本發(fā)明屬于核苷酸，具體涉及一種核苷酸類化合物的純化方法。

背景技術(shù)：

1、核苷酸是一類由嘌呤或嘧啶堿基、核糖或脫氧核糖以及磷酸基團組成的化合物。核苷酸類化合物廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)行業(yè)，各類核苷酸產(chǎn)品的市場需求巨大。

2、目前化學(xué)合成核苷酸的生產(chǎn)純化方法的一般方法是先進行離子交換樹脂洗脫純化，然后再進行反相柱層析純化，最后經(jīng)濃縮或納濾得到產(chǎn)物。產(chǎn)物純度能夠達到95％～99％。但這種核苷酸類化合物的純化方法比較適用于毫克到克量級的產(chǎn)品制備，不適用于百克到公斤級的產(chǎn)品純化。而且采用反相制備純化溶劑消耗巨大，且反相柱的上樣量較小，填料及高壓泵設(shè)備昂貴，純化后收集產(chǎn)物的餾分體積大，還需經(jīng)濃縮凍干才得到產(chǎn)物，生產(chǎn)周期長，成本高。

3、因此，需要開發(fā)一種能夠有效純化核苷酸類化合物，并用時短，成本低的核苷酸類化合物的純化方法。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種核苷酸類化合物的純化方法，所述核苷酸類化合物的純化方法能夠提高單一批次的純化處理量，達到較高純度，純化用時短，有效縮短了產(chǎn)品的生產(chǎn)周期。

2、為達此目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明提供一種核苷酸類化合物的純化方法，所述核苷酸類化合物的純化方法包括以下步驟：將核苷酸粗品通過弱陰離子交換柱層析純化，與碘化鈉飽和溶液混合析出晶體，得到純品。

4、本發(fā)明中，將核苷酸粗品通過弱陰離子交換柱層析純化，與碘化鈉飽和溶液混合析出晶體核苷酸鈉鹽，能夠?qū)崿F(xiàn)有效純化獲得純品，示例性地，核苷酸粗品包括脫氧核糖核苷三磷酸粗品、雙脫氧核糖核苷三磷酸粗品或含疊氮基的脫氧核糖核苷三磷酸粗品。所述核苷酸類化合物的純化方法能夠提高單一批次的純化處理量，達到較高純度，可達到≥99％的目標(biāo)純度，純化用時短，有效縮短了產(chǎn)品的生產(chǎn)周期。

5、優(yōu)選地，所述弱陰離子交換柱層析純化后還包括濃縮的步驟。

6、優(yōu)選地，所述弱陰離子交換柱的填料為deae填料。

7、優(yōu)選地，所述弱陰離子交換柱層析純化的流動相包括流動相a和流動相b，所述流動相a為純水，所述流動相b為碳酸三乙胺水溶液。

8、優(yōu)選地，所述碳酸三乙胺水溶液的濃度為0.5～2mol/l，例如0.7mol/l、0.9mol/l、1.1mol/l、1.3mol/l、1.5mol/l、1.7mol/l或1.9mol/l等。

9、優(yōu)選地，所述碳酸三乙胺水溶液的ph為7～8，例如7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8或7.9等。

10、優(yōu)選地，所述弱陰離子交換柱層析純化的洗脫方式為梯度洗脫，流速為40～120ml/min，例如50ml/min、60ml/min、70ml/min、80ml/min、90ml/min、100ml/min或110ml/min等。

11、優(yōu)選地，所述碘化鈉飽和溶液的溶劑為丙酮。

12、本發(fā)明中，所述碘化鈉飽和溶液意指10～35℃、101.325kpa條件下的碘化鈉飽和溶液。

13、優(yōu)選地，所述析出晶體的溫度為10～35℃，例如13℃、16℃、19℃、22℃、25℃、28℃、31℃或34℃等。

14、優(yōu)選地，所述混合還包括與乙醇或乙腈混合。

15、優(yōu)選地，以碘化鈉飽和溶液和乙醇或乙腈的總質(zhì)量為100％計，所述碘化鈉飽和溶液的質(zhì)量百分比為90％～100％(例如91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％等)，乙醇或乙腈的質(zhì)量百分比為0～10％(例如1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％或9％等)。

