本發(fā)明屬于生物工程，具體涉及一種鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、我國水禽養(yǎng)殖與消費(fèi)市場龐大，水禽養(yǎng)殖業(yè)，尤其是鴨、鵝等水禽的飼養(yǎng)歷史悠久，并且隨著農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化的推進(jìn)，逐漸實(shí)現(xiàn)了從散養(yǎng)到規(guī)?；⒓s化的轉(zhuǎn)變。這一轉(zhuǎn)變不僅顯著提升了生產(chǎn)效率，也促進(jìn)了水禽產(chǎn)品市場的繁榮與多樣化。然而，隨著水禽養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大和養(yǎng)殖密度的增加，一系列挑戰(zhàn)也隨之而來，其中最為緊迫的便是水禽疫病的防控問題。近幾年來，水禽疫病呈現(xiàn)出逐年增多的趨勢，老病依然頑固存在，新發(fā)疫病也不斷涌現(xiàn)，給養(yǎng)殖業(yè)帶來了前所未有的壓力。

2、禽呼腸孤病毒(avian?orthoreoviruses,arv)為呼腸孤病毒科(reoviridae)正呼腸孤病毒屬(orthoreovirus)的成員之一，能夠感染不同種類的禽類，包括常見的雞、火雞、鴕鳥、水禽、野鴨等，感染后會引起禽類的吸收障礙綜合征、腱鞘炎、病毒性關(guān)節(jié)炎、矮小綜合征及免疫抑制等疾病，這類病毒以其復(fù)雜的致病機(jī)制和多樣的臨床表現(xiàn)，成為了影響全球養(yǎng)禽業(yè)健康發(fā)展的重要因素。

3、具體而言，arv的不同亞型在水禽中引發(fā)的疾病各具特色。例如，針對鴨類的呼腸孤病毒(duck?reovirus,drv)可引起一系列嚴(yán)重的臨床癥狀，影響鴨群的生長性能和健康狀態(tài)；番鴨呼腸孤病毒(muscovy?duck?reovirus,mdrv)和近年來新發(fā)現(xiàn)的鵝呼腸孤病毒(goose?reovirus,grv)同樣不容小覷，它們能夠?qū)е蛮Z群出現(xiàn)免疫抑制、生長遲緩乃至死亡等嚴(yán)重后果，對養(yǎng)鵝業(yè)構(gòu)成了重大威脅。

4、此外，目前也并未見報道鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體及其與疫苗的聯(lián)合應(yīng)用。因此，研發(fā)一種鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體，將其與共感染病毒疫苗制備聯(lián)合疫苗，對于鵝類疾病防治是尤為關(guān)鍵的。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為滿足上述領(lǐng)域的需求，本發(fā)明提供一種鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體及其制備方法和應(yīng)用。

2、本發(fā)明的目的之一在于提供一種鵝呼腸孤病毒，命名為鵝呼腸孤病毒株yj24x，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國武漢，武漢大學(xué)，保藏日期為2024年08月29日，保藏編號為cctcc?no:v202477。

3、本發(fā)明的目的之二在于提供上述鵝呼腸孤病毒株yj24x在制備鵝呼腸孤病毒蛋黃抗體中的應(yīng)用。

4、本發(fā)明的目的之三在于提供一種鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體的制備方法，包括以下步驟：

5、(1)對上述的鵝呼腸孤病毒株yj24x進(jìn)行滅活，將其制成免疫原然后對產(chǎn)蛋雞進(jìn)行免疫；

6、(2)經(jīng)步驟(1)免疫的產(chǎn)蛋雞的卵黃抗體瓊擴(kuò)效價≥1:26時，收集雞蛋；

7、(3)用步驟(2)收集的雞蛋來制備鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體。

8、優(yōu)選的，步驟(1)中免疫過程為：

9、第1次免疫：開產(chǎn)前4～6周，0.5ml/羽；

10、第2次免疫：第1次免疫后14日，加強(qiáng)免疫1.0ml/羽；

11、第3次免疫：第2次免疫后14日，加強(qiáng)免疫1.5ml/羽；

12、第n次免疫：第3次免疫后，每隔2～3個月，加強(qiáng)免疫1.5ml/羽。

13、本發(fā)明的目的之四在于提供上述鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體的制備方法制得的鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體。

14、本發(fā)明的目的之五在于提供上述鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體在與鴨傳染性漿膜炎二價滅活疫苗制備聯(lián)合疫苗中的應(yīng)用。

15、優(yōu)選的，鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體在與鴨傳染性漿膜炎二價滅活疫苗制備聯(lián)合疫苗中的應(yīng)用，包括以下步驟：

16、使用稀釋液稀釋鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體，再將其與鴨傳染性漿膜炎二價滅活疫苗混勻后制得聯(lián)合疫苗。

