本發(fā)明涉及四氫甲基嘧啶羧酸,具體為一種通過發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法。
背景技術(shù):
1、根據(jù)中國專利網(wǎng)已公開的專利,專利名稱為:一種四氫甲基嘧啶羧酸發(fā)酵過程誘導(dǎo)劑的加入方法,專利號為:202310191372.6,本發(fā)明涉及氨基酸衍生物生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域,并提供一種四氫甲基嘧啶羧酸發(fā)酵過程誘導(dǎo)劑的加入方法,四氫甲基嘧啶羧酸發(fā)酵工藝流程包含斜面培養(yǎng)、種子瓶培養(yǎng)、種子罐培養(yǎng)、發(fā)酵罐培養(yǎng),具體步驟如下:先進行斜面配方的制備;然后在種子瓶中培養(yǎng)種子培養(yǎng)基;將種子培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至種子罐中培養(yǎng),在種子罐進行培養(yǎng)時取樣測od值、ph值、殘?zhí)侵?;最后將種子罐中的培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移至發(fā)酵罐中進行培養(yǎng),測量發(fā)酵培養(yǎng)罐中od含量,發(fā)酵培養(yǎng)罐中od含量到達50及以上時加入誘導(dǎo)劑進行誘導(dǎo),進行誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)的同時將發(fā)酵培養(yǎng)罐中的溫度調(diào)節(jié)至26-30℃誘導(dǎo)4h,在8h、12h、16h分別向培養(yǎng)罐中加入誘導(dǎo)劑進行誘導(dǎo)并測量發(fā)酵培養(yǎng)罐中的發(fā)酵物含量,最后得出最佳誘導(dǎo)時間;而上述中的四氫甲基嘧啶羧酸通過發(fā)酵法制備時過程過于復(fù)雜,并且成本較高,產(chǎn)物得到率也較低,影響了制備的質(zhì)量。
2、因此,需要對四氫甲基嘧啶羧酸進行設(shè)計改造,有效的防止其制備時過程過于復(fù)雜,并且成本較高,產(chǎn)物得到率也較低的現(xiàn)象。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、為解決上述背景技術(shù)中提出的問題,本發(fā)明的目的在于提供一種通過發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,具備可以高效制備的優(yōu)點,解決了制備時過程過于復(fù)雜,并且成本較高,產(chǎn)物得到率也較低的問題。
2、為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:一種通過發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,包括步驟a)準備階段;步驟b)活化菌種;步驟c)種子培養(yǎng);步驟d)發(fā)酵處理;步驟e)提取純化;步驟f)干燥處理;步驟g)包裝處理;
3、步驟a)準備階段:首先準備斜面配方、種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基,種子培養(yǎng)基一般包括葡萄糖、酵母蛋白胨、酵母提取物、氯化鈉等,用于在種子罐中進行培養(yǎng),發(fā)酵培養(yǎng)基則包括葡萄糖、磷酸氫二銨、磷酸二氫銨、氯化鉀、七水硫酸鎂、酵母蛋白胨、酵母提取物以及微量元素母液等;
4、步驟b)活化菌種:然后將大腸桿菌接種至固體平板培養(yǎng)基上,得到活化菌;
5、步驟c)種子培養(yǎng):將活化菌接種至種子培養(yǎng)基中,在種子罐中進行培養(yǎng),得到種子培養(yǎng)液,種子培養(yǎng)基的配方和條件(如溫度、ph值等)需要精心選擇和優(yōu)化,以確保菌種的良好生長和代謝;
6、步驟d)發(fā)酵處理:將種子培養(yǎng)液接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中,在發(fā)酵罐中進行培養(yǎng),在發(fā)酵過程中,需要加入誘導(dǎo)劑和補料培養(yǎng)基,以促進四氫甲基嘧啶羧酸的合成,同時,發(fā)酵罐內(nèi)的溫度、ph值、攪拌速度等條件也需要嚴格控制,以保證發(fā)酵過程的順利進行;
7、步驟e)提取純化:經(jīng)過一段時間的發(fā)酵后,發(fā)酵液中會積累一定量的四氫甲基嘧啶羧酸,此時,需要將發(fā)酵液進行提取和純化,以得到高純度的四氫甲基嘧啶羧酸產(chǎn)品,具體的提取和純化方法可以根據(jù)實際需求和條件進行選擇和優(yōu)化;
8、步驟f)干燥處理:將純化后的四氫甲基嘧啶羧酸進行干燥處理,去除其中的水分和雜質(zhì);
9、步驟g)包裝處理:然后,將干燥后的產(chǎn)品進行包裝和儲存,以便后續(xù)使用或銷售。
10、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述準備階段時需要在無菌環(huán)境下進行分揀,并且各個培養(yǎng)基都需要按照比例進行調(diào)配。
11、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述活化菌種時工作人員需要佩戴防護服和護目鏡,且在無菌環(huán)境下進行。
12、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述種子培養(yǎng)時得到的種子培養(yǎng)液需要放在玻璃容器內(nèi)進行保存,避免接觸空氣。
13、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述發(fā)酵處理時在適當?shù)臏囟?、酸堿度、通氣等條件下進行發(fā)酵,控制發(fā)酵過程中的各項參數(shù)以促進thmpc的產(chǎn)生。
14、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述提取純化時采用結(jié)晶、溶劑洗滌、柱層析等步驟進行操作處理。
15、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述干燥處理時需要反復(fù)干燥最少三次,且干燥溫度需要根據(jù)周圍溫度進行實時調(diào)式。
16、作為本發(fā)明優(yōu)選的,所述包裝處理時采用耐腐蝕高強度的容器進行包裝,確保了產(chǎn)品的質(zhì)量。
17、與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果如下:
18、1、本發(fā)明四氫甲基嘧啶羧酸改變了傳統(tǒng)誘導(dǎo)培養(yǎng)的方式,采用了發(fā)酵法制備的方式,其制備過程就不會過于復(fù)雜,成本也不會較高,產(chǎn)物得到率也不會很低,更不會影響制備的質(zhì)量,并且通過準備階段、活化菌種、種子培養(yǎng)、發(fā)酵處理、提取純化、干燥處理和包裝處理對四氫甲基嘧啶羧酸進行發(fā)酵制備,同時在每個步驟之間都要進行清潔處理,使其更加環(huán)保,從而具備高效制備的效果。
1.一種通過發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:包括步驟a)準備階段;步驟b)活化菌種;步驟c)種子培養(yǎng);步驟d)發(fā)酵處理;步驟e)提取純化;步驟f)干燥處理;步驟g)包裝處理;
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述準備階段時需要在無菌環(huán)境下進行分揀,并且各個培養(yǎng)基都需要按照比例進行調(diào)配。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述活化菌種時工作人員需要佩戴防護服和護目鏡,且在無菌環(huán)境下進行。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述種子培養(yǎng)時得到的種子培養(yǎng)液需要放在玻璃容器內(nèi)進行保存,避免接觸空氣。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述發(fā)酵處理時在適當?shù)臏囟取⑺釅A度、通氣等條件下進行發(fā)酵,控制發(fā)酵過程中的各項參數(shù)以促進thmpc的產(chǎn)生。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述提取純化時采用結(jié)晶、溶劑洗滌、柱層析等步驟進行操作處理。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述干燥處理時需要反復(fù)干燥最少三次,且干燥溫度需要根據(jù)周圍溫度進行實時調(diào)式。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種通過發(fā)酵法制備四氫甲基嘧啶羧酸的方法,其特征在于:所述包裝處理時采用耐腐蝕高強度的容器進行包裝,確保了產(chǎn)品的質(zhì)量。