本發(fā)明涉及一種曲霉屬真菌feyqsj2及其發(fā)酵液粗提物的應(yīng)用,屬于微生物次級代謝產(chǎn)物領(lǐng)域。
背景技術(shù):
1、滇重樓parispolyphylla?var.yunnanensis.為延齡草科trilliaceae重樓屬paris?l多年生草本植物,是云南道地藥材,在云南藥用歷史悠久,據(jù)《滇南本草》記載“此乃外科之至藥也,主治一切無名腫毒,攻各種瘡毒癰疽”。滇重樓被歷版《中國藥典》所收載,以干燥根莖入藥,具有清熱解毒、消腫止痛、涼肝定驚之功效。滇重樓不僅是中藥方劑及民間家庭的常用藥物,還是云南白藥系列、宮血寧膠囊、季德勝蛇藥片、樓蓮膠囊、熱毒清等40余種著名國藥準字號中成藥的原料?,F(xiàn)代研究還發(fā)現(xiàn),滇重樓具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗菌消炎、止血、調(diào)節(jié)血管和抗氧化等作用,是金復(fù)康口服液(非小細胞肺癌)、樓蓮膠囊(肝癌)、肝復(fù)樂片(肝癌)等的主要原料。
2、云南是滇重樓的原產(chǎn)區(qū)和主產(chǎn)區(qū),種植面積和產(chǎn)量均占全國90%以上,人工種植已經(jīng)成為滇重樓的主要來源。但是,隨著滇重樓種植產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展,由于盲目引種、種植模式、氣候及土壤等生態(tài)環(huán)境因素等改變,不僅影響滇重樓品質(zhì),還致使滇重樓病害問題日益凸顯,其中根腐病和莖腐病(產(chǎn)地稱:滇重樓癌癥)對滇重樓種植危害最大。尖孢鐮刀菌(fusarium?oxysporum)是引起滇重樓根腐病和莖腐病的主要病原菌之一,主要侵染滇重樓的藥用部位根莖,造成根莖表皮發(fā)黑、變軟、腐爛,發(fā)病初期,無明顯病癥,隨著根莖腐爛程度加重,地上部分葉片開始出現(xiàn)發(fā)黃、枯萎、干枯,直到植株枯萎死亡。
3、近年來微生物學(xué)研究發(fā)現(xiàn),許多植物的內(nèi)生菌可以產(chǎn)生與寄主藥用植物相同的藥用成分。通過內(nèi)生菌一定規(guī)模發(fā)酵培養(yǎng)生產(chǎn)活性物質(zhì)被認為是尋找新型抗菌先導(dǎo)化合物的一種方法,而滇重樓具有豐富的內(nèi)生菌資源。因此,本發(fā)明對采集自云南大理滇重樓內(nèi)生菌進行研究,通過微生物純培養(yǎng)手段和基于測序技術(shù)對滇重樓內(nèi)生菌進行物種多樣性探究,并利用hplc、uplc-ms對菌株次生代謝產(chǎn)物進行化學(xué)多樣性篩選,結(jié)合“微量肉湯稀釋法”等進行抗菌活性篩選,獲得了一種可生產(chǎn)抗菌活性物質(zhì)的曲霉屬真菌。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的之一是提供了一株曲霉屬真菌feyqsj2,所述曲霉屬真菌feyqsj2為煙曲霉,已于2024年5月27日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號:cgmcc?no.41243,分類學(xué)命名:aspergillus?fumigatus,保藏單位地址為:北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號。
2、本發(fā)明的另一目的是提供了一種曲霉屬真菌feyqsj2制備得到的發(fā)酵液粗提物。
3、優(yōu)選的,所述發(fā)酵液粗提物的制備方法如下所述:
4、(1)培養(yǎng)得到曲霉屬真菌feyqsj2發(fā)酵液。
5、(2)將發(fā)酵液和菌體分離,用乙酸乙酯萃取,合并萃取液后減壓濃縮、干燥,即得所述粗提物。
6、優(yōu)選的,步驟(1)中發(fā)酵液的制備方法為:將曲霉屬真菌feyqsj2接種至pdb培養(yǎng)基中,28℃搖床培養(yǎng)3d得種子液;將種子液轉(zhuǎn)接到大米培養(yǎng)基中,置于28℃靜置培養(yǎng)28-30d得發(fā)酵物。
7、優(yōu)選的,步驟(1)中所述搖床培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速為150-180r/min。
8、優(yōu)選的,步驟(1)中種子液的轉(zhuǎn)接量優(yōu)選10%-12%。
9、優(yōu)選的,步驟(2)中乙酸乙酯的用量為發(fā)酵液體積的1-2倍。
10、本發(fā)明還提供了一種曲霉屬真菌feyqsj2制備得到的發(fā)酵液粗提物在制備防治滇重樓根腐病或莖腐病藥劑中的應(yīng)用。
11、優(yōu)選的,所述滇重樓根莖腐病由尖孢鐮刀菌fusarium?oxysporum引起。
12、本發(fā)明的有益效果
13、(1)本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)了一株可以防治滇重樓根腐病和莖腐病的曲霉屬真菌feyqsj2,拓寬了滇重樓根腐病和莖腐病的生物學(xué)防治方法。
14、(2)本發(fā)明利用微生物對滇重樓根腐病和莖腐病進行防治,不會對環(huán)境造成影響和破壞。
1.一種曲霉屬真菌feyqsj2,其特征在于:所述曲霉屬真菌feyqsj2為煙曲霉,保藏編號:cgmcc?no.41243,分類學(xué)命名:aspergillusfumigatus。
2.利用權(quán)利要求1所述曲霉屬真菌feyqsj2制備得到的發(fā)酵液粗提物。
3.權(quán)利要求2所述曲霉屬真菌feyqsj2制備得到的發(fā)酵液粗提物在制備防治滇重樓根腐病或莖腐病藥劑中的應(yīng)用。
4.權(quán)利要求2所述曲霉屬真菌feyqsj2制備得到的發(fā)酵液粗提物的制備方法,其特征在于:所述制備方法具體包括如下步驟: