群加入污水中并攪拌均勻。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群及其篩選方法和應(yīng)用，所述復(fù)合菌群包括單菌菌懸液體積比為1:1的沙雷氏菌(Serratia?sp.LY?1)和太平洋芽胞桿菌(Bacilluspacificus)。所示篩選方法包括以下步驟：將含有微生物的污泥樣品分別接種在含有抗氧劑168和雙2,4?二叔丁基苯基磷酸氫鹽為碳源和能源的無機鹽培養(yǎng)基中進行富集培養(yǎng)；而后通過梯度稀釋的方法逐漸分離出以降解抗氧劑168和雙2,4?二叔丁基苯基磷酸氫鹽為目的的菌株。該特定性降解抗氧劑168的復(fù)合菌群可高效降解抗氧劑168。

技術(shù)研發(fā)人員：宋立巖,孫安逸,洪文清,王水晶
受保護的技術(shù)使用者：安徽大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/11/11