專利名稱：利福霉素水提取新工藝的制作方法
專利說明 一項適用于從利福霉素發(fā)酵液中提取利福霉素SNa鹽的提取工藝。
利福霉素為萘環(huán)綢橋類廣譜抗菌素。
化學(xué)名利福霉素SV或利福霉素S 結(jié)構(gòu)式
利福霉素SV及S是用發(fā)酵培養(yǎng)的抗生素藥物。在提取工藝上可用溶媒法(現(xiàn)用工藝)，大孔樹脂法和水提取獲得。
大量地藥理和臨床表明利福霉素S不直接作為藥物應(yīng)用，再經(jīng)半合成后得到的利福平，利福定是抗結(jié)核的良好藥物。
在利福霉素發(fā)酵液中，由于發(fā)酵單位低，且在發(fā)酵配方中和發(fā)酵后的代謝產(chǎn)物中存有多種的大量蛋白質(zhì)和氨基酸。其在水中的等當(dāng)點和利福霉素S的等當(dāng)點非常接近，給提取分離帶來很大困難。
采用合理的工藝和先進的設(shè)備，並在各道工序中有效地除去各類蛋白質(zhì)和氨基酸是提取利福霉素的關(guān)鍵。目前國內(nèi)的生產(chǎn)技術(shù)中采用發(fā)酵液濾液中以PH2的酸度下直接用醋酸丁酯萃取利福霉素S的溶媒法工藝。由于在萃取液中二性蛋白及氨基酸發(fā)生嚴(yán)重乳化，雖經(jīng)超速離心機分離，但超速離心機經(jīng)常堵孔，分離效果不佳，逃酯嚴(yán)重，分離一步收率較低，萃取液分離不清，又直接影響到質(zhì)量。3～4萬r/ml濃度的萃取液再經(jīng)真空薄膜濃縮至12～14萬r/ml，回收醋酸丁酯，不僅醋酸丁酯消耗很大，而且在真空濃縮時容易結(jié)焦，直接影響產(chǎn)品的純度，得到利福霉素SNa鹽的效價在700～750r/mg。有的研究單位也采用過大孔樹脂水相吸附利福霉素S，醋酸丁酯洗脫，薄膜濃縮等工藝，雖說利福霉素SNa鹽生物效價可達830r/mg以上，但總收率明顯低于現(xiàn)有工藝，成本較高，未能工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明的任務(wù)是為了克服現(xiàn)有工藝的不足而提供從發(fā)酵液放罐開始，綜合性的吸收了各類工藝的優(yōu)點，研制成功經(jīng)濟實用的提取利福霉素的水提取新工藝。
以下是本發(fā)明的中型試驗實例。
1.提取取發(fā)酵液2m3，加入絮凝劑8公斤，攪拌后采用新型單流式板框壓濾機過濾菌絲，得到棕黃色澄清的濾液，用1m3自來水頂洗，頂終單位可在300r/ml以下，合并洗液，加入工業(yè)亞硝酸鈉3.7公斤，于25℃攪拌1小時，再用1∶1稀鹽酸調(diào)PH至1.5～1.8，靜止2小時，用單流式板框壓濾機過濾粗品，並用空氣吹干，濕品含水量可達60%以下。將濕品移至萃取罐，在25～30℃根據(jù)發(fā)酵放罐的總億，加入測算所須的醋酸丁酯洗液，進行萃取，適量地加些助濾劑，攪拌2小時，采用SS-600離心機，621型滌綸濾袋，密閉離心分離萃取液，濾渣用相同量的醋酸丁酯洗滌，洗液作下批萃取套用，分去萃取液中的水相，萃取液中利福霉素S已達12～14萬r/ml的結(jié)晶濃度，用1%碳酸氫鈉溶液10立升和PH2鹽酸酸水15立升，分別洗滌萃取液，分去水相。
