專(zhuān)利名稱(chēng):制備基于碳水化合物雙(甲基)丙烯酰胺的聚合物載體材料的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制備基于(甲基)丙烯酰胺取代的碳水化合物的新型聚合物載體材料的方法，以及它們?cè)谟H和色譜法或固相合成中的用途。
背景技術(shù)：
自從由R.B.Merryfield(R.B.Merryfield，J.Chem.Soc.85，2149(1963))引入了固相合成方法以來(lái)，肽、低聚核苷酸和低聚糖的自動(dòng)固相合成已呈連續(xù)增長(zhǎng)的態(tài)勢(shì)。該發(fā)展的下一步是引入合成自動(dòng)機(jī)械用于肽的同時(shí)多步合成。另外，聚合物載體已經(jīng)在親和色譜領(lǐng)域(P.Cuatrecasea等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA61，636(1968))及酶或細(xì)胞的固定中獲得相當(dāng)?shù)闹匾浴?br> 近年來(lái)，通過(guò)引入組合化學(xué)的概念，聚合物載體材料的應(yīng)用領(lǐng)域已經(jīng)擴(kuò)展到其它領(lǐng)域。今天，固相上的物質(zhì)庫(kù)組合合成是用于制藥工業(yè)中開(kāi)發(fā)和優(yōu)化新型活性劑的關(guān)鍵技術(shù)。該合成原理也已擴(kuò)展到多類(lèi)有機(jī)物質(zhì)的生產(chǎn)(CombinatorialChemistry，G.Jung(編輯)，Wiley VCH，Weinheim(1999))。實(shí)際上，有機(jī)化學(xué)的所有標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)都可以在固相上用合適的載體材料、結(jié)合基及保護(hù)基進(jìn)行。因此，組合合成也已經(jīng)越來(lái)越多地用于其它研究領(lǐng)域中，如材料研究和催化劑開(kāi)發(fā)。
固相合成的優(yōu)點(diǎn)主要在于反應(yīng)的實(shí)現(xiàn)和簡(jiǎn)單的產(chǎn)物處理，從而滿足了自動(dòng)合成的基本要求。
固相化學(xué)的巨大范圍也導(dǎo)致對(duì)新型多功能載體材料需求的強(qiáng)勁增長(zhǎng)。
因?yàn)榫酆衔镙d體的結(jié)構(gòu)、形態(tài)、粒度、耐水解性和耐熱性決定了它們與有機(jī)或水性反應(yīng)介質(zhì)的相容性及反應(yīng)基團(tuán)的可接近性，因而這些在所有的固相合成中是非常重要的。因此，選擇正確的載體材料對(duì)于固相合成的成功是決定性的。此外，在親和色譜法或生物活性組分的固定領(lǐng)域，與水性反應(yīng)介質(zhì)的生物相容性及潤(rùn)濕性是重要的。
在多數(shù)情況下，使用的是基于苯乙烯/二乙烯基苯的載體，然而，由于它們?cè)谒橘|(zhì)中使用時(shí)有較差的溶脹性質(zhì)，因此是相當(dāng)不利的(W.Tegge.R.Frank，J.Peptide Res.49，355(1997))。因此，已開(kāi)發(fā)了極性載體，如聚乙二醇(PEG)改性的聚苯乙烯/二乙烯基苯(E.Bayer，Angew.Chem.103，117(1991)，G.Barany等、US5,235,028、WO92/04384(1992))、聚(乙二醇-雙-甲基丙烯酸酯)(G.Barany US5656707、M.P.Meldal US5,352,756)以及基于纖維素(D.R.Englebretsen，Int.J.Peptide Protein Res.40，487(1992))和瓊脂糖(G.P.Vlasov等，Zh.Obsh.Khim.(Engl.Trans.)56，1450(1987)、C.R.Nakaie，WO01/46216A2，28.6.2001)的珠粒形載體。另外，基于蔗糖甲基丙烯酸酯(H.Gruber，Monatsh.Chem.112，273-85(1981))和葡萄糖單甲基丙烯酸酯(T.Rohr等，Acta Polym.50，286-292(1999))的極性載體已有描述。
