本申請屬于醫(yī)學臨床檢驗中病源微生物熒光檢測，尤其涉及一種用于陰道微生物熒光檢測的試劑盒及其制備方法。

背景技術：

1、陰道微生物增殖感染引發(fā)的感染類型在臨床上主要分為細菌性陰道病、外陰陰道假絲酵母菌病、滴蟲性陰道炎、需氧菌性陰道炎以及細胞溶解性陰道病等?；加嘘幍姥椎呐栽趹言袝r會影響精子的質量，甚至導致女性不孕；即使懷孕孕期也很容易引起宮內感染、產道感染等環(huán)節(jié)感染胎兒、新生兒，造成流產、早產、先天發(fā)育畸形、智力低下等嚴重后果。還會誘發(fā)其他疾病，如生殖器感染、盆腔炎、肩周炎、性交痛等?？梢?，女性的陰道炎的危害相當大。

2、通過陰道分泌物對炎癥疾病作出快速準確的診斷，是臨床治療的重要前提。陰道分泌物常規(guī)檢查是目前臨床最常用的一種檢驗項目，在門診檢測中，通常采用浸于0.9%氯化鈉溶液涂濕片直接鏡檢，較為快速便捷。但是，該濕片鏡檢法是檢驗師借助顯微鏡觀察，存在一定的主觀因素，且觀察后標本直接扔掉，不利于日后溯源。也有醫(yī)院采用全自動機器分析分泌物常規(guī)項目，但機器多根據(jù)細胞或細菌的大小來分析霉菌和滴蟲，使得其漏檢率和誤診率較高。干化學酶法在陰道病原體的檢查中也有一定應用，但其時效性不及傳統(tǒng)濕片，且干擾因素也較多。而目前較公認的革蘭染色法相對準確，但比較耗時，且與每個檢驗工作者的操作手法有一定關系，不適宜在門診檢測推廣。因此，快速且準確的陰道分泌物檢測方法也得到越來越多的關注，尤其是門診檢驗。

技術實現(xiàn)思路

1、為克服現(xiàn)有技術中存在的上述缺陷，本申請?zhí)峁┝艘环N用于陰道微生物熒光檢測的試劑盒及其制備方法，所述試劑盒不僅可實現(xiàn)對微生物和細胞等的標記與識別，且操作簡便，靈敏度和準確度高。

2、為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本申請?zhí)峁┮韵录夹g方案：

3、一方面，本申請?zhí)峁┝艘环N用于陰道微生物熒光檢測的試劑盒，所述試劑盒包括a液和b液；

4、所述a液包括如下濃度的組分：

5、熒光染色劑0.005~1%，抑菌劑0.01~30%，抗熒光衰退劑0.02~20%，復染劑0.002~10%，純化水余量；

6、所述b液包括如下濃度的組分：

7、熒光素0.001~0.8%，緩沖溶液0.05~20%，防腐劑0.05~20%，穩(wěn)定劑0.001~3%，純化水余量。

8、可選地，所述熒光染色劑的濃度獨立地選自0.005%、0.01%、0.05%、0.1%、0.5%、1%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

9、所述抑菌劑的濃度獨立地選自0.01%、0.02%、0.05%、0.1%、1%、5%、10%、20%、30%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

10、所述抗熒光衰退劑的濃度獨立地選自0.02%、0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%、10%、15%、20%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

11、所述復染劑的濃度獨立地選自0.002%、0.01%、0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%、10%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

12、所述熒光素的濃度獨立地選自0.001%、0.005%、0.01%、0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

13、所述緩沖溶液的濃度獨立地選自0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%、10%、15%、20%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

14、所述防腐劑的濃度獨立地選自0.05%、0.1%、0.5%、1%、5%、10%、15%、20%中的任意值或任意兩者之間的范圍值；

15、所述穩(wěn)定劑的濃度獨立地選自0.001%、0.005%、0.01%、0.05%、0.1%、0.5%、1%、2%、3%中的任意值或任意兩者之間的范圍值。

