專利名稱:一種用鯉魚魚皮制備膠原蛋白肽的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種膠原蛋白肽的制備方法，特別是一種利用淡水魚魚皮酶解制備膠 原蛋白的方法。
技術背景
我國淡水魚產量居世界首位，淡水魚加工工業(yè)隨著淡水魚產量的增長而快速發(fā)展。 目前，淡水魚加工過程僅局限于對魚體肌肉的利用，而對魚皮、魚鱗等通常認為的下 腳料加工利用甚少，絕大多數(shù)被拋棄。據(jù)統(tǒng)計，我國每年淡水魚加工業(yè)的廢棄物總量
達到200萬噸以上，其中魚皮約占8%，即16萬噸。這樣既造成環(huán)境污染，又浪費了 資源。為了充分合理的利用資源，出現(xiàn)了利用淡水魚皮制備膠原蛋白的技術。早期多 采用清水高溫蒸煮法、酸水解法和堿水解法等，但上述方法都會破壞膠原蛋白、氨基 酸等活性成分，成品利用價值低。近年來，酶水解法逐漸取代了各種傳統(tǒng)蛋白水解法。 中國專利申請(公開號CN)公開了利用河豚魚皮制備膠原蛋白及其肽的方法，其工藝 操作步驟包括魚皮原料的處理、非膠原蛋白的去除和酶解。酶水解后得到的魚皮膠原 蛋白及其肽成品純度高、復溶性好、理化性質穩(wěn)定，是化妝品、食品工業(yè)等的高檔原 料。酶水解法尤其適于活性膠原蛋白的制備。而且膠原蛋白來源于魚類，免除了因瘋 牛病等疾病對陸生動物來源的膠原蛋白安全性的擔憂。
但是，無論是酸(堿)水解法還是酶解法，都存在耗時長、脂肪殘存的問題。
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種酶解反應更加迅速且成品無脂肪殘留的利用淡水魚皮制
備膠原蛋白肽的新方法。
為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術方案是 一種用鯉魚魚皮制備膠原蛋白肽的方法，其特征在于包括如下步驟 U)原料處理將去除魚肉、魚鰭、魚鱗，清洗干凈的鯉魚魚皮剪成小碎片，-20°C
冷凍備用；
(2) 非膠原蛋白的去除將解凍的碎魚皮放入30倍魚皮體積的3.5%氯化鈉溶液 中，于5'C連續(xù)攪拌24h，用尼龍紗過濾，棄去濾液；濾渣用IO倍魚皮體積的蒸餾水 清洗，重復三次，即得到去除了非膠原蛋白的鯉魚魚皮；
(3) 脂肪的去除所述步驟(2)得到的去除了非膠原蛋白的鯉魚魚皮加入0.5 倍魚皮體積的蒸餾水，然后于4'C用1-3倍魚皮體積的石油醚萃取，靜置分層后，棄 去上層石油醚，重復三次，下層用蒸餾水清洗，揮去殘留的石油醚，得到去除了非膠原蛋白、脂肪的魚皮；
(4) 膠原蛋白的提取所述步驟(3)得到的去除了非膠原蛋白、脂肪的魚皮加 入20倍魚皮體積的0. 1M檸檬酸溶液進行溶脹，均質3分鐘，即得到魚皮膠原蛋白的
粗提取液，將所述粗提取液連續(xù)攪拌2h，真空抽濾，濾液用20。/。Na2C03調節(jié)PH至中性， 得到預處理好的膠原蛋白粗提取液；
(5) 膠原蛋白肽的制備將所述步驟(4)得到的預處理好的膠原蛋白粗提取液 升溫至10(TC，保持10分鐘，再降低溫度至48t:，調節(jié)所述粗提取液PH至9，加入 0.03% (酶/底物，重量百分比)的木瓜蛋白酶和0.06% (酶/底物，重量百分比)的風 味蛋白酶，酶解30分鐘，85t:滅酶5分鐘，得到相對分子量8000-15000的鯉魚魚皮 膠原蛋白肽，經過減壓濃縮，噴霧千燥，得到白色粉狀、沒有腥味的鯉魚魚皮膠原蛋 白肽。
本發(fā)明的有益效果是
1、 由于本發(fā)明酶解工藝采用木瓜酶和風味蛋白酶同時水解魚皮膠原蛋白，酶解時 間只需30分鐘，就可以將鯉魚皮膠原蛋白水解為膠原蛋白肽。而采用胃蛋白酶、木瓜 蛋白酶酶解膠原蛋白，通常需要10小時以上，甚至更長，有可能造成活性膠原蛋白肽 的失活。本發(fā)明極大地縮短了魚皮膠原蛋白水解反應的時間，盡可能地保證了蛋白肽 的活性，提高了利用淡水魚皮制備膠原蛋白肽的生產效率。
2、 利用動物源性的原料制備膠原蛋白及其肽都存在脂肪和脂溶性雜質殘留的問 題，影響了制備的膠原蛋白肽的水溶性和穩(wěn)定性。本發(fā)明利用石油醚萃取法去除脂肪， 大大降低了鯉魚皮膠原蛋白肽成品中的脂肪和脂溶性色素的殘留，提高了成品的質量。
3、 本發(fā)明的產率可達15%，膠原蛋白肽的提出率高達79%，產品純度達80-85%。
4、 利用本發(fā)明方法制得的鯉魚皮膠原蛋白肽色澤潔白、沒有腥味，水溶性好。
具體實施方式
實施例
用鯉魚魚皮制備膠原蛋白肽的方法，包括下列步驟