這些載體材料具有不同的缺點(diǎn)。例如，聚乙二醇(PEG)鏈的長(zhǎng)度在聚苯乙烯改性中是難以控制的，因此形成了另外的交聯(lián)部位，并且隨PEG分子量的增加，在這些PEG-PS樹(shù)脂上的反應(yīng)非常緩慢。
采用基于天然碳水化合物如瓊脂糖或纖維素的載體時(shí)，形態(tài)(孔徑、內(nèi)表面、粒度)是預(yù)先決定的，僅可在極有限的范圍內(nèi)進(jìn)行控制，而且其機(jī)械穩(wěn)定性通常不足以進(jìn)行連續(xù)的柱操作。蔗糖甲基丙烯酸酯載體通過(guò)沉淀聚合而獲得，其僅有輕微交聯(lián)，并且特別地導(dǎo)致多種類(lèi)型的凝膠。由于低取代的單體混合物是水溶性的，所以可以進(jìn)行反相懸浮聚合，但是用這種方法控制反應(yīng)的可能性是非常有限的，因?yàn)槎鄶?shù)用于控制形態(tài)的與水相容的成孔劑(pore-forming agent)對(duì)單體混合物的溶解性有很強(qiáng)的影響，由此使得不能夠控制交聯(lián)度。
這些載體的另一個(gè)嚴(yán)重缺點(diǎn)是其通過(guò)酯鍵合的結(jié)構(gòu)。這使得其本身易水解且可導(dǎo)致在用于酸性或堿性介質(zhì)中時(shí)的載體破壞，由此嚴(yán)重地限制了它們的應(yīng)用性，尤其是在固相合成領(lǐng)域中。

發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供聚合物載體，其形態(tài)(粒度、孔隙率)、交聯(lián)度以及在水介質(zhì)和有機(jī)介質(zhì)中的溶脹性可在其制備過(guò)程中具體調(diào)節(jié)，其反應(yīng)基團(tuán)提供了結(jié)合基及保護(hù)基固定的多種可能性，而且其是熱穩(wěn)定及水解穩(wěn)定的。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該目的可以用(甲基)丙烯酰胺取代的碳水化合物衍生物實(shí)現(xiàn)。
本發(fā)明的目的是制備基于單糖的聚丙烯酰胺或聚甲基丙烯酰胺的聚合物載體的方法，其特征在于碳水化合物的丙烯酰基或甲基丙烯酰胺衍生物任選地在成孔添加劑的存在下進(jìn)行聚合，然后使保護(hù)基與由此獲得的交聯(lián)載體部分或完全斷裂 其中R表示氫或CH3基團(tuán)，并且至少一個(gè)X表示基團(tuán)-CO-CH3、-CH2-C6H5、-Si(CH3)3，或者至少兩個(gè)基團(tuán)X一起表示以下的基 或
其中R1和R2獨(dú)立地表示氫、具有1-10個(gè)碳原子的烷基，或者芳基，R3表示具有4-10個(gè)碳原子的環(huán)烷基，或者苯基，而剩余的X表示氫，其中Y表示基-NH-、-CH2-NH-或-CO-NR4-Z-NR5-，其中Z表示n＝2-20時(shí)的-(CH2)n-基、x＝1-10時(shí)的-(CH2-CH2-O)x-CH2-CH2-基、具有4-10個(gè)碳原子的環(huán)亞烷基、或具有6-30個(gè)碳原子的芳基，并且其中R4和R5獨(dú)立地表示氫、具有1-10個(gè)碳原子的烷基，或者芳基。
