本發(fā)明涉及細(xì)胞生物學(xué)和基因工程，特別是涉及一種與水稻抗稻瘟病相關(guān)的蛋白及其編碼基因在水稻抗稻瘟病中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、稻瘟病嚴(yán)重危害水稻生產(chǎn)，挖掘水稻抗病或抗病相關(guān)基因、解析抗病分子機(jī)制并以此為基礎(chǔ)培育抗病品種，是防控稻瘟病的有效策略。國(guó)內(nèi)外研究人員圍繞植物抗病性開展研究，克隆了系列抗病或抗病相關(guān)基因(如pigm、pib、rod1和bsr-d1等)，解析了抗病分子調(diào)控機(jī)制，建立并不斷完善了植物抗病分子模型。將抗病基因和抗病分子理論應(yīng)用于水稻等作物的抗性改良，成功培育了一批抗性優(yōu)良的作物新品種，為保障糧食安全做出了積極貢獻(xiàn)。

2、目前對(duì)作物抗病分子機(jī)理的認(rèn)識(shí)還未完全清楚，加之病原菌致病優(yōu)勢(shì)種群的快速進(jìn)化和頻繁更替，抗病品種通常在種植3到5年后便會(huì)喪失抗性。因此，仍需加強(qiáng)對(duì)水稻抗病或抗病相關(guān)新基因的挖掘與研究，以進(jìn)一步豐富和完善水稻抗病分子調(diào)控理論，指導(dǎo)水稻抗病育種。多囊泡體運(yùn)輸對(duì)植物的抗病反應(yīng)具有重要調(diào)控作用，但該過程在水稻抗病中的作用仍不清楚。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提供一種與水稻抗稻瘟病相關(guān)的蛋白及其編碼基因在水稻抗稻瘟病中的應(yīng)用，以解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題。發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)了一個(gè)定位于多囊泡體的蛋白o(hù)svps20，通過抑制osvps20基因的表達(dá)，可以顯著提高水稻對(duì)稻瘟病的抗性。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下方案：

3、一種與水稻抗稻瘟病相關(guān)的蛋白，氨基酸序列如seq?id?no.4所示。

4、本發(fā)明還提供上述的蛋白的編碼基因，核苷酸序列如seq?id?no.3所示。

5、本發(fā)明還提供一種抑制上述的編碼基因表達(dá)的人工小rna，核苷酸序列如seq?idno.12所示。

6、本發(fā)明還提供一種抑制上述的編碼基因表達(dá)的人工小rna前體序列，核苷酸序列如seq?id?no.11所示。

7、本發(fā)明還提供一種重組載體，包含上述的人工小rna前體序列。

8、進(jìn)一步地，所述重組載體為重組pcambia2300-35s載體。

9、本發(fā)明還提供一種重組宿主細(xì)胞，包含上述的重組載體。

10、進(jìn)一步地，所述重組宿主細(xì)胞為重組農(nóng)桿菌。

11、本發(fā)明還提供抑制水稻中上述編碼基因的表達(dá)量的生物材料在提高水稻對(duì)稻瘟病抗性中的應(yīng)用，所述生物材料為上述的人工小rna前體序列、重組載體或重組宿主細(xì)胞。

12、本發(fā)明還提供一種提高水稻對(duì)稻瘟病抗性的方法，包括將抑制水稻中上述編碼基因的表達(dá)量的生物材料轉(zhuǎn)化入水稻植株中，得到所述編碼基因被抑制表達(dá)的轉(zhuǎn)基因水稻的步驟。

13、本發(fā)明公開了以下技術(shù)效果：

14、本發(fā)明從水稻中分離克隆到一個(gè)定位于多囊泡體的蛋白o(hù)svps20，利用人工小rna介導(dǎo)的基因干擾手段，通過設(shè)計(jì)并在水稻中表達(dá)特異靶向osvps20基因的人工小rna以抑制osvps20基因的表達(dá)，達(dá)到了顯著提高水稻對(duì)稻瘟病的抗性的技術(shù)效果，解決了水稻多囊泡體蛋白對(duì)稻瘟病抗性調(diào)控的認(rèn)知缺乏及如何利用多囊泡體蛋白改良水稻稻瘟病抗性的技術(shù)問題。

15、本發(fā)明為提高水稻對(duì)稻瘟病的抗性提供了新的方法，具有重要的農(nóng)業(yè)應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)特征：

1.一種與水稻抗稻瘟病相關(guān)的蛋白，其特征在于，氨基酸序列如seq?id?no.4所示。

2.一種如權(quán)利要求1所述的蛋白的編碼基因，其特征在于，核苷酸序列如seq?id?no.3所示。

3.一種抑制權(quán)利要求2所述的編碼基因表達(dá)的人工小rna，其特征在于，核苷酸序列如seq?id?no.12所示。

4.一種抑制權(quán)利要求2所述的編碼基因表達(dá)的人工小rna前體序列，其特征在于，核苷酸序列如seq?id?no.11所示。

5.一種重組載體，其特征在于，包含權(quán)利要求4所述的人工小rna前體序列。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的重組載體，其特征在于，所述重組載體為重組pcambia2300-35s載體。

7.一種重組宿主細(xì)胞，其特征在于，包含權(quán)利要求5或6所述的重組載體。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的重組宿主細(xì)胞，其特征在于，所述重組宿主細(xì)胞為重組農(nóng)桿菌。

9.抑制水稻中權(quán)利要求2所述的編碼基因的表達(dá)量的生物材料在提高水稻對(duì)稻瘟病抗性中的應(yīng)用，其特征在于，所述生物材料為權(quán)利要求4所述的人工小rna前體序列、權(quán)利要求5或6所述的重組載體或權(quán)利要求7或8所述的重組宿主細(xì)胞。

10.一種提高水稻對(duì)稻瘟病抗性的方法，其特征在于，包括將抑制水稻中權(quán)利要求2所述的編碼基因的表達(dá)量的生物材料轉(zhuǎn)化入水稻植株中，得到所述編碼基因被抑制表達(dá)的轉(zhuǎn)基因水稻的步驟。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種與水稻抗稻瘟病相關(guān)的蛋白及其編碼基因在水稻抗稻瘟病中的應(yīng)用，涉及細(xì)胞生物學(xué)和基因工程技術(shù)領(lǐng)域。該蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.4所示；該編碼基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示。本發(fā)明從水稻中分離克隆到一個(gè)定位于多囊泡體的蛋白OsVPS20，利用人工小RNA介導(dǎo)的基因干擾手段，通過設(shè)計(jì)并在水稻中表達(dá)特異靶向OsVPS20基因的人工小RNA以抑制OsVPS20基因的表達(dá)，達(dá)到了顯著提高水稻對(duì)稻瘟病的抗性的技術(shù)效果。本發(fā)明為提高水稻對(duì)稻瘟病的抗性提供了新的方法，具有重要的農(nóng)業(yè)應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)研發(fā)人員：朱孝波,陳學(xué)偉,李偉滔,王靜,尹俊杰,賀閩,武炳秀
受保護(hù)的技術(shù)使用者：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/11/11