本發(fā)明涉及植物分子生物學(xué),具體是一種毛竹pesnd1基因及其應(yīng)用、植物載體。
背景技術(shù):
1、毛竹(phyllostachysedulis)是禾本科剛竹屬多年生常綠植物,是我國栽植面積最大、分布范圍最廣、應(yīng)用最廣泛的經(jīng)濟(jì)竹種。毛竹為大型散生竹種,在維護(hù)生態(tài)及木材安全方面起著重要的作用。細(xì)胞壁生物合成是決定木材材性的關(guān)鍵,細(xì)胞壁組分(纖維素、半纖維素和木質(zhì)素)在特定細(xì)胞次生壁中沉積,影響木材材性和木質(zhì)纖維生物的高效利用。目前,對(duì)竹子細(xì)胞壁生物合成與調(diào)控方面尚缺乏全面的認(rèn)知,挖掘調(diào)控毛竹細(xì)胞壁組分合成的關(guān)鍵基因,利用生物技術(shù)等手段獲得材性改良的新材料,將極大地提高其利用價(jià)值。
2、已有研究表明,植物次生細(xì)胞壁生物合成調(diào)控涉及多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子家族、小rna和結(jié)構(gòu)基因的復(fù)雜調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。植物具有調(diào)節(jié)次生細(xì)胞壁的特定轉(zhuǎn)錄開關(guān),多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子(如nac、myb)通過調(diào)控次生細(xì)胞壁成分(如纖維素、半纖維素和木質(zhì)素)的合成來參與次生細(xì)胞壁的形成。擬南芥nac家族中nst-和snd-亞組轉(zhuǎn)錄因子被發(fā)現(xiàn)作為轉(zhuǎn)錄開關(guān)因子,分別調(diào)控維管組織導(dǎo)管細(xì)胞和纖維細(xì)胞次生細(xì)胞壁合成。第一類vnd(vascular-relatednacdomain)基因家族vnd1-7被認(rèn)為參與導(dǎo)管細(xì)胞發(fā)育。第二類包括
3、nst3/snd1(nacsecondarywallthickeningpromotingfactor3/secondarywall-associatednacdomainprotein1),nst1和nst2,參與開啟維管束間纖維細(xì)胞和木質(zhì)部纖維細(xì)胞次生壁加厚。楊樹木材形成多層級(jí)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中第一層包括ptrsnd1-b1及其亞家族成員ptrsnd1-a1、ptrsnd1-a2、ptrsnd1-b2。水稻osswn1為snd1同源基因,參與調(diào)控水稻次生細(xì)胞壁合成,影響生物組織中木質(zhì)素的含量。
4、目前已公布的調(diào)節(jié)植物細(xì)胞壁合成的轉(zhuǎn)錄因子多為擬南芥、楊樹等模式植物中的snd1等基因,而毛竹中snd1基因的功能尚未報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于提供一種毛竹pesnd1基因及其應(yīng)用、植物載體,以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。
2、為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
3、一種毛竹pesnd1基因,包括seq?id?no.1核苷酸序列和由序列表中的seq?id?no.2氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)。
4、作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案:其中,pesnd1核苷酸序列如seq?id?no.1所示。
5、作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案:其中,毛竹次生細(xì)胞壁組分調(diào)控基因pesnd1在調(diào)節(jié)麻竹次生細(xì)胞壁組分包括木質(zhì)素纖維素含量中的應(yīng)用。
6、一種植物載體,包括多克隆位點(diǎn)區(qū)域依次連接的35s啟動(dòng)子、pesnd1基因、flag標(biāo)簽和終止子的pcambia1300-pesnd1植物表達(dá)載體。作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案:其中,
7、作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案:其中,所述載體包括過量表達(dá)載體的宿主菌。
8、作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案:其中,用于克隆所述的毛竹次生細(xì)胞壁組分調(diào)控基因pesnd1的引物對(duì),所述的引物對(duì)包括上游引物和下游引物,所述的上游引物的核苷酸序列如seq?id?no.3所示,所述的下游引物的核苷酸序列如seq?id?no.4所示。
9、與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果是:
10、本發(fā)明提供了調(diào)控次生細(xì)胞壁組分的毛竹pesnd1基因及其編碼蛋白與應(yīng)用。通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將pesnd1基因過表達(dá)載體轉(zhuǎn)入野生型麻竹中,結(jié)果顯示,過表達(dá)株系與野生型株系相比,莖粗、細(xì)胞壁厚度、木質(zhì)素和纖維素含量發(fā)生了明顯的改變。該結(jié)果為研究竹子次生細(xì)胞壁組分調(diào)控提供理論基礎(chǔ)。
1.一種毛竹pesnd1基因,其特征在于,包括seq?id?no.1核苷酸序列和由序列表中的seq?id?no.2氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的毛竹pesnd1基因,其特征在于,pesnd1核苷酸序列如seq?idno.1所示。
3.一種毛竹pesnd1基因的應(yīng)用,其特征在于,毛竹次生細(xì)胞壁組分調(diào)控基因pesnd1在調(diào)節(jié)麻竹次生細(xì)胞壁組分包括木質(zhì)素纖維素含量中的應(yīng)用。
4.一種植物載體,其特征在于,包括多克隆位點(diǎn)區(qū)域依次連接的35s啟動(dòng)子、pesnd1基因、flag標(biāo)簽和終止子的pcambia1300-pesnd1植物表達(dá)載體。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的載體,其特征在于,所述載體包括過量表達(dá)載體的宿主菌。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的載體,其特征在于,用于克隆所述的毛竹次生細(xì)胞壁組分調(diào)控基因pesnd1的引物對(duì),所述的引物對(duì)包括上游引物和下游引物,所述的上游引物的核苷酸序列如seq?id?no.3所示,所述的下游引物的核苷酸序列如seq?id?no.4所示。