用于制備式I的雙(甲基)丙烯酰胺的原料例如為基于碳水化合物的已知二胺，例如1，6-二氨基-1，6-二脫氧-2，43，5-二-氧-亞甲基葡萄糖醇、甘露糖醇或半乳糖醇(US3,463,790(1969)，Haworth等，J.Chem.Soc.155(1944))。
本發(fā)明優(yōu)選的是具有保護(hù)基的可在溫和條件下分離的碳水化合物二胺，例如1，6-二氨基-1，6-二脫氧-2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖醇或1，6-二氨基-1，6-二脫氧-2，34，5-二-氧-苯亞甲基半乳糖醇。這些二胺可根據(jù)US3,463,790(1969)由相應(yīng)的1，6-二氯-衍生物制備，雖然總的收率較低。借助新型合成方法，這些二胺也可由新型的半乳糖二甲酯以64％的總收率而獲得。
根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選為通過(guò)使糖二酸(glycaric acid)二烷基酯與過(guò)量的二胺反應(yīng)來(lái)制備新型的碳水化合物二胺。例如半乳糖二酸二甲酯可以首先用2，2-二甲氧基丙烷保護(hù)，因此，將由此獲得的2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸二甲酯轉(zhuǎn)化為2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸雙(2-氨乙基)酰胺。通過(guò)改變合成中所用的二胺，可容易地獲得多種新型碳水化合物二胺且收率高。優(yōu)選為具有2-20個(gè)碳原子的脂族二胺，例如1，2-乙二胺、1，6-己二胺、1，12-二氨基十二烷、1，2-雙(氨基乙氧基)乙烷或哌嗪。通過(guò)合適地選擇二胺，可控制所得碳水化合物二胺的性質(zhì)，并因而也可控制聚合物載體的性質(zhì)。如果例如在碳水化合物二胺的合成中使用1，12-十二烷二胺，由于空間低位阻，甲基丙烯?；途酆蠈⑸善銱O基團(tuán)在進(jìn)一步反應(yīng)中更易于接近的載體。另一方面，芳基增加聚合物載體的熱穩(wěn)定性。
其它已知的基于碳水化合物的酯也可代替半乳糖二酸使用，例如葡糖二酸酯。根據(jù)本發(fā)明，糖二酸烷基酯也可用碳水化合物化學(xué)中熟知的其它保護(hù)基如乙酸酯、三甲基甲硅烷基、苯亞甲基或環(huán)亞己基。然而，與二胺的反應(yīng)也可用未保護(hù)的糖二酸烷基酯進(jìn)行。
然后，使被保護(hù)的碳水化合物二胺與(甲基)丙烯酸衍生物反應(yīng)以形成甲基丙烯酰胺。為此，可使用(甲基)丙烯酸、其酯、氯(甲基)丙烯酸或甲基丙烯酸酐。為制備雙(甲基)丙烯酰胺，所用的碳水化合物二胺與(甲基)丙烯酸衍生物的摩爾比為至少1∶2，較低的摩爾比生成單-和雙(甲基)丙烯酰胺的混合物，該混合物也可用于本發(fā)明的聚合。
由這些單體或單體的混合物可通過(guò)在水介質(zhì)中的懸浮聚合制備交聯(lián)的聚合物載體。此外，通過(guò)加入合適的成孔劑(致孔劑)，可具體控制形態(tài)。通過(guò)改變交聯(lián)度和/或成孔劑、凝膠類(lèi)型，可用該方法制備微孔-或大孔載體。
將單體混合物溶解在水不混溶的溶劑中，可將例如甲苯或正辛醇的成孔劑加入(其中成孔劑同時(shí)也可作為單體混合物的溶劑)，且在加入自由基引發(fā)劑和懸浮穩(wěn)定劑之后，在攪拌下使單體混合物在水懸浮體中聚合。聚合溫度由所用引發(fā)劑的半衰期決定。將所得的聚合物顆粒通過(guò)過(guò)濾分離，用合適溶劑洗滌幾次并干燥，其中聚合物顆粒的尺寸可借助攪拌速率來(lái)控制。由此獲得的聚合物為疏水性的，因?yàn)槠淙匀缓斜Ｗo(hù)基且在水中是不可溶脹的。為了清除保護(hù)基，可以用合適試劑處理聚合物顆粒，例如在由異亞丙基保護(hù)的單體的情況下使用三氟乙酸或乙酸，在乙?；膯误w的情況下則借助于弱堿處理，以選擇性地使乙?；鶖嗔?例如用甲醇中0.2N的甲醇鈉溶液)。這樣就生成了具有羥基的聚合物載體，所述羥基保證了與水介質(zhì)的相容性，而且在固相合成中可作為結(jié)合基團(tuán)。
本發(fā)明單體的聚合也可在其它單體的存在下進(jìn)行，其它單體例如(甲基)丙烯酸、(甲基)丙烯酸酯、苯乙烯、乙酸乙烯酯、N-乙烯吡咯烷酮和其它已知單體。
優(yōu)選的是N-甲基-N-((2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-((2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基)甲基丙烯酰胺、丙烯酸2-羥乙酯、甲基丙烯酸2-羥乙酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯、乙二醇二丙烯酸酯、二甘醇單丙烯酸酯、丙烯酸縮水甘油酯、甲基丙烯酸縮水甘油酯、N，N-二甲基氨乙基甲基丙烯酸酯、丙烯酰胺、甲基丙烯酰胺、N-羥甲基丙烯酰胺、衣康酸、三丙烯酸季戊四醇酯和四丙烯酸季戊四醇酯。
因此，本發(fā)明的目的也包括聚合物載體，其除其它單體單元外，其還具有以下式II的結(jié)構(gòu)單元 其中R、X和Y具有式I所示的含義。
為在固相合成中使用，也可根據(jù)已知方法將本發(fā)明的載體經(jīng)HO基團(tuán)活化。例如在肽的固相合成中，高負(fù)載可通過(guò)將氨基酸直接縮合到載體的HO基團(tuán)上而實(shí)現(xiàn)。如果在固相合成中使用強(qiáng)酸如三氟乙酸，則在某些情況下這可造成肽與聚合物載體的不希望的分離。在此情況下，在將第一個(gè)氨基酸偶聯(lián)以前，將氨基引入載體中以保護(hù)剩余的HO基團(tuán)是有用的。例如通過(guò)用1，1-羰基二咪唑、溴化氰或表氯醇進(jìn)行活化，和隨后與1，6-二氨基己烷進(jìn)行偶聯(lián)，可實(shí)現(xiàn)至多550μmol/g或750μmol/g的負(fù)載。用同樣方法，經(jīng)Mitsunobu反應(yīng)活化和隨后與對(duì)羥苯基甘氨酸和ε-氨基-己酸進(jìn)行偶聯(lián)，導(dǎo)致氨基的含量至多為550μmol/g。
借助于本發(fā)明的聚合物載體，肽的合成也可以例如根據(jù)fmoc雙偶聯(lián)路線，在二甲基甲酰胺中使用N-α-9-fmoc-保護(hù)的氨基酸中進(jìn)行，其中可使用苯并三唑-1-基-氧-三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸鹽(BOP)和N-羥基-苯并三唑(HOBt)作為縮合劑，并且用二異丙基乙基胺(DIPEA)作為堿。
具體實(shí)施方式實(shí)施例實(shí)施例1a)半乳糖二酸二甲酯的制備向3800ml甲醇中的65g半乳糖二酸(0.31mol)的懸浮體中，在劇烈攪拌下滴加入50ml濃硫酸。將反應(yīng)混合物加熱至沸騰30min，并在回流下繼續(xù)攪拌14小時(shí)。所得的清澈黃色溶液減少至約2000ml，然后冷卻至5℃，從而使二乙酯以無(wú)色固體結(jié)晶。在抽去甲醇后，用二乙醚洗滌并在50℃下干燥5小時(shí)。得到71.60g純的半乳糖二酸二甲酯(93％的理論收率)。
