本發(fā)明屬于藥物合成領(lǐng)域，具體涉及一種抑制urat1的芳酰基荷葉堿衍生物及其制備方法、應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、urat1?是oats(organic?anion?transporters)家族成員，編碼基因?yàn)? slc22a12，urat1?是一個(gè)?12?跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白，含有555個(gè)氨基酸。主要在腎臟近端小管上皮細(xì)胞的頂端刷緣膜上表達(dá)。利用管腔兩側(cè)的濃度梯度和化學(xué)梯度差將尿酸鹽從近端腎小管腔內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)到腎小管上皮細(xì)胞，這是尿酸鹽重吸收的第一步。研究表明?urat1?只在腎臟組織中表達(dá)，是參與尿酸鹽重吸收的最重要的轉(zhuǎn)運(yùn)體。經(jīng)鑒定urat1是一個(gè)高親和力的尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)體，是參與尿酸重吸收的主要蛋白（約90%），對(duì)尿酸的轉(zhuǎn)運(yùn)起主導(dǎo)作用。因此，urat1成為近年來(lái)降尿酸藥物的重要靶點(diǎn)。此外，urat1?中的單核苷酸多態(tài)性(single?nucleotidepolymorphism,?snp)被證實(shí)與代謝綜合征的發(fā)病機(jī)制有關(guān)，包括肥胖、低高密度脂蛋白膽固醇、腰圍增加和原發(fā)性高血壓

2、目前，治療高尿酸血癥的臨床藥物別嘌醇、丙磺舒、苯溴馬隆等，該類(lèi)藥物會(huì)對(duì)包括腎臟在內(nèi)的泌尿系統(tǒng)產(chǎn)生慢性損傷，且易形成尿酸鹽結(jié)晶和結(jié)石。

3、荷葉堿是一種從睡蓮科植物蓮（ nelumbo?nucifera?gaertn）中提取的生物堿。目前，藥理研究表明，其具有抗氧化、抗肥胖、抗炎、抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗病毒、抗腫瘤等多種藥理活性。由于荷葉堿毒性低、副作用小，成為了藥物研究的熱點(diǎn)之一，擁有廣闊的開(kāi)發(fā)前景。

4、王明興等通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)荷葉中的蓮堿具有降低血清尿酸鹽，提高腎功能的作用，同時(shí)能夠抑制因氧嗪酸鉀導(dǎo)致的高尿酸血癥小鼠體內(nèi)腎白細(xì)胞介素的產(chǎn)生。首次報(bào)道了蓮堿可以通過(guò)調(diào)節(jié)腎高尿酸血癥的有機(jī)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和炎癥信號(hào)發(fā)揮抗炎和抗高尿酸血癥，該研究發(fā)現(xiàn)，日常服用富含蓮堿的相關(guān)補(bǔ)充劑可以有效保護(hù)和預(yù)防腎炎型高尿酸血癥。然而，荷葉堿的降尿酸活性較低，無(wú)法直接用于臨床降尿酸藥物。因此，對(duì)尿酸重吸收或分泌的蛋白質(zhì)進(jìn)行調(diào)節(jié)是預(yù)防和治療高尿酸血癥的有效策略。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種抑制urat1的芳?；扇~堿衍生物。

2、本發(fā)明還提供了上述芳酰基荷葉堿衍生物的制備方法。

3、本發(fā)明進(jìn)一步的提供了上述芳?；扇~堿衍生物制備urat1抑制劑中的應(yīng)用。

4、本發(fā)明為了實(shí)現(xiàn)上述目的所采用的技術(shù)方案為：

5、本發(fā)明提供了一種抑制urat1的芳?；扇~堿衍生物，其分子結(jié)構(gòu)式為：

6、；

7、r為、、、、。

8、本發(fā)明還提供了上述抑制urat1的芳?；扇~堿衍生物的制備方法，包括以下步驟：

9、（1）將荷葉堿溶于甲醇中，然后加入雙氧水，攪拌反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后，調(diào)節(jié)反應(yīng)液的ph?值，然后加入蒸餾水，氯仿萃取，氯仿層用無(wú)水na2so4干燥，過(guò)濾去除固體，濾液減壓濃縮，硅膠柱層析分離，洗脫，得荷葉堿- n-氧化物；

10、（2）冰浴條件下，將荷葉堿- n-氧化物溶于甲醇中，然后加入feso4·7h2o的甲醇溶液，撤去冰浴后攪拌反應(yīng)，得反應(yīng)液；向反應(yīng)液中加入飽和?nahco3溶液，繼續(xù)反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后，加入蒸餾水，氯仿萃取，氯仿層用無(wú)水na2so4干燥，過(guò)濾除去固體，減壓蒸干，硅膠柱層析分離，洗脫，得原荷葉堿；

11、（3）將原荷葉堿與三乙胺溶于無(wú)水dcm，緩慢滴加r-x，攪拌反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后，淬滅反應(yīng)，反應(yīng)液用二氯甲烷萃取，無(wú)水硫酸鈉干燥，將濾液濃縮，柱層析得目標(biāo)化合物。

12、進(jìn)一步的，步驟（1）中，所述荷葉堿和雙氧水的比例為1?mmol：7.5?ml。

13、進(jìn)一步的，步驟（1）中，所述攪拌反應(yīng)為室溫條件下攪拌反應(yīng)24h；；采用3m?naoh水溶液調(diào)節(jié)ph為10；采用氯仿：甲醇：三乙胺按體積比30:1:1‰組成的洗脫劑進(jìn)行洗脫。

14、進(jìn)一步的，步驟（2）中，荷葉堿- n-氧化物和feso4·7h2o的摩爾比為1:2；feso4·7h2o的甲醇溶液的濃度為1?mol/l；荷葉堿- n-氧化物和飽和nahco3溶液的比例為1mmol：10ml；。

15、進(jìn)一步的，步驟（2）中，所述攪拌反應(yīng)為室溫條件下攪拌反應(yīng)12h；?所述繼續(xù)反應(yīng)的時(shí)間為20min；采用氯仿：甲醇：三乙胺按體積比10:1:1‰組成的洗脫劑洗脫。

16、進(jìn)一步的，步驟（3）中，原荷葉堿、三乙胺和r-x的摩爾比為1：2-5：1-2。

17、進(jìn)一步的，步驟（3）中，滴加r-x的過(guò)程中保持溫度為0℃；所述攪拌反應(yīng)為室溫條件下攪拌10-12h；淬滅反應(yīng)采用飽和碳酸氫鈉。

18、本發(fā)明還提供了上述芳?；扇~堿衍生物在制備urat1抑制劑中的應(yīng)用。

19、本發(fā)明制備芳?；扇~堿衍生物的反應(yīng)路線(xiàn)為：

20、

21、本發(fā)明的有益效果為：

22、（1）本發(fā)明通過(guò)引入活性基團(tuán)對(duì)荷葉堿進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，提高了荷葉堿在降尿酸中的生物活性，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明制備的芳酰基荷葉堿衍生物能夠抑制hk-2細(xì)胞中urat1的表達(dá)，能夠促進(jìn)尿酸排泄，從而降低尿酸水平，對(duì)進(jìn)一步開(kāi)發(fā)新的urat1抑制劑具有重要意義；

23、（2）本發(fā)明提供的具有降尿酸和腎臟保護(hù)作用的芳酰基荷葉堿衍生物，合成方法簡(jiǎn)單、原料價(jià)格低廉，結(jié)構(gòu)新穎。

技術(shù)特征：

1.一種抑制urat1的芳酰基荷葉堿衍生物，其特征在于，其分子結(jié)構(gòu)式為：

2.一種如權(quán)利要求1所述的抑制urat1的芳?；扇~堿衍生物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟（1）中，所述荷葉堿和雙氧水的比例為1?mmol：7.5?ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的制備方法，其特征在于，步驟（1）中，所述攪拌反應(yīng)為室溫條件下攪拌反應(yīng)24h；采用3m?naoh水溶液調(diào)節(jié)ph為10；采用氯仿：甲醇：三乙胺按體積比30:1:1‰組成的洗脫劑進(jìn)行洗脫。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟（2）中，荷葉堿-n-氧化物和feso4·7h2o的摩爾比為1:2；feso4·7h2o的甲醇溶液的濃度為1?mol/l；荷葉堿-n-氧化物和飽和?nahco3溶液的比例為1mmol：10ml；。

6.根據(jù)權(quán)利要求2或5所述的制備方法，其特征在于，步驟（2）中，所述攪拌反應(yīng)為室溫條件下攪拌反應(yīng)12h；?所述繼續(xù)反應(yīng)的時(shí)間為20min；采用氯仿：甲醇：三乙胺按體積比10:1:1‰組成的洗脫劑洗脫。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，步驟（3）中，原荷葉堿、三乙胺和r-x的摩爾比為1：2-5：1-2。

8.根據(jù)權(quán)利要求2或7所述的制備方法，其特征在于，步驟（3）中，滴加r-x的過(guò)程中保持溫度為0℃；所述攪拌反應(yīng)為室溫條件下攪拌10-12h；淬滅反應(yīng)采用飽和碳酸氫鈉。

9.一種如權(quán)利要求1所述的芳?；扇~堿衍生物在制備urat1抑制劑中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于藥物合成領(lǐng)域，具體涉及一種抑制URAT1的芳酰基荷葉堿衍生物及其制備方法、應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)引入活性基團(tuán)對(duì)荷葉堿進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，提高了荷葉堿在降尿酸中的生物活性，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明制備的芳?；扇~堿衍生物能夠抑制HK?2細(xì)胞中URAT1的表達(dá)，能夠促進(jìn)尿酸排泄，從而降低尿酸水平，對(duì)進(jìn)一步開(kāi)發(fā)新的URAT1抑制劑具有重要意義；本發(fā)明提供的具有降尿酸和腎臟保護(hù)作用的芳?；扇~堿衍生物，合成方法簡(jiǎn)單、原料價(jià)格低廉，結(jié)構(gòu)新穎。

技術(shù)研發(fā)人員：劉彥斐,劉超,孫金月,郭溆,陳瑩瑩,孫叔濤,張夢(mèng)啟,任麒東
受保護(hù)的技術(shù)使用者：山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10