17、本發(fā)明采用上述技術(shù)方案的有益效果為：使用稀釋液將鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體與滅活疫苗充分溶解混勻后，配伍使用時不影響鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體與滅活疫苗發(fā)揮作用；可起到一針多防的效果，在同時預(yù)防多種疾病的同時，也減小了免疫成本和免疫應(yīng)激；使用過程安全可靠，綠色環(huán)保，未添加抗生素，做好減抗限抗。

18、更優(yōu)選的，稀釋液包括以下重量份的組分：白油1～3份、司盤80?0.5～2份、吐溫-80?0.3～0.8份和4～6份轉(zhuǎn)移因子。

19、更優(yōu)選的，稀釋液包括以下重量份的組分：白油2份、司盤80?1份、吐溫-80?0.5份和5份轉(zhuǎn)移因子。

20、更優(yōu)選的，每毫升轉(zhuǎn)移因子中包括：多肽0.5～1.5mg、核苷酸25～35μg及多糖1～1.5mg。

21、更優(yōu)選的，每毫升轉(zhuǎn)移因子中包括：多肽1mg、核苷酸30μg及多糖1.3mg。

22、更優(yōu)選的，多肽為葛根肽提取物，多糖為黃芪多糖。

23、本發(fā)明具有以下有益效果：

24、本發(fā)明提供的鵝呼腸孤病毒，命名為鵝呼腸孤病毒株yj24x，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國武漢，武漢大學(xué)，保藏日期為2024年08月29日，保藏編號為cctcc?no:v202477。該毒株的eld50為10-3.6/0.1ml；雛鵝回歸實(shí)驗表明，該毒株攻擊1～7日齡雛鵝發(fā)病率達(dá)100％，死亡率50％，鵝呼腸孤病毒株yj24x對雛鵝具有較強(qiáng)的毒性。將其制備為凍干蛋黃抗體，溶解性較好且安全有效，能夠產(chǎn)生較高水平的抗體，防護(hù)能力強(qiáng)。此外，本發(fā)明還將上述鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體在與鴨傳染性漿膜炎二價滅活疫苗制備聯(lián)合疫苗，能有效提高雛鵝對呼腸孤及漿膜炎的免疫效果，減少保護(hù)期內(nèi)死亡和發(fā)病情況，可有效應(yīng)對混合感染疫情，減少疾病防控壓力，顯著減少鵝呼腸孤病毒病及混合病毒疾病給水禽養(yǎng)殖業(yè)帶來的經(jīng)濟(jì)損失。

技術(shù)特征：

1.一種鵝呼腸孤病毒，命名為鵝呼腸孤病毒株yj24x，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國武漢，武漢大學(xué)，保藏日期為2024年08月29日，保藏編號為cctcc?no:v202477。

2.權(quán)利要求1所述的鵝呼腸孤病毒株yj24x在制備鵝呼腸孤病毒蛋黃抗體中的應(yīng)用。

3.一種鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)中免疫過程為：

5.根據(jù)權(quán)利要求3～4任一項所述的鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體的制備方法制得的鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體。

6.權(quán)利要求5所述的鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體在與鴨傳染性漿膜炎二價滅活疫苗制備聯(lián)合疫苗中的應(yīng)用。

7.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，包括以下步驟：

8.如權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述稀釋液包括以下重量份的組分：白油1～3份、司盤80?0.5～2份、吐溫-80?0.3～0.8份和4～6份轉(zhuǎn)移因子。

9.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述每毫升轉(zhuǎn)移因子中包括：多肽0.5～1.5mg、核苷酸25～35μg及多糖1～1.5mg。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體及其制備方法和應(yīng)用，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明公開的鵝呼腸孤病毒毒株YJ24X，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國武漢，武漢大學(xué)，保藏日期為2024年08月29日，保藏編號為CCTCC?NO:V202477。本發(fā)明還公開了鵝呼腸孤病毒株YJ24X在制備鵝呼腸孤病毒蛋黃抗體中的應(yīng)用。本發(fā)明還公開了鵝呼腸孤病毒凍干蛋黃抗體在與鴨傳染性漿膜炎二價滅活疫苗制備聯(lián)合疫苗中的應(yīng)用。該鵝呼腸孤病毒株YJ24X對雛鵝具有強(qiáng)毒性，將其制備為凍干蛋黃抗體安全有效，防護(hù)能力強(qiáng)；將其與鴨傳染性漿膜炎二價滅活疫苗制備聯(lián)合疫苗，可有效應(yīng)對混合感染疫情，減少疾病防控壓力。

技術(shù)研發(fā)人員：何信群,李來旭,鄧良菊,肖昌建,張強(qiáng),劉哲君,李閣,唐澤珍
受保護(hù)的技術(shù)使用者：重慶永健生物技術(shù)有限責(zé)任公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19