MW238.20；Fp.197-199℃；Rf0.82(MeOH/CHCl391)；δH(200MHz；DMSO-d6)5.02-4.69(bs，4H，OH)，4.29(s，2H，CH-CH-CO)，3.77(s，2H，CH-CH-CO)，3.63(s，6H，CH3)；δC(200MHz；DMSO-d6)174.38(2C，CO)，71.48(2C，CH-CH-CO)，70.55(2C，CH-CH-CO)，51.77(2C，CH3)b)2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸二甲酯的制備將70g(0.29mol)半乳糖二酸二甲酯與2.76g(14mmol)無(wú)水對(duì)甲苯磺酸一起加入450ml新蒸餾的2，2-二甲氧基丙烷中，并在中等攪拌下回流12個(gè)小時(shí)，在此期間，起初的無(wú)色反應(yīng)混合物變得越來(lái)越暗紅。然后將2g無(wú)水碳酸鈉加入反應(yīng)溶液中，通過(guò)蒸餾將所形成得甲醇除去，并通過(guò)蒸餾回收2，2-二甲氧基丙烷。將殘余物加入250ml二乙醚中，每次用150ml的飽和NaCl溶液洗滌，共洗滌兩次，再用水洗滌一次。用100ml二乙醚洗滌水溶液，總的有機(jī)萃取液用Na2SO4干燥并蒸去醚。在500ml正己烷中重結(jié)晶且在50℃下干燥后，得到了78.46g純的2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸二甲酯(85％的理論收率)。
MW318.33；Mp.90.2-90.7℃；Rf0.82(正己烷/乙酸乙酯)；δH(200MHz；CDCl3)4.60-4.53(m，2H，CH-CH-CO)，4.49-4.40(m，2H，CH-CH-O)，3.76(s，6H，COO-CH3)；1.45(s，6H，CH3)；1.39(s，6H，CH3)；δC(200MHz；CDCl3)171.37(2C，CO)，112.25(2C，Cq)，78.94(2C，CH-CH-CO)，75.72(2C，CH-CH-CO)，52.52(2C，COO-CH3)，26.91，25.87(4C，CH3)。
c)2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸雙(2-氨乙基)酰胺的制備將92.7g(0.29mol)2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸二甲酯溶于甲醇中，并且在攪拌下在5分鐘內(nèi)滴加入195ml(2.9mol，d＝0.895)的新蒸餾的乙二胺。將反應(yīng)混合物加熱至沸騰2個(gè)小時(shí)，然后冷卻至室溫，并繼續(xù)攪拌4個(gè)小時(shí)。通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器將所得產(chǎn)物混合物與未反應(yīng)的乙二胺和甲醇分離。在劇烈攪拌下將該粘稠的黃色油狀殘余物轉(zhuǎn)移到1500ml冷的二乙醚中，并攪拌2小時(shí)。將不溶的粉末狀2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸雙(2-氨乙基)酰胺過(guò)濾掉并用3份100ml的醚洗滌。在50℃下干燥4小時(shí)后，以92％的收率得到純產(chǎn)物(100.3g)。
MW374.44；Rf0.42(CHCl3/MeOH/NEt31∶3∶0.2)；δH(200MHz；CDCl3)7.10-6.91(bs，2H，CONH)，4.72(d，2H，J＝7.05，CH-CH-CO)，4.46(d，2H，J＝6.85CH-CH-CO)，3.35-3.22(dt，4H，J＝6.07，5.87 CONH-CH2)，2.84-2.74(t，4H，J＝5.87CH2-NH2)，1.46(s，6H，CH3)，1.39(s，6H，CH3)，1.25-1.15(bs，4H，NH2)；δC(200MHz；CDCl3)171.06(2C，CO)，110.75(2C，Cq)，78.65(2C，CH-CH-CO)，74.97(2C，CH-CH-CO)，41.65(2C，CONH-CH2).41.35(2C，(2C，CH2-NH2)，26.69，25.94(2C，CH3).
