本發(fā)明涉及生物，具體涉及一種naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、喜樹(shù)堿是美國(guó)科學(xué)家monroe?e.wall在1966年從從喜樹(shù)中首次分離得到的生物堿，目前喜樹(shù)堿及其衍生物的抗腫瘤活性在生物堿中尤為顯著，具有極高的開(kāi)發(fā)前景。且喜樹(shù)堿作為拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑，它能夠靶向到腫瘤細(xì)胞的拓?fù)洚悩?gòu)酶上。拓?fù)洚悩?gòu)酶作為抗癌藥物重要的靶標(biāo)之一，它參與了dna代謝的多個(gè)方面(例如dna的切割和重新連接)從而保證細(xì)胞分裂的各個(gè)過(guò)程，有趣的是，在腫瘤細(xì)胞中dna拓?fù)洚悩?gòu)酶ⅰ是過(guò)度表達(dá)的，所以topoⅰ也被大家認(rèn)為是最有希望的抗腫瘤藥物的靶標(biāo)之一。但是，喜樹(shù)堿具有水溶性差，穩(wěn)定性差，幾乎不具有靶向性等缺點(diǎn)，因此，需要對(duì)喜樹(shù)堿進(jìn)行改造以使得其具有更好的療效。

2、多肽藥物偶聯(lián)物(peptide–drug?conjugates，pdcs)作為一種新興的給藥系統(tǒng)，通過(guò)連接體與藥物進(jìn)行偶聯(lián)，從而改變藥物的水溶性、脂溶性、穩(wěn)定性、靶向性等特點(diǎn)，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)改善藥物的治療效果。且多肽是由氨基酸組成，可以對(duì)pdc藥物進(jìn)行不同多肽的選擇和多肽的修飾，并且多肽是生物可降解的，所以可以避免免疫原性反應(yīng)的發(fā)生。例如，發(fā)明專利cn115737833a公開(kāi)了一種喜樹(shù)堿多肽抗腫瘤藥物偶聯(lián)物，以半胱氨酸為中間連接體，利用酰胺化反應(yīng)將半胱氨酸接枝在9-氨基喜樹(shù)堿、靶向抗腫瘤多肽上，再氧化形成二硫鍵將9-氨基喜樹(shù)堿和靶向抗腫瘤多肽進(jìn)行偶聯(lián)；能夠靶向特異性作用于腫瘤部位及腫瘤細(xì)胞，使藥物分子高度積累在腫瘤部位，具有較高的腫瘤靶向性和滯留性，實(shí)現(xiàn)靶向精準(zhǔn)化療，降低對(duì)機(jī)體的毒副作用，同時(shí)，偶聯(lián)物的形式有效提高9-氨基喜樹(shù)堿的穩(wěn)定性，延長(zhǎng)藥物的血液循環(huán)半衰期，持久發(fā)揮抗腫瘤療效。發(fā)明人的前期研究中，得到了一種rgd多肽-喜樹(shù)堿多肽藥物偶聯(lián)物(cn111068068a)，所述的rgd多肽與喜樹(shù)堿通過(guò)丁二酸干作為連接臂相連；所合成的rgd-喜樹(shù)堿多肽藥物偶聯(lián)物，可以將喜樹(shù)堿遞送至腫瘤細(xì)胞、組織，腫瘤微環(huán)境等腫瘤部位，以達(dá)到改善喜樹(shù)堿溶解性的問(wèn)題，并使藥物喜樹(shù)堿具有靶向的作用，減低對(duì)正常細(xì)胞及組織的毒副作用，從而達(dá)到特異性抗腫瘤的目的。且該研究中克服了喜樹(shù)堿20-oh處難以修飾，反應(yīng)效率低下的問(wèn)題。

3、在前期研究的基礎(chǔ)上，發(fā)明人進(jìn)行了持續(xù)的研究，繼續(xù)在喜樹(shù)堿20-oh處進(jìn)行多肽修改，并意外的得到了一種naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物，所述的偶聯(lián)物治療宮頸癌、結(jié)腸癌和肝癌的效果顯著，同時(shí)多肽naa作為一種可被腫瘤微環(huán)境高表達(dá)的酶——legumain識(shí)別并可切割的linker，可在naa多肽-喜樹(shù)堿的基礎(chǔ)上與多肽、抗體、蛋白、peg、脂肪酸等進(jìn)行偶聯(lián)，從而實(shí)現(xiàn)靶向或延長(zhǎng)半衰期的作用，具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的首要目的是提供一種靶向naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物，所述的naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物的結(jié)構(gòu)式如式(ⅰ)所示：

2、

3、本發(fā)明的第二目的是提供所述的naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物的制備方法，所述的制備方法包括如下步驟：

4、(1)進(jìn)行喜樹(shù)堿20-oh的修飾，在20-oh處用丁二酸干進(jìn)行修飾；

5、(2)采用固相多肽合成的方法進(jìn)行制備多肽；然后在樹(shù)脂上將已修飾過(guò)的喜樹(shù)堿進(jìn)行偶聯(lián)；(3)將已經(jīng)偶聯(lián)喜樹(shù)堿的多肽從樹(shù)脂上裂解下來(lái)，得到靶向多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物粗品。

6、本發(fā)明的第三目的是提供所述的naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物在制備治療癌癥藥物中的應(yīng)用。

7、本發(fā)明的第四目的是提供所述的naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物在制備抑制宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)試劑或藥物中的應(yīng)用。

8、優(yōu)選的，所述的宮頸癌細(xì)胞為hela細(xì)胞。

9、本發(fā)明的第五目的是提供所述的naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物在制備抑制結(jié)腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)試劑或藥物中的應(yīng)用。

10、優(yōu)選的，所述的結(jié)腸癌細(xì)胞為hct-15細(xì)胞。

11、本發(fā)明的第六目的是提供所述的靶向naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物在制備抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)試劑或藥物中的應(yīng)用。

12、本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明提供了一種naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物，所述的靶向naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物能夠顯著的抑制宮頸癌、結(jié)腸癌和肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，可以用于制備治療宮頸癌、結(jié)腸癌和肝癌藥物，同時(shí)多肽naa作為一種可被腫瘤微環(huán)境高表達(dá)的酶——legumain識(shí)別并可切割的linker，可在naa多肽-喜樹(shù)堿的基礎(chǔ)上與多肽、抗體、蛋白、peg、脂肪酸等進(jìn)行偶聯(lián)，從而實(shí)現(xiàn)靶向或延長(zhǎng)半衰期的作用，有望降低毒副作用，提升藥效，具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.一種naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物，其特征在于，所述的naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物的結(jié)構(gòu)式如式(ⅰ)所示：

2.如權(quán)利要求1所述的naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物的制備方法，其特征在于，所述的制備方法包括如下步驟：

3.如權(quán)利要求1所述的naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物在制備治療癌癥藥物中的應(yīng)用。

4.如權(quán)利要求1所述的naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物在制備抑制宮頸癌細(xì)胞生長(zhǎng)試劑或藥物中的應(yīng)用。

5.如權(quán)利要求1所述的naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物在制備抑制結(jié)腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)試劑或藥物中的應(yīng)用。

6.如權(quán)利要求1所述的靶向naa多肽-喜樹(shù)堿偶聯(lián)物在制備抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)試劑或藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種NAA多肽?喜樹(shù)堿偶聯(lián)物及其制備方法和應(yīng)用，所述的NAA多肽?喜樹(shù)堿偶聯(lián)物的結(jié)構(gòu)式如式(Ⅰ)所示，所述的NAA多肽?喜樹(shù)堿偶聯(lián)物本身能夠顯著的抑制宮頸癌、結(jié)腸癌和肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)，可以用于制備治療宮頸癌、結(jié)腸癌和肝癌藥物，同時(shí)多肽NAA作為一種可被腫瘤微環(huán)境高表達(dá)的酶——Legumain識(shí)別并可切割的Linker，可在NAA多肽?喜樹(shù)堿的基礎(chǔ)上與多肽、抗體、蛋白、PEG、脂肪酸等進(jìn)行偶聯(lián)，從而實(shí)現(xiàn)靶向或延長(zhǎng)半衰期的作用，具有廣闊的應(yīng)用前景；

技術(shù)研發(fā)人員：王一青,吳疆,郝朝威
受保護(hù)的技術(shù)使用者：蘭州大學(xué)第一醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/10