本發(fā)明涉及淀粉酶生產(chǎn)，具體涉及一種耐高溫淀粉酶的制備方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、物酶是隨著生物技術(shù)進(jìn)步而發(fā)展起來(lái)的一種新型生物催化劑，相比傳統(tǒng)的催化劑具有高效率、低能耗、環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)。

2、退漿指的是去除織物上的漿料的過(guò)程，現(xiàn)有的退漿工藝大多采用以下幾種方式：熱水退漿、酶退漿、堿液退漿、氧化劑退漿，其中熱水退漿耗時(shí)較長(zhǎng)，整體能耗大，而堿液退漿、氧化劑退漿由于會(huì)使用一定的化學(xué)原料，一定程度上會(huì)造成對(duì)織物纖維的損害，影響最終產(chǎn)品的品質(zhì)，在此基礎(chǔ)上酶退漿則成為一種廣受歡迎的退漿方法。

3、現(xiàn)有的酶退漿大多是采用淀粉酶進(jìn)行退漿，一般是將織物浸軋淀粉酶液后，在40-50℃堆置1-2小時(shí)可使淀粉充分水解，雖然退漿效果好，對(duì)織物損害小，但是整體耗時(shí)較大。

4、為了提高退漿效率，現(xiàn)有技術(shù)中往往在酶退漿時(shí)采用熱蒸汽工藝加速退漿，但是高溫處理容易造成淀粉酶的活性降低或者失活，所以往往是采用連續(xù)或半連續(xù)的淀粉酶蒸汽退漿，即進(jìn)行多次添加淀粉酶，并多次蒸汽處理退漿，能一定程度上減少整體退漿的時(shí)間，但是也增加了操作的繁瑣性，同時(shí)也容易造成退漿的不完全性。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)不足，本發(fā)明提供一種耐高溫淀粉酶的制備方法及其應(yīng)用，采用現(xiàn)有的耐熱地衣芽孢桿菌經(jīng)過(guò)液體培養(yǎng)并后續(xù)的改性處理，有效提升耐熱地衣芽孢桿菌產(chǎn)淀粉酶的耐高溫效果和活性，綜合提升淀粉酶高溫蒸汽退漿的效果。

2、為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明的技術(shù)方案通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：

3、一種耐高溫淀粉酶的制備方法，所述耐高溫淀粉酶的制備方法包括以下步驟：

4、s1、種子液制備：選取耐熱地衣芽孢桿菌制備種子液；

5、s2、按照以下質(zhì)量百分比配置液體發(fā)酵培養(yǎng)基：秋葵凍干粉5.0％-7.0％、麩皮3.0％-6.0％、酵母膏0.1％-0.2％、硝酸鈉0.05％-0.1％、蛋白胨0.1％-0.15％、磷酸二氫鉀0.05％-0.15％、氯化鈉0.1％-0.2％，其余為蒸餾水；

6、s3、液體培養(yǎng)：將上述種子液接種至上述液體發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵處理60-72h，得發(fā)酵料備用；

7、s4、淀粉酶分離：將發(fā)酵料過(guò)濾，濾液為粗淀粉酶溶液備用；

8、s5、粗淀粉酶溶液的預(yù)處理：取秋葵凍干粉加入硝酸鎳溶液中攪拌混合，得混合液，將混合液加入粗淀粉酶溶液中持續(xù)攪拌20-40min，后再加入硼氫化鈉、氯化鈣和磷酸氫二鈉攪拌均勻后靜置4-6h后再離心，取離心上清液為耐高溫淀粉酶溶液。

9、優(yōu)選的，所述步驟s1中種子液中活菌數(shù)為106-1010個(gè)/ml。

10、優(yōu)選的，所述步驟s2中秋葵凍干粉的制備方法包括以下步驟：

11、s2-1、將鮮秋葵清洗出去表面雜質(zhì)，后加水研磨成漿，得秋葵漿液備用；

12、s2-2、將秋葵漿液在零下2℃-零下8℃溫度下冷凍10-20h，后取出自然融化再凍干，研磨過(guò)60目篩，得秋葵凍干粉。

13、優(yōu)選的，所述步驟s3中種子液接種至液體發(fā)酵培養(yǎng)基中量為液體發(fā)酵培養(yǎng)基中質(zhì)量的3％-5％，發(fā)酵溫度35±2℃，且前10-12h的通風(fēng)量為0.07m/(m·min)，中期的通風(fēng)量為0.1-0.12m/(m·min)，發(fā)酵最后10-20h即后期的通風(fēng)量為0.08m/(m·min)。

14、優(yōu)選的，所述步驟s5中硝酸鎳溶液的質(zhì)量濃度為2％-4％，且秋葵凍干粉與硝酸鎳溶液混合的料液比為1∶1.2-1.5。

15、優(yōu)選的，所述步驟s5中混合液、硼氫化鈉、氯化鈣、磷酸氫二鈉加入粗淀粉酶溶液中的量分別為粗淀粉酶溶液的5％-10％、2％-4％、1％和1％，且靜置的溫度為2-4℃。