d)2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸N，N′-雙-[2-(2-甲基丙烯酰氨基)乙基]酰胺的制備在攪拌下將100g二胺3(0.27mol)、242mg(1.1mmol)的2，6-二-叔丁基-4-甲基苯酚在800ml無(wú)水吡啶的溶液加熱至65℃，然后緩慢滴加甲基丙烯酸酐(92g，0.59mol)。在65℃下將反應(yīng)混合物繼續(xù)攪拌4個(gè)小時(shí)，然后快速加入300ml水并繼續(xù)攪拌10個(gè)小時(shí)。反應(yīng)混合物用乙酸乙酯萃取三次，對(duì)總的有機(jī)相用飽和NaHCO3溶液洗滌兩次，并用水洗滌二次，用Na2CO4干燥，過(guò)濾并濃縮。在500ml正己烷中沉淀后，過(guò)濾，用正己烷洗滌并在真空中干燥4小時(shí)，得到113.1g(82％)純的二甲基丙烯酰胺。
MW510.59；δH(200MHz；CDCl3)7.27-7.07(bs，2H，C(CH3)＝CH2-CONH)，6.81-6.61(bs，2H，CH-CONH)，5.69，5.29(2s，4H，C(CH3)＝CH2)，4.66(d，2H，J＝7.04Hz，CH-CH-CO)，4.37(d，2H，J＝7.05Hz，CH-CH-CO).3.53-3.34(m，8H，CH2)，1.90(s，6H，C(CH3)＝CH2)，1.44，1.38(2s，12H，CH3)；δC(200MHz；CDCI3)172.15(2C，CO-C(CH3)＝CH2)，168.98(2C，CO-CH)，139.41(2C，C(CH3)＝CH2)，120.08(2C，C(CH3)＝CH2)，111.00(2C，Cq)，78.45(2C，CH-CH-CO)，74.82(2C，CH-CH-CO)，40.09(2C，CH-CONH-CH2)，39.01(2C，CH2-NHCO-C(CH3)＝CH2)，26.63，25.92(4C，CH3)，18.50(2C，C(CH3)＝CH2)，e)1d 的懸浮聚合進(jìn)料 水相 144g水14.4g氯化鈉0.23g羥乙基纖維素(Tylose)有機(jī)相 9.00g單體(見(jiàn)1d)致孔劑(類(lèi)型和量見(jiàn)表1)0.1g偶氮二異丁腈(AIBN)為了從反應(yīng)溶液置換氧氣，兩相均首先用氮?dú)獯祾?0分鐘，然后結(jié)合在一起。隨后的聚合在80℃下在氮?dú)夥諊羞M(jìn)行6小時(shí)，攪拌速率為350rpm。通過(guò)過(guò)濾分離所得聚合物顆粒，用1L水和300ml甲醇洗滌，然后用150ml甲醇在索格利特(Soxhlet)提取器中萃取12小時(shí)，最后在高真空中干燥至恒重。
聚合物顆粒的收率和性質(zhì)見(jiàn)表1。
f)異亞丙基保護(hù)基的水解將5g來(lái)自1e)的聚合物顆粒懸浮于65ml 60％的乙酸中，在60℃下機(jī)械攪拌4小時(shí)，然后用300ml水和300ml甲醇洗滌，用150ml甲醇在索格利特提取器中萃取12小時(shí)，最后在高真空中干燥至恒重。
收率5g
表1單體1d的懸浮聚合
A所得顆粒的大于30％為附聚的B所得顆粒的大于80％為附聚的-沒(méi)有進(jìn)行BET分析c無(wú)法分析的實(shí)施例2a)2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸雙(6-氨己基)酰胺室溫下在攪拌下將溶于100ml甲醇中的9.55g(0.03mol)2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸二甲酯(見(jiàn)1b)快速加入34.86g(0.3mol)1，6-二氨基己烷在150ml甲醇的溶液中，并且在回流下攪拌6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度并蒸發(fā)至干。在62℃(10-3毫巴)下蒸掉剩余的1，6-二氨基己烷。得到了清澈、淺黃色的純2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸雙(6-氨己基)酰胺的粘稠剩余物，理論收率為98％(14.3g)。
MW；486.66；Mp.107-108℃；Rf0.35(CHCl3/MeOH/NEt31∶3∶0.2)；δH(200MHz；CDCl3)6.71-6.55(bs，2H，CONH)，4.68(d，2H，J＝7.04，CH-CH-CO)，4.43(d，2H，J＝6.84CH-CH-CO)，3.27-3.14(m，4H，CONH-CH2)，2.61(t，4H，J＝6.85CH2-NH2)，1.44(s，6H，CH3)，1.36(s，6H，CH3)，1.51-1.18(m，16H，CH2/4H，NH2)；δC(200MHz；CDCl3)170.60(2C，CO)，110.61(2C，Cq)，78.60(2C，CH-CH-CO)，74.84(2C，CH-CH-CO)，41.98(2C，CH2-NH2).38.74(2C，(2C，CONH-CH2)，33.50(2C，CH2-CH2-NH2)，29.42(2C，CONH-CH2-CH2)，26.65，25.88(4C，CH2)，26.60，26.67(4C，CH3).
