專利名稱:光合細(xì)菌制劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供一種光合細(xì)菌制劑的制備方法。
技術(shù)背景公開號為CN1104250A的中國發(fā)明專利申請公開說明書披露了一種高活性的渾球紅假單胞菌(Rhodopseudomonas Sphaeroides)P4株和沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas Palustris)1號株混合制劑的制備方法，該方法為在菌種培養(yǎng)液中接種30％以上的兩株菌株的混合菌群，接種后的培養(yǎng)液在溫度為26～32℃、光照強(qiáng)度為3000～5000LX、PH為6～8的厭氧條件下培養(yǎng)48～72小時，然后將培養(yǎng)出的菌液在敞開體系中、自然光照下，根據(jù)菌液中的碳源殘存量適時添加一次以上的碳源，在溫度為20～35℃、好氧充氣條件下培養(yǎng)72～120小時后，收集菌液分裝，制成液體微生物混合制劑?？梢?，對于經(jīng)過厭氧培養(yǎng)的菌液來說，在后續(xù)的制備過程中需根據(jù)該菌液中的碳源殘存量適時添加一次以上的碳源，并在好氧充氣條件下進(jìn)行培養(yǎng)，這樣，一則需添置碳源檢測設(shè)備和充氧設(shè)備，以至設(shè)備投資大，生產(chǎn)成本增加，二則需憑操作工的實踐經(jīng)驗適時進(jìn)行多次檢測及添加碳源，以至操作繁瑣、使用起來很不方便，產(chǎn)品質(zhì)量難以保證。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種生產(chǎn)成本低、使用方便的光合細(xì)菌制劑的制備方法。
本發(fā)明所提供的光合細(xì)菌制劑的制備方法依次包括以下工藝步驟光合細(xì)菌與菌種培養(yǎng)液按容積比為(0.8～1)∶(1～1.2)的比例混合得混合液，混合液在溫度為20～38℃、光照強(qiáng)度為2000～6000LX、PH為6～7的厭氧條件下培養(yǎng)100～140小時，然后將厭氧條件下培養(yǎng)出的菌液在溫度為20～38℃的條件下按以下方式培養(yǎng)24～72小時，所述方式為每日凌晨4時至當(dāng)日下午5時在自然光照的厭氧條件下培養(yǎng)、每日下午5時至次日凌晨4時在敞開體系中培養(yǎng)，當(dāng)菌液的活菌濃度達(dá)到5×109個/ml以上時，制成光合細(xì)菌制劑。
所述光合細(xì)菌至少為紅假單胞菌屬(Rhodopseudomonas)、著色菌屬(Chroiatium)中任意一屬或兩屬的菌株。
所述菌種培養(yǎng)液的組成為乙酸鈉250～350g，氯化銨13～17g，磷酸氫二鉀21～29g，硫酸鎂9～11g，氯化鈉4.5～5.5g，鉬酸銨45～55g，酵母浸膏7.4～8.6g，氯化鈣2.7～3.3g，三氯化鐵1.2g，水30000～50000g。
以上所說的光合細(xì)菌均可外購。
以上所說的敞開體系是指敞口的培養(yǎng)容器。
以上所說的菌種培養(yǎng)液，其組成成分之一的水采用凈清河水、井水、自來水中任意一種均可，但凈清河水、井水中諸如懸浮物含量、BOD值、大腸桿菌數(shù)等各項指標(biāo)，均需符合出廠自來水的標(biāo)準(zhǔn)。
采用以上的方法后，對于厭氧條件下培養(yǎng)出的菌液來說，在其后續(xù)的制備工藝步驟中無需添加碳源，也無需在好氧充氣條件下進(jìn)行培養(yǎng)，這樣，一則不需添置碳源檢測設(shè)備和充氧設(shè)備，以至設(shè)備投資小，生產(chǎn)成本低，二則降低了操作工的操作難度，以至操作簡單、使用起來相當(dāng)方便。
具體實施方式
下面通過實施例更好地說明本發(fā)明，但它們不是對本發(fā)明的限定。
實施例一從惠州市惠山水生生物制品有限公司分別購得紅假單胞菌(Rhodopseudomonas sp.)的DL·1-3菌株及著色菌(Chroiatium sp.)的HQ菌株，將這兩個菌株按容積比1∶1的比例混合得混合菌群。需要說明是惠州市惠山水生生物制品有限公司從中國科學(xué)院水生生物研究所處引進(jìn)了公開號為CN1162016A的中國發(fā)明專利申請技術(shù)，并進(jìn)行了工業(yè)化轉(zhuǎn)化生產(chǎn)及銷售。在公開號為CN1162016A的中國發(fā)明專利申請公開說明書中披露了紅假單胞菌(Rhodopseudomonas sp.)的DL·1-3菌株及著色菌(Chroiatiumsp.)的HQ菌株的菌種保存編號分別為CCTCCM 96018和CCTCCM96017?；葜菔谢萆剿镏破酚邢薰镜刂窞閺V東省惠州市環(huán)城西一路二十號A座四樓；配制菌種培養(yǎng)液，其組成為乙酸鈉350g，氯化銨17g，磷酸氫二鉀29g，硫酸鎂11g，氯化鈉5.5g，鉬酸銨55g，酵母浸膏8.6g，氯化鈣3.3g，三氯化鐵1.2g，凈清河水50000g；用購得并經(jīng)混合的混合菌群與菌種培養(yǎng)液按容積比為0.8∶1.2的比例混合得混合液并置于潔凈的帶蓋塑料桶中，混合液在溫度為38℃、光照強(qiáng)度為6000LX、PH為7的厭氧條件(即蓋上所述塑料桶的桶蓋，以下實施例同此)下培養(yǎng)100小時；將厭氧條件下培養(yǎng)出的菌液在溫度為30～38℃的條件下按以下方式培養(yǎng)24小時，所述方式為當(dāng)日凌晨4時至當(dāng)日下午5時在自然光照的厭氧條件下培養(yǎng)、當(dāng)日下午5時至次日凌晨4時在敞開體系(即掀去所述塑料桶的桶蓋，以下實施例同此)中培養(yǎng)，當(dāng)菌液的活菌濃度達(dá)到5×109個/ml以上時，制成光合細(xì)菌制劑。
實施例二從惠州市惠山水生生物制品有限公司購得紅假單胞菌(Rhodopseudomonas sp.)的DL·1-3菌株；配制菌種培養(yǎng)液，其組成為乙酸鈉300g，氯化銨15g，磷酸氫二鉀25g，硫酸鎂10g，氯化鈉5g，鉬酸銨50g，酵母浸膏8g，氯化鈣3g，三氯化鐵1.2g，井水40000g；用購得的菌株與菌種培養(yǎng)液按容積比為0.9∶1.1的比例混合得混合液并置于潔凈的帶蓋塑料桶中，混合液在溫度為29℃、光照強(qiáng)度為4000LX、PH為6.5的厭氧條件下培養(yǎng)120小時；將厭氧條件下培養(yǎng)出的菌液在溫度為25～30℃的條件下按以下方式培養(yǎng)48小時，所述方式為每日凌晨4時至當(dāng)日下午5時在自然光照的厭氧條件下培養(yǎng)、每日下午5時至次日凌晨4時在敞開體系中培養(yǎng)，當(dāng)菌液的活菌濃度達(dá)到5×109個/ml以上時，制成光合細(xì)菌制劑。
實施例三從惠州市惠山水生生物制品有限公司購得著色菌(Chroiatium sp.)的HQ菌株；配制菌種培養(yǎng)液，其組成為乙酸鈉250g，氯化銨13g，磷酸氫二鉀21g，硫酸鎂9g，氯化鈉4.5g，鉬酸銨45g，酵母浸膏7.4g，氯化鈣2.7g，三氯化鐵1.2g，自來水30000g；用購得的菌株與菌種培養(yǎng)液按容積比為1∶1的比例混合得混合液并置于潔凈的帶蓋塑料桶中，混合液在溫度為20℃、光照強(qiáng)度為2000LX、PH為6的厭氧條件下培養(yǎng)140小時；將厭氧條件下培養(yǎng)出的菌液在溫度為20～25℃的條件下按以下方式培養(yǎng)72小時，所述方式為每日凌晨4時至當(dāng)日下午5時在自然光照的厭氧條件下培養(yǎng)、每日下午5時至次日凌晨4時在敞開體系中培養(yǎng)，當(dāng)菌液的活菌濃度達(dá)到5×109個/ml以上時，制成光合細(xì)菌制劑。
權(quán)利要求
1.光合細(xì)菌制劑的制備方法，它依次包括以下工藝步驟(1)光合細(xì)菌與菌種培養(yǎng)液按容積比為(0.8～1)∶(1～1.2)的比例混合得混合液；(2)混合液在溫度為20～38℃、光照強(qiáng)度為2000～6000LX、PH為6～7的厭氧條件下培養(yǎng)100～140小時；(3)將(2)中培養(yǎng)出的菌液在溫度為20～38℃的條件下按以下方式培養(yǎng)24～72小時，所述方式為每日凌晨4時至當(dāng)日下午5時在自然光照的厭氧條件下培養(yǎng)、每日下午5時至次日凌晨4時在敞開體系中培養(yǎng)，當(dāng)菌液的活菌濃度達(dá)到5×109個/ml以上時，制成光合細(xì)菌制劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的光合細(xì)菌制劑的制備方法，其特征在于所述光合細(xì)菌至少為紅假單胞菌屬(Rhodopseudomonas)、著色菌屬(Chroiatium)中任意一屬或兩屬的菌株。
3.根據(jù)權(quán)利要求
1所述的光合細(xì)菌制劑的制備方法，其特征在于所述菌種培養(yǎng)液的組成為乙酸鈉250～350g，氯化銨13～17g，磷酸氫二鉀21～29g，硫酸鎂9～11g，氯化鈉4.5～5.5g，鉬酸銨45～55g，酵母浸膏7.4～8.6g，氯化鈣2.7～3.3g，三氯化鐵1.2g，水30000～50000g。
專利摘要
本發(fā)明提供一種光合細(xì)菌制劑的制備方法,該方法為:光合細(xì)菌與菌種培養(yǎng)液按容積比為(0.8～1)∶(1～1.2)的比例混合得混合液,混合液在溫度為20～38℃、光照強(qiáng)度為2000～6000LX、PH為6～7的厭氧條件下培養(yǎng)100～140小時,然后將厭氧條件下培養(yǎng)出的菌液在溫度為20～38℃的條件下按以下方式培養(yǎng)24～72小時,所述方式為:每日凌晨4時至當(dāng)日下午5時在自然光照的厭氧條件下培養(yǎng)、每日下午5時至次日凌晨4時在敞開體系中培養(yǎng),當(dāng)菌液的活菌濃度達(dá)到5×10
文檔編號C12N1/20GKCN1384188SQ02110316
公開日2002年12月11日 申請日期2002年4月30日
發(fā)明者許繼光 申請人:許繼光導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan