本發(fā)明涉及生物，尤其涉及sllnc402-sljaz7/slmyc2-slref模型在調(diào)控番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、番茄種業(yè)是構(gòu)成番茄產(chǎn)業(yè)的重要因素，然而與世界先進(jìn)國家相比，我國番茄種業(yè)仍存在諸多方面的差距，最主要的問題是原始創(chuàng)新能力不足，原創(chuàng)性成果少?，F(xiàn)在國內(nèi)番茄育種利用的抗病基因、優(yōu)質(zhì)基因幾乎全部來自于國外品種的分離。雖然“十三五”期間，國家加大了對(duì)種質(zhì)資源的系統(tǒng)收集與鑒定，但仍處于剛起步階段，缺乏深入和系統(tǒng)研究。尤其全球變暖導(dǎo)致高溫、干旱等極端天氣的頻繁發(fā)生，進(jìn)一步遏制番茄高精尖種業(yè)發(fā)展的勢頭。

2、全球氣候變暖引起的高溫脅迫對(duì)蔬菜生產(chǎn)的影響日趨嚴(yán)重。高溫和干旱脅迫嚴(yán)重限制了蔬菜的產(chǎn)量，給農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)帶來巨大的損失。因此，高溫已然成為影響番茄產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要限制因素之一。番茄蕾期遇到高溫脅迫會(huì)造成花器官發(fā)育不良，易發(fā)生開花坐果差、落花落果，從而導(dǎo)致番茄產(chǎn)量低和品質(zhì)劣。近年來，植物受高溫脅迫的研究取得了重要進(jìn)展，主要集中在熱激轉(zhuǎn)錄因子家族等轉(zhuǎn)錄因子及其調(diào)控基因的分子機(jī)制上，然而，關(guān)于非編碼rna參與高溫脅迫應(yīng)答的表觀調(diào)控機(jī)制研究仍然匱乏。此外，當(dāng)前高溫脅迫研究大多聚焦在短期熱應(yīng)激處理方面，較難以應(yīng)用于作物育種，因此利用長期高溫脅迫對(duì)番茄蕾期研究已成為重要的科學(xué)熱點(diǎn)之一，對(duì)提高番茄坐果率和質(zhì)量具有極其重要的意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明目的是提供sllnc402-sljaz7/slmyc2-slref模型在調(diào)控番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫中的應(yīng)用，利用高溫脅迫下番茄花蕾的全轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，預(yù)測并鑒定了sllnc402-sljaz7/slmyc2-slref熱響應(yīng)模型，通過克隆sllnc402的編碼區(qū)全長序列和slmyc2基因的編碼序列，采用酵母單雜和雙熒光素酶試驗(yàn)驗(yàn)證sllnc402-sljaz7、slmyc2-slref的互作調(diào)控關(guān)系。具體包括sllnc402的克隆、slmyc2的克隆，sllnc402-sljaz7互作驗(yàn)證、slmyc2-slref互作驗(yàn)證，以及slref在番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫的功能驗(yàn)證。

2、為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是：

3、sllnc402-sljaz7/slmyc2-slref模型在調(diào)控番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫中的應(yīng)用，

4、所述sllnc402-sljaz7/slmyc2-slref模型包括長鏈非編碼rnasllnc402，slmyc2基因，sljaz7基因的啟動(dòng)子和slref基因的啟動(dòng)子；

5、所述sllnc402-sljaz7/slmyc2-slref模型在番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫中正調(diào)控；

6、所述sllnc402的核苷酸序列如seq?id?no.1所示；

7、所述slmyc2基因的核苷酸序列如seq?id?no.2所示；

8、所述sljaz7基因的啟動(dòng)子核苷酸序列如seq?id?no.3所示；

9、所述slref基因的啟動(dòng)子核苷酸序列如seq?id?no.4所示。

10、優(yōu)選的，

11、所述sllnc402正調(diào)控sljaz7基因的表達(dá)，負(fù)調(diào)控番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫；

12、所述slmyc2正調(diào)控slref基因的表達(dá)，正調(diào)控番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫。

13、優(yōu)選的，

14、所述sllnc402和sljaz7基因的啟動(dòng)子正向互作；所述slmyc2和slref基因的啟動(dòng)子正向互作。

15、優(yōu)選的，

16、擴(kuò)增sllnc402的引物如seq?id?no.5和seq?id?no.6所示。

17、優(yōu)選的，

18、擴(kuò)增slmyc2基因的引物如seq?id?no.7和seq?id?no.8所示。

19、優(yōu)選的，

20、擴(kuò)增sljaz7基因的啟動(dòng)子的引物如seq?id?no.9和seq?id?no.10所示。

21、優(yōu)選的，

22、擴(kuò)增slref基因的啟動(dòng)子的引物如seq?id?no.11和seq?id?no.12所示。

23、一種提高番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫性的方法，

24、通過降低sllnc402的表達(dá)量，從而降低sljaz7的啟動(dòng)子的表達(dá)量，進(jìn)而解除slmyc2基因的抑制，提高slref的表達(dá)量，最終提高番茄高溫抗性；

25、所述sllnc402的核苷酸序列如seq?id?no.1所示；

26、所述slmyc2基因的核苷酸序列如seq?id?no.2所示。

27、優(yōu)選的，

28、sllnc402熒光定量的引物如seq?id?no.13和seq?id?no.14所示。

29、sljaz7熒光定量的引物如seq?id?no.15和seq?id?no.16所示。

30、slmyc2熒光定量的引物如seq?id?no.17和seq?id?no.18所示。

31、slref熒光定量的引物如seq?id?no.19和seq?id?no.20所示。

32、sljaz7基因編碼區(qū)全長序列如seq?id?no.21所示。

33、slref基因編碼區(qū)全長序列如seq?id?no.22所示。

34、本發(fā)明的有益效果是：

35、本發(fā)明利用長期高溫脅迫下番茄花蕾mrna、mirna、lncrna、circrna等多組學(xué)數(shù)據(jù)聯(lián)合分析，發(fā)現(xiàn)長鏈非編碼sllnc402通過調(diào)控ja代謝途徑來增強(qiáng)番茄耐熱性，建立了sllnc402-sljaz7/slmyc2-slref調(diào)控模型，通過研究該調(diào)控模型中sllnc402對(duì)ja代謝途徑的調(diào)控方式、核心基因slmyc2的下游靶基因鑒定、相應(yīng)轉(zhuǎn)化株系的功能驗(yàn)證，揭示了非編碼rna和mrna調(diào)控模型參與番茄蕾期響應(yīng)高溫脅迫的功能機(jī)制，實(shí)現(xiàn)番茄種質(zhì)資源夠突破地域和季節(jié)等因素對(duì)番茄產(chǎn)量和品質(zhì)的制約，達(dá)成了番茄周年均衡化供應(yīng)的目的。

技術(shù)特征：

1.sllnc402-sljaz7/slmyc2-slref模型在調(diào)控番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫中的應(yīng)用，其特征在于，

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，

8.一種提高番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫性的方法，其特征在于，

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的提高番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫性的方法，其特征在于，所述sllnc402熒光定量的引物如seq?id?no.13和seq?id?no.14所示；

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了SlLNC402?SlJAZ7/SlMYC2?SlREF模型在調(diào)控番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫中的應(yīng)用，利用高溫脅迫下番茄花蕾的全轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)，預(yù)測并鑒定了SlLNC402?SlJAZ7/SlMYC2?SlREF熱響應(yīng)模型，通過克隆SlLNC402的編碼區(qū)全長序列和SlREF基因的編碼序列，采用酵母單雜和雙熒光素酶試驗(yàn)驗(yàn)證SlLNC402?SlJAZ7、SlMYC2?SlREF的互作調(diào)控關(guān)系，具體包括SlLNC402的克隆、SlMYC2的克隆，SlLNC402?SlJAZ7互作驗(yàn)證、SlMYC2?SlREF互作驗(yàn)證，以及SlREF在番茄花粉響應(yīng)高溫脅迫的功能驗(yàn)證，證實(shí)了長鏈非編碼SlLNC402通過調(diào)控JA信號(hào)途徑來增強(qiáng)番茄耐熱性，調(diào)控模型參與番茄蕾期響應(yīng)高溫脅迫的功能機(jī)制，實(shí)現(xiàn)了番茄種質(zhì)資源夠突破地域和季節(jié)等因素對(duì)番茄產(chǎn)量和品質(zhì)的制約，達(dá)成了番茄周年均衡化供應(yīng)的目的。

技術(shù)研發(fā)人員：林濤,李紅偉,楊琴琴,張?jiān)旅?耿曉琳
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19