b)2，34，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸雙-[(6-(2-甲基丙烯酰氨基)己基]酰胺的制備在攪拌下將10g二胺3(0.021mol)、22mg(0.1mmol)的2，6-二-叔丁基-4-甲基苯酚在100ml無(wú)水吡啶的溶液加熱至65℃，并且緩慢滴加甲基丙烯酸酐(8.3g，0.053mol)。在65℃下將反應(yīng)混合物繼續(xù)攪拌4個(gè)小時(shí)，然后快速加入40ml水繼續(xù)攪拌反應(yīng)混合物14個(gè)小時(shí)。反應(yīng)溶液用二乙醚萃取三次，總的有機(jī)相用用水洗滌二次，用Na2CO4干燥，過(guò)濾并濃縮。在200ml正己烷中沉淀后，過(guò)濾，用正己烷洗滌并在室溫下干燥，得到11.3g(86％)純的二甲基丙烯酰胺11。
MW；622.79；δH(200MHz；CDCl3)7.29-7.08(bs，2H，C(CH3)＝CH2-CONH)，6.88-6.67(bs，2H，CH-CONH，5.72，5.32(2s，4H，C(CH3)＝CH2)，4.62(d，2H，J＝7.09Hz，CH-CH-CO)，4.37(d，2H，J＝7.09Hz，CH-CH-CO)，3.35-3.05(m，8H，NH-CH2)，1.89(s，6H，C(CH3)＝CH2)，1.64-1.51(m，8H，NH-CH2-CH2)，1.43，1.38(2s，12H，CH3)，1.34-1.28(m，8H，CH2)；δC(200MHz；CDCl3)172.12(2C，CO-C(CH3)＝CH2)，168.95(2C，CO-CH)，140.31(2C，C(CH3)＝CH2)，121.58(2C，C(CH3)＝CH2)，110.83(2C，Cq)，78.52(2C，CH-CH-CO)，74.80(2C，CH-CH-CO)，40.65(2C，CH-CONH-CH2)，38.98(2C，CH2-NHCO-C(CH3)＝CH2)，30.23，26.46(4C，CH2)，18.50(2C，C(CH3)＝CH2)，c)2b)的懸浮聚合重復(fù)實(shí)施例1e)的步驟，除了使用單體2b外。取決于所用的致孔劑，得到收率為60-85％的聚合物，且BET表面積為0.5-70.6m2/g。
d)異亞丙基保護(hù)基的水解將來(lái)自2c)的8g聚合物顆粒懸浮于65ml 60％的乙酸中，在60℃下機(jī)械攪拌4小時(shí)，然后用300ml水和300ml甲醇洗滌，用150ml甲醇在索格利特提取器中萃取12小時(shí)，最后在高真空中干燥至恒重。
收率8g
權(quán)利要求
1.一種制備基于單糖的聚丙烯酰胺或聚甲基丙烯酰胺的聚合物載體的方法，其特征在于任選地在成孔添加劑的存在下，使以下通式I的碳水化合物的丙烯酰胺衍生物或(甲基)丙烯酰胺衍生物進(jìn)行聚合，然后使保護(hù)基與由此獲得的交聯(lián)載體上部分或完全斷裂 其中R表示氫或CH3基團(tuán)，并且至少一個(gè)X表示基團(tuán)-CO-CH3、-CH2-C6H5、-Si(CH3)3，或者至少兩個(gè)基團(tuán)X一起表示以下的基 或
其中R1和R2獨(dú)立地表示氫、具有1-10個(gè)碳原子的烷基，或者芳基，R3表示具有4-10個(gè)碳原子的環(huán)烷基，或者苯基，而其它的X表示氫，其中Y表示基-NH-、-CH2-NH-或-CO-NR4-Z-NR5-，其中Z表示n＝2-20時(shí)的-(CH2)n-基、x＝1-10時(shí)的-(CH2-CH2-O)x-CH2-CH2-基、具有4-10個(gè)碳原子的環(huán)亞烷基、或具有6-30個(gè)碳原子的芳基，并且其中R4和R5獨(dú)立地表示氫、具有1-10個(gè)碳原子的烷基，或者芳基。