16、可選地，所述熒光染色劑包括熒光增白劑28、異硫氰酸熒光素、多甲藻黃素-葉綠素-蛋白質復合物中的至少一種。

17、可選地，所述抑菌劑包括二甲基亞砜、proclin?300、氫氧化鉀中的至少一種。

18、可選地，所述抗熒光衰退劑包括丙三醇、吐溫、沒食子酸鹽中的至少一種。

19、可選地，所述復染劑包括甲基綠、伊文思藍中的至少一種。

20、在本申請中，a液中的熒光染色劑與復染劑相互作用，能夠準確并清晰的對真菌進行標記。

21、可選地，所述熒光素包括吖啶橙、羅丹明中的至少一種。

22、可選地，所述緩沖溶液包括磷酸鹽緩沖液、乙酸?乙酸鈉緩沖溶液中的至少一種。

23、可選地，所述緩沖溶液的ph為4。

24、可選地，所述磷酸鹽緩沖液由如下濃度的組分組成：磷酸氫二鈉0.05~20%，檸檬酸0.05~15%。

25、可選地，所述防腐劑包括proclin?300、np-40中的至少一種。

26、可選地，所述防腐劑的濃度為0.05~10%。

27、可選地，所述穩(wěn)定劑包括edta、二硫蘇糖醇中的至少一種。

28、可選地，所述穩(wěn)定劑的濃度為0.001~1%。

29、在本申請中，b液中的組分相互配合，能夠準確并清晰的對細胞、細菌、滴蟲等進行標記。

30、第二方面，本申請?zhí)峁┝松鲜鲈噭┖械闹苽浞椒?，包括如下步驟：

31、將a液和b液組合，得到所述用于陰道微生物熒光檢測的試劑盒。

32、與現(xiàn)有技術相比，本申請包括以下有益效果：

33、本申請?zhí)峁┑脑噭┖邪╝液和b液，其中，a液中的熒光染色劑（如熒光增白劑28）與復染劑（與伊文思藍）等相互作用，能夠準確并清晰的對真菌進行標記；b液中的組分相互配合，可對細胞、細菌、滴蟲等進行標記，將a液和b液組合，可對陰道分泌物中的病原體進行標記，能夠更加全面且準確的對陰道炎癥的類型進行判斷，從而使整個試劑盒更加準確和靈敏。

技術特征：

1.一種用于陰道微生物熒光檢測的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括a液和b液；

2.根據(jù)權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光染色劑包括熒光增白劑28、異硫氰酸熒光素、多甲藻黃素-葉綠素-蛋白質復合物中的至少一種。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于，所述抑菌劑包括二甲基亞砜、proclin?300、氫氧化鉀中的至少一種。

4.根據(jù)權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述抗熒光衰退劑包括丙三醇、吐溫、沒食子酸鹽中的至少一種。

5.根據(jù)權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述復染劑包括甲基綠、伊文思藍中的至少一種。

6.根據(jù)權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光素包括吖啶橙、羅丹明中的至少一種。

7.根據(jù)權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述緩沖溶液包括磷酸鹽緩沖液、乙酸乙酸鈉緩沖溶液中的至少一種；

8.根據(jù)權利要求7所述的試劑盒，其特征在于，所述防腐劑包括proclin?300、np-40中的至少一種；

9.根據(jù)權利要求8所述的試劑盒，其特征在于，所述穩(wěn)定劑包括edta、二硫蘇糖醇中的至少一種；

10.權利要求1~9任意一項所述的試劑盒的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

技術總結
本申請公開了一種用于陰道微生物熒光檢測的試劑盒及其制備方法，屬于醫(yī)學臨床檢驗中病源微生物熒光檢測技術領域。本申請?zhí)峁┑脑噭┖?，包括A液和B液；所述A液包括熒光染色劑、抑菌劑、抗熒光衰退劑、復染劑、純化水；所述B液包括熒光素、緩沖溶液、防腐劑、穩(wěn)定劑、純化水。本申請將A液和B液組合成試劑盒，可對陰道分泌物中的病原體進行標記，能夠更加全面且準確的對炎癥的類型進行判斷，從而使整個試劑盒更加準確和靈敏。

技術研發(fā)人員：張志全,秦旭穎,孫艷妮,桂春爽,陳彥亨,朱紫龍
受保護的技術使用者：北京億美諾生物科技股份有限公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/12/19