16、優(yōu)選的，步驟s5中離心的條件為在4℃溫度下，以6000-8000r/min的轉(zhuǎn)速離心20-25min。

17、優(yōu)選的，耐高溫淀粉酶應(yīng)用于織物退漿工藝，且應(yīng)用方法為將耐高溫淀粉酶按照10-15ml/l加水稀釋后單獨(dú)或混合其它助劑對(duì)印染紡織品進(jìn)行浸漬，并通入熱蒸汽退漿處理。

18、本發(fā)明提供一種耐高溫淀粉酶的制備方法及其應(yīng)用，與現(xiàn)有技術(shù)相比優(yōu)點(diǎn)在于：

19、本發(fā)明在耐熱地衣芽孢桿菌的培養(yǎng)基中添加有秋葵凍干粉，能夠有效促進(jìn)地衣芽孢桿菌的增殖和淀粉酶的生產(chǎn)，并進(jìn)一步對(duì)淀粉酶起到高溫保護(hù)的作用，在后續(xù)對(duì)粗淀粉酶溶液處理時(shí)添加經(jīng)過(guò)硝酸鎳氧化后的秋葵凍干粉，并聯(lián)合添加硼氫化鈉、氯化鈣和磷酸氫二鈉能夠進(jìn)一步提升淀粉酶的活性，綜合提升淀粉酶的耐高溫性，使制得的淀粉酶在高于95℃時(shí)，仍能保持一定的活力，并且能夠有效實(shí)現(xiàn)織物退漿，提升整體的退漿效率。

技術(shù)特征：

1.一種耐高溫淀粉酶的制備方法，其特征在于，所述耐高溫淀粉酶的制備方法包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種耐高溫淀粉酶的制備方法，其特征在于：所述步驟s1中種子液中活菌數(shù)為106-1010個(gè)/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種耐高溫淀粉酶的制備方法，其特征在于，所述步驟s2中秋葵凍干粉的制備方法包括以下步驟：

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種耐高溫淀粉酶的制備方法，其特征在于：所述步驟s3中種子液接種至液體發(fā)酵培養(yǎng)基中量為液體發(fā)酵培養(yǎng)基中質(zhì)量的3％-5％，發(fā)酵溫度35±2℃，且前10-12h的通風(fēng)量為0.07m/(m·min)，中期的通風(fēng)量為0.1-0.12m/(m·min)，發(fā)酵最后10-20h即后期的通風(fēng)量為0.08m/(m·min)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種耐高溫淀粉酶的制備方法，其特征在于：所述步驟s5中硝酸鎳溶液的質(zhì)量濃度為2％-4％，且秋葵凍干粉與硝酸鎳溶液混合的料液比為1∶1.2-1.5。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種耐高溫淀粉酶的制備方法，其特征在于：所述步驟s5中混合液、硼氫化鈉、氯化鈣、磷酸氫二鈉加入粗淀粉酶溶液中的量分別為粗淀粉酶溶液的5％-10％、2％-4％、1％和1％，且靜置的溫度為2-4℃。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種耐高溫淀粉酶的制備方法，其特征在于：步驟s5中離心的條件為在4℃溫度下，以6000-8000r/min的轉(zhuǎn)速離心20-25min。

8.一種如權(quán)利要求1-7任意所述制備方法制備得到的耐高溫淀粉酶于織物退漿工藝中的應(yīng)用。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于：所述應(yīng)用方法為將耐高溫淀粉酶按照10-15ml/l加水稀釋后單獨(dú)或混合其它助劑對(duì)印染紡織品進(jìn)行浸漬，并通入熱蒸汽退漿處理。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供一種耐高溫淀粉酶的制備方法及其應(yīng)用，涉及淀粉酶生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域。所述耐高溫淀粉酶的制備方法主要為選用耐熱地衣芽孢桿菌，并將耐熱地衣芽孢桿菌種子液接種至秋葵凍干粉、麩皮、酵母膏、硝酸鈉、蛋白胨、磷酸二氫鉀、氯化鈉組成的液體發(fā)酵培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，后續(xù)采用硝酸鎳改性的秋葵凍干粉和硼氫化鈉、氯化鈣和磷酸氫二鈉進(jìn)行混合處理。本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)的不足，有效提升制備的淀粉酶的酶活性，同時(shí)采用培養(yǎng)基原料和后續(xù)原料處理，有效提升耐熱地衣芽孢桿菌產(chǎn)淀粉酶的耐高溫效果和活性，綜合提升淀粉酶高溫蒸汽退漿的效果。

技術(shù)研發(fā)人員：余方政,劉紀(jì)元,魏宇
受保護(hù)的技術(shù)使用者：廣州大久生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19