2.權(quán)利要求
1的方法，其特征在于將2，3:4，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸N，N’-雙-[2-(2-甲基丙烯酰氨基)乙基]酰胺用作甲基丙烯酰胺衍生物。
3.權(quán)利要求
1的方法，其特征在于將2，3:4，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸N，N’-雙-[(6-(2-甲基丙烯酰氨基)己基]酰胺用作甲基丙烯酰胺衍生物。
4.權(quán)利要求
1的方法，其特征在于將2，3:4，5-二-氧-異亞丙基半乳糖二酸N，N’-雙-[(12-(2-甲基丙烯酰氨基)十二烷基]酰胺用作甲基丙烯酰胺衍生物。
5.權(quán)利要求
1-4之一的方法，其特征在于使用了碳水化合物的單取代-和二取代的(甲基)丙烯酰胺衍生物的混合物。
6.權(quán)利要求
1-5之一的方法，其特征在于另外使用了共聚單體。
7.權(quán)利要求
6的方法，其特征在于將丙烯酰胺、甲基丙烯酰胺、N-羥甲基丙烯酰胺、N-甲基-N-((2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基)丙烯酰胺或N-甲基-N-((2，2-二甲基-1，3-二氧戊環(huán)-4-基)甲基)甲基丙烯酰胺用作共聚單體。
8.權(quán)利要求
6的方法，其特征在于將丙烯酸2-羥乙酯、甲基丙烯酸2-羥乙酯、乙二醇二丙烯酸酯、乙二醇二甲基丙烯酸酯、二甘醇單丙烯酸酯、二甘醇單甲基丙烯酸酯、丙烯酸縮水甘油酯、甲基丙烯酸縮水甘油酯或N，N-二甲基氨乙基甲基丙烯酸酯用作共聚單體。
9.聚合物載體，其含有以下式II的結(jié)構(gòu)單元 其中，R、X和Y具有權(quán)利要求
1中所表示的含義。
10.權(quán)利要求
9的聚合物載體在固相合成中的用途。
11.權(quán)利要求
9的聚合物載體在肽合成中的用途。
專(zhuān)利摘要
本發(fā)明涉及制備用于固相合成、特別是用于肽合成的聚合物載體材料的方法。借助于在水相中的懸浮聚合，在任選加入的成孔添加劑下，使得還可以含有其它保護(hù)基的(甲基)丙烯酰胺衍生物進(jìn)行聚合，隨后完全或部分清除所述保護(hù)基。因此就可以得到的聚合物材料而言，其在水介質(zhì)和有機(jī)介質(zhì)中的形態(tài)(粒度、孔隙度)、交聯(lián)度和溶脹可以根據(jù)目標(biāo)進(jìn)行調(diào)節(jié)，而其反應(yīng)基團(tuán)提供了結(jié)合基和保護(hù)基的多種機(jī)會(huì)的固定。所述聚合物載體的羥基可以根據(jù)固相合成的常規(guī)方法進(jìn)行活化。
文檔編號(hào)C08F20/58GK1997694SQ200580021898
公開(kāi)日2007年7月11日 申請(qǐng)日期2005年6月24日
發(fā)明者托馬斯·維爾迪恩茲, 海因里?！じ耵斬悹? 西蒙娜·克瑙斯, 亞歷山大·波施阿爾科 申請(qǐng)人:維也納科技大學(xué)導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan