本發(fā)明屬于生物，尤其涉及一種n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚返闹苽浞椒捌鋺谩?/p>

背景技術：

1、缺血性心臟病(ihd)是人類死亡的主要原因之一。血管成形術和冠狀動脈搭橋手術等治療可以恢復缺血心肌的血流。然而，再灌注通過升高活性氧(ros)和誘導鈣超載會導致額外的心肌損傷。目前，還沒有有效的治療缺血/再灌注(i/r)損傷的方法。從天然產物中尋找對心肌缺血再灌注損傷具有保護或預防作用的活性單體成分成為目前研究熱點。

2、黑果枸杞(lycium?ruthenicummurr.)，藏藥中又稱為“旁瑪”，是茄科枸杞屬多年生灌木，其生命力強，能耐鹽、耐寒、抗旱，主要分布于高山沙林地帶。黑果枸杞被收載于《晶珠本草》《四部醫(yī)典》等藏醫(yī)藥經典著作中，其味甘、性平、清心熱，是一種藥食兩用植物。黑果枸杞中富含亞精胺生物堿成分，具有抗炎、抗氧化、降血脂、抗ad、抗抑郁、抗衰老等多種生理活性，是一類值得關注和深入研究的資源性化學物質。n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚肥呛诠坭街兄饕膩喚飞飰A成分，目前無相關的制備工藝及心肌缺血再灌注損傷保護作用的研究報道，如何制備得到高純度的n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚凡⑻剿髌鋺檬潜绢I域技術人員亟需解決的問題。

技術實現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種n1,n10-雙二氫二咖啡酰基亞精胺的制備方法，能夠提取到高純度的黑果枸杞亞精胺成分n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚?。

2、本發(fā)明的另一目的在于提供上述制備方法制備所得的n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚吩谥苽浞乐稳毖俟嘧p傷產品中的應用，本發(fā)明提供的n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚纺軌蛴行Х乐涡募∪毖俟嘧p傷。

3、本發(fā)明提供了一種n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚返闹苽浞椒?，包括以下步驟：

4、黑果枸杞汁離心，收集上清液；

5、將所述上清液加入大孔樹脂柱1中上樣，用水洗脫大孔樹脂柱1，棄去流出液；用體積分數(shù)為5％～15％的乙醇溶液洗脫大孔樹脂柱1，收集流出液，將流出液加入大孔樹脂柱2中上樣；用體積分數(shù)為5％～15％的乙醇溶液洗脫大孔樹脂柱2，收集流出液，濃縮，干燥得到黑果枸杞亞精胺精提物；

6、將黑果枸杞亞精胺精提物用制備液相色譜純化，得到n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚贰?/p>

7、優(yōu)選的，所述大孔樹脂柱1的型號包括：d101、hpd-100、hpd-450、hpd-750、ab-8或s-8。

8、優(yōu)選的，所述大孔樹脂柱2的型號包括：d301r、d301、d296、d315或d201。

9、優(yōu)選的，用水洗脫時，水的體積為1～3bv。

10、優(yōu)選的，用乙醇溶液洗脫大孔樹脂柱1時，乙醇溶液的體積為1～5bv。

11、優(yōu)選的，用乙醇溶液洗脫大孔樹脂柱2時，乙醇溶液的體積為1～5bv。

12、優(yōu)選的，洗脫大孔樹脂柱1時的洗脫流速為2～4bv/h，洗脫大孔樹脂柱2的洗脫流速為1～3bv/h。

13、優(yōu)選的，所述制備液相色譜純化的條件為：色譜柱為c18色譜柱，流動相為體積分數(shù)5％～20％的乙腈溶液，檢測波長為280nm。

14、優(yōu)選的，所述流動相洗脫時為等度洗脫，所述流動相的流速為2～20ml/min。

15、本發(fā)明還提供了所述制備方法制備得到的n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚吩谥苽浞乐稳毖俟嘧p傷產品中的應用。

16、本發(fā)明的有益效果：

17、本發(fā)明提供了一種n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚返闹苽浞椒?，經水提、大孔樹脂分離、制備液相色譜純化，得到高純度的黑果枸杞亞精胺成分n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚罚浼兌冗_到98％以上。制備得到的高純度n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚房芍苯蛹せ頶6pd活性，提高nadph水平，劑量依賴性改善心臟功能，降低瘢痕組織的形成、纖維化，在高劑量(20mg/kg/day)下，本發(fā)明制備得到的n1,n10-雙二氫二咖啡?；鶃喚穼π募∪痹俟嘧p傷的保護作用與酒石酸美托洛爾(mta)相當，可用于制備防治缺血再灌注損傷的產品。

技術特征：

1.一種n1,n10-雙二氫二咖啡酰基亞精胺的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述大孔樹脂柱1的型號包括：d101、hpd-100、hpd-450、hpd-750、ab-8或s-8。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述大孔樹脂柱2的型號包括：d301r、d301、d296、d315或d201。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，用水洗脫時，水的體積為1～3bv。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，用乙醇溶液洗脫大孔樹脂柱1時，乙醇溶液的體積為1～5bv。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，用乙醇溶液洗脫大孔樹脂柱2時，乙醇溶液的體積為1～5bv。

7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，洗脫大孔樹脂柱1時的洗脫流速為2～4bv/h，洗脫大孔樹脂柱2的洗脫流速為1～3bv/h。

8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述制備液相色譜純化的條件為：色譜柱為c18色譜柱，流動相為體積分數(shù)5％～20％的乙腈溶液，檢測波長為280nm。

9.根據權利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述流動相洗脫時為等度洗脫，所述流動相的流速為2～20ml/min。

10.權利要求1～9任意一項所述制備方法制備得到的n1,n10-雙二氫二咖啡酰基亞精胺在制備防治缺血再灌注損傷產品中的應用。

技術總結
本發(fā)明屬于生物技術領域，主要涉及一種N1,N10?雙二氫二咖啡?；鶃喚返闹苽浞椒捌鋺?。本發(fā)明經水提、大孔樹脂分離、制備液相色譜純化，得到黑果枸杞亞精胺成分N1,N10?雙二氫二咖啡酰基亞精胺。經本發(fā)明制備方法得到的N1,N10?雙二氫二咖啡酰基亞精胺純度高，達到98％以上。制備得到的N1,N10?雙二氫二咖啡?；鶃喚房芍苯蛹せ頖6PD活性，提高NADPH水平，劑量依賴性改善心臟功能，降低瘢痕組織的形成、纖維化。在高劑量(20mg/kg/day)下，N1,N10?雙二氫二咖啡酰基亞精胺對心肌缺再灌注損傷的保護作用與酒石酸美托洛爾(MTA)相當，可用于制備防治缺血再灌注損傷的產品。

技術研發(fā)人員：陳濤,李玉林,王碩,羅菊元,申誠,趙景陽
受保護的技術使用者：中國科學院西北高原生物研究所
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/12/10