(一) 原料處理
新鮮鯉魚經去頭、去內臟后，對剖成二片式，然后將魚片放入魚肉采取機進行采 肉，實現(xiàn)魚肉和魚皮的分離。將分離得到的魚皮剪去魚鰭、刮去魚鱗，并將與魚皮粘 連的魚肉也一同刮擦除去。然后將干凈的魚皮剪成小碎塊，-2(TC冷凍備用。
(二) 非膠原蛋白的去除
將解凍的碎魚皮放入30倍魚皮體積的3. 5%氯化鈉溶液中，于5'C連續(xù)攪拌24h， 用尼龍紗過濾，棄去濾液；濾渣用IO倍魚皮體積的蒸餾水清洗，重復三次，得到的濾渣即是去除了非膠原蛋白的魚皮。通過這步處理，可以同時去除鯉魚皮中大部分水溶 性和鹽溶性雜蛋白，以及部分水溶性色素。
(三) 脂肪的去除
在去除了非膠原蛋白的鯉魚魚皮加入0.5倍魚皮體積的蒸餾水，然后于4"C用l-3
倍魚皮體積的石油醚萃取，靜置分層后，棄去上層石油醚，重復三次，下層用蒸餾水 清洗，揮去殘留的石油醚，得到去除了非膠原蛋白、脂肪的魚皮，同時可以除去絕大 部分脂溶性色素。
(四) 膠原蛋白的提取
將去除了非膠原蛋白、脂肪的魚皮加入20倍魚皮體積的0. 1M檸檬酸溶液進行溶 脹，均質3分鐘，即得到魚皮膠原蛋白的粗提取液，將所述粗提取液連續(xù)攪拌2h，真 空抽濾，去除粗提液中的殘留色素。然后濾液用20。/。Na2C03調節(jié)ra至中性，得到預處 理好的膠原蛋白粗提取液。
(五) 膠原蛋白肽的制備 將預處理好的膠原蛋白粗提取液升溫至IO(TC，保持10分鐘，再降低溫度至48°C，
調節(jié)所述粗提取液PH至9，加入O. 03%(酶/底物，重量百分比)的木瓜蛋白酶和0. 06% (酶/底物，重量百分比)的風味蛋白酶，酶解30分鐘，85'C滅酶5分鐘，得到相對 分子量8000-15000的鯉魚魚皮膠原蛋白肽，經過減壓濃縮，噴霧干燥，得到白色粉狀、 沒有腥味的鯉魚魚皮膠原蛋白肽。
(六) 對成品進行檢驗、計量和包裝
通過上述工藝步驟，1Kg新鮮鯉魚魚皮，可以得到純度為80-85%的鯉魚魚皮膠原 蛋白肽140-150g。
權利要求
1、一種用鯉魚魚皮制備膠原蛋白肽的方法，其特征在于包括如下步驟(1)原料處理將去除魚肉、魚鰭、魚鱗，清洗干凈的鯉魚魚皮剪成小碎片，-20℃冷凍備用；(2)非膠原蛋白的去除將解凍的碎魚皮放入30倍魚皮體積的3.5％氯化鈉溶液中，于5℃連續(xù)攪拌24h，用尼龍紗過濾，棄去濾液；濾渣用10倍魚皮的體積蒸餾水清洗，重復三次，即得到去除了非膠原蛋白的鯉魚魚皮；(3)脂肪的去除所述步驟(2)得到的去除了非膠原蛋白的鯉魚魚皮加入0.5倍魚皮體積的蒸餾水，然后于4℃用1-3倍魚皮體積的石油醚萃取，靜置分層后，棄去上層石油醚，重復三次，下層用蒸餾水清洗，揮去殘留的石油醚，得到去除了非膠原蛋白、脂肪的魚皮；(4)膠原蛋白的提取所述步驟(3)得到的去除了非膠原蛋白、脂肪的魚皮加入20倍魚皮體積的0.1M檸檬酸溶液進行溶脹，均質3分鐘，即得到魚皮膠原蛋白的粗提取液，將所述粗提取液連續(xù)攪拌2h，真空抽濾，濾液用20％Na2CO3調節(jié)PH至中性，得到預處理好的膠原蛋白粗提取液；(5)膠原蛋白肽的制備將所述步驟(4)得到的預處理好的膠原蛋白粗提取液升溫至100℃，保持10分鐘，再降低溫度至48℃，調節(jié)所述粗提取液PH至9，加入0.03％(酶/底物，重量百分比)的木瓜蛋白酶和0.06％(酶/底物，重量百分比)的風味蛋白酶，酶解30分鐘，85℃滅酶5分鐘，得到相對分子量8000-15000的鯉魚魚皮膠原蛋白肽，經過減壓濃縮，噴霧干燥，得到白色粉狀、沒有腥味的鯉魚魚皮膠原蛋白肽。
專利摘要
本發(fā)明公開了一種利用鯉魚魚皮酶解制備膠原蛋白的方法，包括原料處理，氯化鈉去除非膠原蛋白，石油醚萃取去除脂肪，檸檬酸提取膠原蛋白和木瓜酶、風味酶共同酶解，減壓濃縮，噴霧干燥即得到相對分子量8000-15000、色澤潔白、沒有腥味的鯉魚魚皮膠原蛋白肽。本發(fā)明酶解工藝采用木瓜酶和風味蛋白酶同時水解魚皮膠原蛋白，酶解時間大為縮短，只需30分鐘。利用石油醚萃取法去除脂肪，大大降低了鯉魚皮膠原蛋白肽成品中的脂肪和脂溶性色素的殘留，提高了成品的質量。本發(fā)明的產率和膠原蛋白肽的提出率高，產品純度好。
文檔編號C12P21/06GKCN101481723SQ200910114887
公開日2009年7月15日 申請日期2009年1月23日
發(fā)明者江 朱, 熊新安 申請人:熊新安;朱 江導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan