本發(fā)明屬于生物免疫學(xué)，具體涉及一種口蝦蛄致敏原原肌球蛋白的t細(xì)胞表位肽及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、口蝦蛄(oratosquilla?oratoria)是亞洲沿海地區(qū)消費量較高的蝦類之一，年捕撈量約占全國蝦類捕撈總量的五分之一；隨著口蝦蛄消費量的不斷增長，其引起的過敏反應(yīng)值得我們重視。原肌球蛋白(tropomyosin，tm)是口蝦蛄及其它甲殼類水產(chǎn)品的主要致敏原，可與72％～98％甲殼類食物過敏患者血清發(fā)生特異性的ige結(jié)合；同時，其具有耐高溫高壓、耐酸堿等特性，是制約低致敏性水產(chǎn)品研發(fā)的主要原因之一。

2、致敏原的抗原表位與免疫細(xì)胞表面受體特異性結(jié)合是引發(fā)過敏反應(yīng)的必要條件?？乖砦恢饕譃閠細(xì)胞表位和b細(xì)胞表位。在ige介導(dǎo)的食物過敏過程中，t細(xì)胞表位被t淋巴細(xì)胞識別并誘導(dǎo)輔助性th0細(xì)胞增殖并分化，抗原特異性cd4+t細(xì)胞可分化為th2型細(xì)胞，產(chǎn)生細(xì)胞因子(il-4、il-5、il-13)，導(dǎo)致b細(xì)胞分化為漿細(xì)胞產(chǎn)生ige，其與效應(yīng)細(xì)胞表面的fcεrⅰ受體發(fā)生交聯(lián)作用，引起機(jī)體出現(xiàn)嚴(yán)重的過敏反應(yīng)。t細(xì)胞表位肽具有不能與ige交聯(lián)、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反應(yīng)等特點，因此以t細(xì)胞表位肽為主的肽免疫治療(peptideimmunotherapy，pit)被認(rèn)為可以安全有效治療食物過敏的策略?；趖細(xì)胞表位串聯(lián)肽的重組疫苗具有低致敏性、可用于機(jī)體免疫調(diào)節(jié)等特性，在塵螨過敏和花粉過敏的治療中有較好的效果，但其對于蝦類過敏的療效還有待研究。

3、因此，鑒定口蝦蛄主要致敏原tm的t細(xì)胞表位，構(gòu)建t細(xì)胞表位串聯(lián)肽，可為開發(fā)具有免疫耐受潛力的疫苗提供理論依據(jù)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決上述技術(shù)中的技術(shù)問題之一。

2、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：

3、一種口蝦蛄致敏原原肌球蛋白的t細(xì)胞表位肽，其為以下任一或多個表位多肽，所述表位多肽的氨基酸序列如seq?id?no:1～4所示。

4、一種用于脫敏治療的t細(xì)胞表位串聯(lián)肽，將上述氨基酸序列如seq?id?no:1～4所示的四條t細(xì)胞表位肽按順序串聯(lián)，即得所述t細(xì)胞表位串聯(lián)肽。

5、可選地，串聯(lián)t細(xì)胞表位肽的連接子為kk、gpgpg、lrmklpks、eaaak、gggs中的一種或多種。

6、進(jìn)一步，所述t細(xì)胞表位串聯(lián)肽的氨基酸序列如seq?id?no:5所示。

7、一種編碼上述t細(xì)胞表位串聯(lián)肽的基因，所述基因的核苷酸序列如seq?id?no:6所示。

8、一種含有上述基因的生物材料，所述生物材料為重組表達(dá)載體或重組菌株。

9、上述t細(xì)胞表位肽、上述的t細(xì)胞表位串聯(lián)肽或上述的生物材料在制備脫敏制劑中的應(yīng)用。

10、一種多肽疫苗，含有上述的t細(xì)胞表位肽或上述的t細(xì)胞表位串聯(lián)肽。

11、可選地，所述多肽疫苗還包含藥學(xué)上可接受的佐劑。

12、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供了一種口蝦蛄致敏原原肌球蛋白的t細(xì)胞表位肽，具備以下有益效果：

13、本發(fā)明利用生物信息學(xué)技術(shù)預(yù)測出口蝦蛄tm的10個t細(xì)胞表位肽，采用cd4+t細(xì)胞增殖實驗結(jié)合il-2的釋放水平、血清學(xué)實驗鑒定出4個無ige反應(yīng)性的t細(xì)胞表位肽。基于t細(xì)胞表位肽設(shè)計了一種具有免疫耐受潛力的t細(xì)胞表位串聯(lián)肽，可開發(fā)用于預(yù)防或治療蝦類過敏的脫敏制劑，為研究和制備一種具有免疫耐受潛力的疫苗提供新策略。

14、本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發(fā)明的實踐了解到。

技術(shù)特征：

1.一種口蝦蛄致敏原原肌球蛋白的t細(xì)胞表位肽，其特征在于，其為以下任一或多個表位多肽，所述表位多肽的氨基酸序列如seq?id?no:1～4所示。

2.一種用于脫敏治療的t細(xì)胞表位串聯(lián)肽，其特征在于，將權(quán)利要求1中氨基酸序列如seq?id?no:1～4所示的四條t細(xì)胞表位肽按順序串聯(lián)，即得所述t細(xì)胞表位串聯(lián)肽。

3.如權(quán)利要求2所述的t細(xì)胞表位串聯(lián)肽，其特征在于，串聯(lián)t細(xì)胞表位肽的連接子為kk、gpgpg、lrmklpks、eaaak、gggs中的一種或多種。

4.如權(quán)利要求2所述的t細(xì)胞表位串聯(lián)肽，其特征在于，所述t細(xì)胞表位串聯(lián)肽的氨基酸序列如seq?id?no:5所示。

5.編碼權(quán)利要求4所述的t細(xì)胞表位串聯(lián)肽的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如seq?id?no:6所示。

6.一種含有權(quán)利要求4所述的基因的生物材料，其特征在于，所述生物材料為重組表達(dá)載體或重組菌株。

7.權(quán)利要求1所述的t細(xì)胞表位肽、權(quán)利要求4所述的t細(xì)胞表位串聯(lián)肽或權(quán)利要求6所述的生物材料在制備脫敏制劑中的應(yīng)用。

8.一種多肽疫苗，其特征在于，含有權(quán)利要求1所述的t細(xì)胞表位肽或權(quán)利要求2-5中任一項所述的t細(xì)胞表位串聯(lián)肽。

9.如權(quán)利要求8所述的多肽疫苗，其特征在于，所述多肽疫苗還包含藥學(xué)上可接受的佐劑。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種口蝦蛄致敏原原肌球蛋白的T細(xì)胞表位肽及其應(yīng)用，其為以下任一或多個表位多肽，所述表位多肽的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1～4所示。本發(fā)明利用生物信息學(xué)軟件預(yù)測出10個T細(xì)胞表位肽。通過CD4<supgt;+</supgt;T細(xì)胞增殖實驗結(jié)合IL?2的釋放水平、血清學(xué)實驗鑒定出4個無IgE反應(yīng)性的T細(xì)胞表位肽；基于T細(xì)胞表位肽設(shè)計了一種具有免疫耐受潛力的T細(xì)胞表位串聯(lián)肽，可開發(fā)用于預(yù)防或治療蝦類過敏的脫敏制劑，為開發(fā)食物過敏免疫療法提供新策略。

技術(shù)研發(fā)人員：劉光明,倪玲娜,劉萌,桓霏,鄔銘瑄
受保護(hù)的技術(shù)使用者：廈門海洋職業(yè)技術(shù)學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10