本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及廣譜性中和新型冠狀病毒sars-cov-2納米抗體及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、疫苗和抗體藥物的研發(fā)，將為人們提供有效的保護(hù)和治療措施。新型冠狀病毒sars-cov-2是通過s蛋白的受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域(rbd)與它們共同的受體血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2(ace2)結(jié)合，介導(dǎo)病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞。中和抗體靶向冠狀病毒表面刺突蛋白(spike,s)上高度保守的rbd區(qū)域，抑制病毒包膜和宿主胞膜的膜融合，從而抑制病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞內(nèi)，達(dá)到中和病毒的目的。中和抗體是預(yù)防和治療新冠病毒感染的有效手段。中和抗體在已感染病人的應(yīng)急治療中具有明確、立竿見影的治療效果，這一點(diǎn)在埃博拉病毒疫情的藥物開發(fā)中已得到充分證實(shí)。

2、納米抗體是天然缺失輕鏈的重鏈抗體，發(fā)現(xiàn)于羊駝、單峰駱駝、鯊魚等動(dòng)物體內(nèi)，是能夠精準(zhǔn)識(shí)別抗原分子的最小結(jié)構(gòu)單位。同時(shí)，納米抗體具有多種優(yōu)勢(shì)，包括更好的耐熱性和穩(wěn)定性、與抗原更強(qiáng)的親和力、更強(qiáng)的組織穿透能力、更高的水溶性以及表達(dá)量高等特性?；谝陨咸攸c(diǎn)，納米抗體可用于疾病的早期診斷及靶向治療，提高疾病的診斷準(zhǔn)確性和治療效果。納米抗體市場(chǎng)的發(fā)展得益于抗體藥物市場(chǎng)的持續(xù)增長(zhǎng)、納米抗體技術(shù)和生物醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展，以及其作為一種新型治療手段在癌癥、心血管疾病和傳染病等高發(fā)疾病領(lǐng)域的巨大潛力。

3、在新冠病毒防控中，納米抗體展現(xiàn)出巨大的潛力。研究表明，納米抗體能夠特異性阻斷ace2/sars-cov-2s-rbd的結(jié)合，從而有效地中和病毒，阻止其感染宿主細(xì)胞。此外，納米抗體因其小尺寸和高穩(wěn)定性，可以更容易地穿透組織屏障，如肺部組織，實(shí)現(xiàn)局部治療。因此，它們被開發(fā)成霧化可吸入制劑，通過吸入途徑直接遞送至肺部，達(dá)到治療新冠病毒感染的目的。納米抗體可作為疫苗用于預(yù)防新冠病毒感染阻斷疫情的傳播，以及用于開發(fā)快速、準(zhǔn)確的新冠病毒檢測(cè)試劑盒，為疫情防控提供有力支持。盡管新冠納米抗體具有諸多優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用前景，但其研發(fā)和應(yīng)用仍面臨一些挑戰(zhàn)，如生產(chǎn)成本、穩(wěn)定性、免疫原性等問題。因此，未來(lái)還需要進(jìn)一步的探索和優(yōu)化，以充分發(fā)揮納米抗體在新冠病毒防控中的作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、發(fā)明目的：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供了一種廣譜性中和新型冠狀病毒sars-cov-2納米抗體。

2、本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題是提供了編碼所述的納米抗體的核酸或基因。

3、本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題是提供了所述廣譜性中和新型冠狀病毒sars-cov-2納米抗體的制備方法。

4、本發(fā)明最后要解決的技術(shù)問題是提供了所述的廣譜性中和新型冠狀病毒sars-cov-2納米抗體、所述的核酸或基因、所述的表達(dá)盒、重組載體、重組細(xì)胞或重組菌在制備治療新型冠狀病毒sars-cov-2或其變異株感染的藥物或疫苗中的應(yīng)用。

5、技術(shù)方案：為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種廣譜性中和新型冠狀病毒sars-cov-2納米抗體，所述納米抗體的氨基酸序列如seq?id?no:1所示。

6、本
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
還包括編碼所述的納米抗體的核酸或基因，其核苷酸序列如seq?idno:2所示。

7、本發(fā)明內(nèi)容還包括表達(dá)盒、重組載體、重組細(xì)胞或重組菌，其含有所述的核酸或基因。

8、其中，所述重組載體是將所述的核酸或基因?qū)氡磉_(dá)載體中獲得。

9、其中，所述表達(dá)載體包括但不僅限于真核表達(dá)載體。

10、其中，所述重組菌是將所述的重組載體導(dǎo)入宿主菌中獲得。

11、其中，所述宿主菌包括但不僅限于畢赤酵母。

12、本發(fā)明內(nèi)容還包括所述的廣譜性中和新型冠狀病毒sars-cov-2納米抗體的制備方法，包括以下步驟：

13、1)廣譜性中和新型冠狀病毒sars-cov-2納米抗體的核酸或基因的獲得，所述核酸或基因的序列如seq?id?no:2所示；

14、2)將所述的核酸或基因與表達(dá)載體相連并導(dǎo)入宿主菌中得到重組菌；

15、3)將所述的重組菌誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白并進(jìn)一步純化即為納米抗體。

16、本發(fā)明內(nèi)容還包括所述的廣譜性中和新型冠狀病毒sars-cov-2納米抗體、所述的核酸或基因、所述的表達(dá)盒、重組載體、重組細(xì)胞或重組菌在制備治療新型冠狀病毒sars-cov-2或其變異株感染的疾病的藥物或疫苗中的應(yīng)用。

17、其中，所述變異株包括delta突變株、omicron突變株、omicron亞型變異株xbb.1或新型冠狀病毒sars-cov-2其他變異株。

18、有益效果：與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的突出效果在于：本發(fā)明提供的一種廣譜性、特異性靶向新型冠狀病毒s蛋白受體結(jié)合區(qū)域(rbd)的納米抗體及其編碼基因的核酸序列和氨基酸序列，該氨基酸序列具有分子量小、高穩(wěn)定性及高親和力的特征，且能與s蛋白rbd多種突變體結(jié)合，中和新型冠狀病毒spike假病毒。本發(fā)明還涉及納米抗體及其相關(guān)產(chǎn)品在用于預(yù)防和/或治療和新型冠狀病毒及其變異株感染的相關(guān)疾病中均具備顯著結(jié)合能力和廣譜性效果。

技術(shù)特征：

1.一種廣譜性中和新型冠狀病毒sars-cov-2納米抗體，其特征在于，所述納米抗體的氨基酸序列如seq?id?no:1所示。

2.編碼權(quán)利要求1所述的納米抗體的核酸或基因，其特征在于，其核苷酸序列如seq?idno:2所示。

3.表達(dá)盒、重組載體、重組細(xì)胞或重組菌，其特征在于，其含有權(quán)利要求2所述的核酸或基因。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的重組載體，其特征在于，所述重組載體是將所述的核酸或基因?qū)氡磉_(dá)載體中獲得。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的重組載體，其特征在于，所述表達(dá)載體包括真核表達(dá)載體。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的重組菌，其特征在于，所述重組菌是將所述的重組載體導(dǎo)入宿主菌中獲得。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的重組菌，其特征在于，所述宿主菌包括畢赤酵母。

8.權(quán)利要求1所述的廣譜性中和新型冠狀病毒sars-cov-2納米抗體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

9.權(quán)利要求1所述的廣譜性中和新型冠狀病毒sars-cov-2納米抗體、權(quán)利要求2所述的核酸或基因、權(quán)利要求3所述的表達(dá)盒、重組載體、重組細(xì)胞或重組菌在制備治療新型冠狀病毒sars-cov-2或其變異株感染的疾病的藥物或疫苗中的應(yīng)用。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述變異株包括delta突變株、omicron突變株、omicron亞型變異株xbb.1或新型冠狀病毒sars-cov-2其他變異株。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種廣譜性中和新型冠狀病毒SARS?CoV?2納米抗體及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明還公開了編碼所述的納米抗體的核酸或基因、表達(dá)盒、重組載體、重組細(xì)胞或重組菌及其在制備治療新型冠狀病毒SARS?CoV?2或其變異株感染的疾病的藥物或疫苗中的應(yīng)用。本發(fā)明納米抗體的氨基酸序列具有分子量小、高穩(wěn)定性及高親和力的特征，且能與S蛋白R(shí)BD多種突變體結(jié)合，中和新型冠狀病毒Spike假病毒。本發(fā)明還涉及納米抗體及其相關(guān)產(chǎn)品在用于預(yù)防和/或治療和新型冠狀病毒及其變異株感染的相關(guān)疾病中均具備顯著結(jié)合能力和廣譜性效果。

技術(shù)研發(fā)人員：季晨博,龔雪
受保護(hù)的技術(shù)使用者：南京市婦幼保健院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/17