本發(fā)明涉及微生物，尤其涉及小球藻多糖提取優(yōu)化的方法。

背景技術(shù)：

1、小球藻本身含有豐富的營養(yǎng)素：蛋白質(zhì)、脂類、碳水化合物、礦物質(zhì)、維生素、膳食纖維以及各種氨基酸等。研究表明，小球藻提取物具有增強機(jī)體免疫力、抗氧化、抗炎、抗腫瘤等生物活性，其中小球藻多糖的提取及應(yīng)用研究也引起了許多研究者的關(guān)注。在已發(fā)布的小球藻多糖活性研究結(jié)果表明，小球藻多糖具有良好的抗氧化、抗炎、抗癌活性，同時，在維護(hù)腸道健康也具有重要作用。目前市場上小球藻多糖的多應(yīng)用于食品添加劑、動物飼料、美容以及醫(yī)藥保健等領(lǐng)域。

2、傳統(tǒng)提取方法對微藻多糖的提取率相對一般，許多文獻(xiàn)的研究結(jié)果也顯示堿提取法、熱水提取法、超聲破碎提取法及反復(fù)凍融提取法等方法的提取效果平平，實驗考慮到以經(jīng)濟(jì)提取為本，因此，急需研究一種小球藻多糖提取優(yōu)化的方法。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供小球藻多糖提取優(yōu)化的方法，旨在經(jīng)濟(jì)提取微藻多糖。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了小球藻多糖提取優(yōu)化的方法，包括以下步驟：

3、通過堿提取法、熱水浴提取法、超聲破碎提取法和反復(fù)凍融提取法分別對小球藻多糖進(jìn)行提取，得到單組體系多糖；

4、選取堿提取法、熱水浴提取法、超聲破碎提取法和反復(fù)凍融提取法中任意兩項對小球藻多糖進(jìn)行提取，得到組合體系多糖；

5、利用蒽酮硫酸法測定所述單組體系多糖和所述組合體系多糖，并根據(jù)測定數(shù)據(jù)分析多糖含量最多的提取方法。

6、其中，所述堿提取法包括將小球藻藻粉懸浮在naoh的溶液中，震蕩混勻，離心，收集上清液，得到單組體系多糖；所述熱水浴提取法包括將小球藻藻粉懸浮在nacl溶液中，震蕩混勻，再水浴提取，離心，收集上清液，得到單組體系多糖；所述超聲破碎提取法包括將小球藻藻粉懸浮在nacl的溶液中，震蕩混勻，超聲提取，離心，收集上清液，得到單組體系多糖；所述反復(fù)凍融提取法包括將小球藻藻粉懸浮在nacl的溶液中，震蕩混勻，將混懸液放入冰箱中冰凍，取出將其融化，重復(fù)凍融3次，離心，收集上清液，得到單組體系多糖。

7、其中，所述堿提取法和所述反復(fù)凍融提取法組合包括將小球藻藻粉懸浮在naoh的溶液中，震蕩混勻，置于恒溫?fù)u床震蕩提取，將處理后的混合液放入冰箱中冰凍，取出將其融化，重復(fù)凍融3次，離心，收集上清液，得到組合體系多糖；所述堿提取法和所述熱水浴提取法組合包括將小球藻藻粉懸浮在naoh的溶液中，震蕩混勻，置于恒溫?fù)u床震蕩提取，而后再水浴提取，離心，收集上清液，得到組合體系多糖；所述堿提取法和所述超聲破碎提取法組合包括將小球藻粉末懸浮在naoh的溶液中，震蕩混勻，置于恒溫?fù)u床震蕩提取，超聲提取，離心，收集上清液，得到組合體系多糖；所述復(fù)凍融提取法和所述熱水浴提取法包括將小球藻粉末懸浮在nacl的溶液中，震蕩混勻，放入冰箱中冰凍，取出將其融化，重復(fù)凍融3次，解凍后再水浴提取，離心，收集上清液，得到組合體系多糖；所述反復(fù)凍融提取法和所述超聲破碎提取法組合包括將小球藻粉末懸浮在nacl的溶液中，震蕩混勻，放入冰箱中，取出將其融化，重復(fù)凍融3次，超聲提取，離心，收集上清液，得到組合體系多糖；所述熱水浴提取法和所述超聲破碎提取法組合包括將小球藻粉末懸浮在nacl的溶液中，震蕩混勻，再水浴提取，冷卻至室溫，超聲提取，離心，收集上清液，得到組合體系多糖。