16、本發(fā)明中，以碘化鈉飽和溶液和乙醇或乙腈的總質(zhì)量為100％計，所述碘化鈉飽和溶液的質(zhì)量百分比優(yōu)選為90％～100％，若碘化鈉飽和溶液的質(zhì)量百分比過低，則析晶不完全，純化收率降低。

17、本發(fā)明中，通過調(diào)控結(jié)晶條件能提高純化的純度，達到核苷酸類化合物純化的目的。

18、優(yōu)選地，所述析出晶體后還包括過濾和丙酮洗滌的步驟。

19、優(yōu)選地，所述核苷酸類化合物的純化方法具體包括如下步驟：將核苷酸粗品通過弱陰離子交換柱層析純化，濃縮，與碘化鈉飽和溶液和任選地乙醇或乙腈混合析出晶體，過濾，丙酮洗滌，得到純品。

20、所述弱陰離子交換柱的填料為deae填料，所述弱陰離子交換柱層析純化的流動相包括流動相a和流動相b，所述流動相a為純水，所述流動相b為濃度為0.5～2mol/l的碳酸三乙胺水溶液，所述弱陰離子交換柱層析純化的洗脫方式為梯度洗脫，流速為40～120ml/min。

21、以碘化鈉飽和溶液和乙醇或乙腈的總質(zhì)量為100％計，所述碘化鈉飽和溶液的質(zhì)量百分比為90％～100％，乙醇或乙腈的質(zhì)量百分比為0～10％。

22、相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有以下有益效果：

23、本發(fā)明將核苷酸粗品通過弱陰離子交換柱層析純化，與碘化鈉飽和溶液混合析出晶體核苷酸鈉鹽，能夠?qū)崿F(xiàn)有效純化獲得純品，所述核苷酸類化合物的純化方法能夠提高單一批次的純化處理量，達到較高純度，可達到≥99％的目標(biāo)純度，純化用時短，有效縮短了產(chǎn)品的生產(chǎn)周期，生產(chǎn)周期為4天。

技術(shù)特征：

1.一種核苷酸類化合物的純化方法，其特征在于，所述核苷酸類化合物的純化方法包括以下步驟：將核苷酸粗品通過弱陰離子交換柱層析純化，與碘化鈉飽和溶液混合析出晶體，得到純品。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核苷酸類化合物的純化方法，其特征在于，所述弱陰離子交換柱層析純化后還包括濃縮的步驟；

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的核苷酸類化合物的純化方法，其特征在于，所述弱陰離子交換柱層析純化的流動相包括流動相a和流動相b，所述流動相a為純水，所述流動相b為碳酸三乙胺水溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核苷酸類化合物的純化方法，其特征在于，所述碳酸三乙胺水溶液的濃度為0.5～2mol/l；

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的核苷酸類化合物的純化方法，其特征在于，所述弱陰離子交換柱層析純化的洗脫方式為梯度洗脫，流速為40～120ml/min。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項所述的核苷酸類化合物的純化方法，其特征在于，所述碘化鈉飽和溶液的溶劑為丙酮。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項所述的核苷酸類化合物的純化方法，其特征在于，所述析出晶體的溫度為10～35℃。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項所述的核苷酸類化合物的純化方法，其特征在于，所述混合還包括與乙醇或乙腈混合；

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項所述的核苷酸類化合物的純化方法，其特征在于，所述析出晶體后還包括過濾和丙酮洗滌的步驟。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項所述的核苷酸類化合物的純化方法，其特征在于，所述核苷酸類化合物的純化方法具體包括如下步驟：將核苷酸粗品通過弱陰離子交換柱層析純化，濃縮，與碘化鈉飽和溶液和任選地乙醇或乙腈混合析出晶體，過濾，丙酮洗滌，得到純品；

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供一種核苷酸類化合物的純化方法，所述核苷酸類化合物的純化方法包括以下步驟：將核苷酸粗品通過弱陰離子交換柱層析純化，與碘化鈉飽和溶液混合析出晶體，得到純品。本發(fā)明中提供的核苷酸類化合物的純化方法能夠提高單一批次的純化處理量，達到較高純度，純化用時短，有效縮短了產(chǎn)品的生產(chǎn)周期。

技術(shù)研發(fā)人員：段昌龍,孫宇鵬,王思明,彭思琪
受保護的技術(shù)使用者：深圳太古語科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10