2.結(jié)晶根據(jù)萃取液的總億∶碳酸氫鈉∶氫氧化鈉＝1∶0.13∶0.15于20～25℃分別加入碳酸氫鈉溶液和氫氧化鈉溶液，結(jié)出利福霉素SNa鹽，攪拌冷卻到15℃，保溫靜止過夜，SS-600離心機分離，88～90℃，0.09MPa真空干燥12小時。得水份在1.5%以下，生物效價在830r/mg以上的利福霉素SNa鹽。水提取新工藝化學(xué)效價收率達85～90%(以發(fā)酵液放罐體積和效價計算總億)。
本發(fā)明由于采用水溶劑析出利福霉素S結(jié)晶，計算量的醋酸丁酯萃取，在新工藝中雖說增加一臺過濾利福霉素S粗濕品的板框和SS型離心機，但也革除了原工藝中影響收率較大的，設(shè)備經(jīng)常容易壞的超速離心機和影響質(zhì)量較大，丁酯損失最多的薄膜濃縮工藝。新工藝操作容易掌握，設(shè)備簡單，容易維修，罐批差異較小，原料成本大幅度下降，利福霉素SNa鹽化學(xué)效價收率，由原工藝的75%上升到90%，成品的生物效價由750r/mg提高到830r/mg，丁酯單耗由原工藝的1∶12～17下降到1.1～1.2。
以水提取新工藝的利福霉素SNa鹽為起始原料，合成利福平和利福定的合成總收率。比原工藝分別提高15%和18%，因此，水提取新工藝有很大實用的經(jīng)濟價值。
同時，革除了超速離心機分離出來的廢液三廢。發(fā)酵菌絲體經(jīng)過絮凝劑處理和新型單流式板框應(yīng)用，綜合性的先進工藝可望解決利福霉素菌絲的三廢變?yōu)轱暳系难芯抗ぷ?，也正在同時加緊進行，具有明顯的社會效益。
權(quán)利要求
1、一項從利福霉素發(fā)酵液中提取利福霉素的工藝技術(shù)其特征是在于用水作為提取溶液，將發(fā)酵液用絮凝劑先進行予處理，在澄清的發(fā)酵濾液中以PH1.5～1.8使利福霉素S析出結(jié)晶，板框壓濾機過濾，空氣吹干，得到利福霉素S粗濕品，直接用計算量的溶劑萃取利福霉素S。萃取液中利福霉素S含量已達到利福霉素SNa鹽的結(jié)晶濃度。
2、如權(quán)利要求一中所說的，放罐后的發(fā)酵液先用PAM型絮凝劑進行予處理，板框壓濾機過濾，得到澄清度較高的發(fā)酵濾液。
3、如權(quán)利要求一中所說的工藝，其特征在于利福霉素S粗濕品不須干燥，在直接用醋酸丁酯萃取時，萃取液和變性蛋白質(zhì)極易分層，用SS型離心機就能容易分離。
4、如權(quán)利要求一中所說的萃取溶劑為醋酸丁酯。
5、如權(quán)利要求一中所說的經(jīng)離心分離后的利福霉素S萃取液已達結(jié)晶濃度12～14萬r/ml，不須薄膜濃縮工序可直接結(jié)晶利福霉素SNa鹽。
全文摘要
本發(fā)明是一項從利福霉素發(fā)酵液中提取利福霉素SNa鹽的工藝，工藝采用在發(fā)酵濾液中經(jīng)氧化后，并以調(diào)節(jié)pH至1.5～1.8，利福霉素S和在此pH等當(dāng)點的蛋白質(zhì)隨之共同結(jié)晶的濕品，再用計算量的醋酸丁酯萃取利福霉素S而除去變性蛋白，萃取液中利福霉素S已達到結(jié)晶濃度而精制得生物效價830r/mg以上的利福霉素SNa鹽。
文檔編號C08L71/00GK1038291SQ8910443
公開日1989年12月27日 申請日期1989年5月13日 優(yōu)先權(quán)日1988年5月13日
發(fā)明者徐金保 申請人:國營無錫市第一制藥廠