8、其中，所述利用蒽酮硫酸法測定所述單組體系多糖和所述組合體系多糖的具體方式：

9、將所述單組體系多糖稀釋，加入蒽酮-硫酸試劑，震蕩混勻，冷卻至室溫后置于水浴，冰水冷卻至室溫，利用酶標(biāo)儀測定od620nm的吸光值，最后根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算小球藻多糖濃度；

10、將所述組合體系多糖稀釋，加入蒽酮-硫酸試劑，震蕩混勻，冷卻至室溫后置于水浴，冰水冷卻至室溫，利用酶標(biāo)儀測定od620nm的吸光值，最后根據(jù)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計算小球藻多糖濃度。

11、其中，所述蒽酮-硫酸試劑需現(xiàn)配現(xiàn)用。

12、本發(fā)明的小球藻多糖提取優(yōu)化的方法，通過堿提取法、熱水浴提取法、超聲破碎提取法和反復(fù)凍融提取法分別對小球藻多糖進(jìn)行提取，得到單組體系多糖，選取堿提取法、熱水浴提取法、超聲破碎提取法和反復(fù)凍融提取法中任意兩項對小球藻多糖進(jìn)行提取，得到組合體系多糖；利用蒽酮硫酸法測定所述單組體系多糖和所述組合體系多糖，并根據(jù)測定數(shù)據(jù)分析多糖含量最多的提取方法，該方法以單組體系作為實驗對照，兩兩組合體系為主要實驗對象，對小球藻多糖的提取率進(jìn)行了實驗研究，并用蒽酮硫酸法測定小球藻多糖的含量，結(jié)果顯示當(dāng)用組合方法提取小球藻多糖時，提取率有所提高，表明選擇組合體系提取多糖更優(yōu)于單組提取，實現(xiàn)了經(jīng)濟(jì)提取的優(yōu)點，具有很好的實踐價值。

技術(shù)特征：

1.小球藻多糖提取優(yōu)化的方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.如權(quán)利要求1所述的小球藻多糖提取優(yōu)化的方法，其特征在于，

3.如權(quán)利要求1所述的小球藻多糖提取優(yōu)化的方法，其特征在于，

4.如權(quán)利要求1所述的小球藻多糖提取優(yōu)化的方法，其特征在于，

5.如權(quán)利要求4所述的小球藻多糖提取優(yōu)化的方法，其特征在于，

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及小球藻多糖提取優(yōu)化的方法，包括通過堿提取法、熱水浴提取法、超聲破碎提取法和反復(fù)凍融提取法分別對小球藻多糖進(jìn)行提取，得到單組體系多糖；選取堿提取法、熱水浴提取法、超聲破碎提取法和反復(fù)凍融提取法中任意兩項對小球藻多糖提取，得到組合體系多糖；利用蒽酮硫酸法測定單組體系多糖和組合體系多糖，并分析多糖含量最多的提取方法，該方法以單組體系作為實驗對照，兩兩組合體系為主要實驗對象，對小球藻多糖的提取率進(jìn)行了實驗研究，用蒽酮硫酸法測定小球藻多糖的含量，結(jié)果顯示當(dāng)用組合方法提取小球藻多糖時，提取率有所提高，表明選擇組合體系提取多糖更優(yōu)于單組提取，實現(xiàn)了經(jīng)濟(jì)提取的優(yōu)點。

技術(shù)研發(fā)人員：郭辰,尚常花,黃艷玲,潘翠,周冰鳳,張濤,雷冬雪,江佳明,霍瑜
受保護(hù)的技術(shù)使用者：廣西壯族自治區(qū)環(huán)境保護(hù)科學(xué)研究院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10