利用番木瓜莖、根、葉制備蛋白消化酶的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種利用番木瓜莖、根、葉制備蛋白消化酶的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]木瓜又稱番木瓜或萬(wàn)壽果，是一種熱帶水果。木瓜果實(shí)呈肉色橙黃或紅橙色，可食率高，含有豐富的的木瓜酶、維生素C、鈣、胡蘿卜素和蛋白質(zhì)及礦物質(zhì)等，營(yíng)養(yǎng)介值很高。其中的木瓜酶的用途可用于食品加工業(yè)、醫(yī)藥保健品、飼料添加劑、皮革工業(yè)和紡織工業(yè)等，用途非常廣泛。木瓜蛋白酶是利用未成熟的木瓜果實(shí)中的乳汁，采用生物工程技術(shù)手段提煉而成的一種蛋白水解酶，屬于植物蛋白酶，具有純天然、安全無(wú)毒和使用方便等特點(diǎn)。
[0003]現(xiàn)有的木瓜蛋白酶提取的方法通常為:原料驗(yàn)收木瓜乳汁一膠體磨一酶分離一冷藏一微濾一超濾一冷凍干燥一粉碎一包裝。這個(gè)方法存在著的問題有:(1)在酶分離過程中，采用碟片分離機(jī)對(duì)木瓜乳汁進(jìn)行酶與水、雜質(zhì)和纖維的分離，在經(jīng)碟片分離機(jī)前的木瓜漿酶活力u/g多12萬(wàn)，而木瓜乳汁經(jīng)過碟片分離機(jī)后的木瓜漿酶活力u/g< 8萬(wàn)，即木瓜蛋白酶的存活率降低了許多；(2)在微濾過程中一直采用0.2 μπι中空纖維管的中空纖維組合微濾機(jī)過濾木瓜乳汁，在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，0.2 μπι的中空纖維濾管容易堵塞、造成過濾慢，而且濾出的清液經(jīng)過檢測(cè)，微生物總數(shù)多2000個(gè)，超過了國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)；(3)在超濾過程中用6000分子量的中空纖維組合的中空纖維組合超濾機(jī)對(duì)木瓜乳汁進(jìn)行超濾，木瓜蛋白酶跑漏5%ο影響到木瓜蛋白酶的生產(chǎn)質(zhì)量和產(chǎn)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種通過三步制法，提取到的蛋白消化酶的純度高、活性大，且產(chǎn)量高的利用番木瓜莖、根、葉制備蛋白消化酶的方法。
[0005]本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的:一種利用番木瓜莖、根、葉制備蛋白消化酶的方法，具體包括以下幾個(gè)步驟:
一、選用快成熟但還未成熟的新鮮番木瓜，將其莖、根和葉子中的乳汁作為提取物；
二、將番木瓜的莖、根和葉子進(jìn)行搗碎，搗碎時(shí)注意使用力度，避免用力過重導(dǎo)致乳汁中夾帶過量的植物雜質(zhì)；
三、在搗碎時(shí)，避免在陽(yáng)光直射下進(jìn)行操作，防止?jié){液在紫外線的照射下產(chǎn)生化學(xué)變化；
四、將莖、根和葉子絞碎成漿液后，在其漿液中加入保護(hù)劑，然后將漿液離心取上清液放置于鼓風(fēng)干燥箱中；
五、在50到65°的溫度下烘干，烘干粉碎，粉碎后加入適量的木瓜乳汁再攪混，呈水酶混合狀；
六、將中空纖維超濾膜洗凈，然后取一定量絮凝處理后的清液，控制一定壓力和流量，進(jìn)行超濾；
七、濾布采用300到500目來(lái)對(duì)水酶狀的木瓜乳汁進(jìn)行水酶分離； 八、微慮:依次用0.4 μπι的中空纖維管、0.2 μπι的中空纖維管和0.1微米的中空纖維管進(jìn)行過濾；
九、超濾:用4000分子量的中空纖維組合超濾；
十、過濾時(shí)，在下端放置一收集容器，通過重力來(lái)進(jìn)行雜質(zhì)的分離，分離后的溶液進(jìn)行下一步處理；
i^一、在其混合液中加入某種化合物，該化合物與木瓜蛋白酶生成難溶性的復(fù)合物，從而使酶從溶液中沉淀析出，得到最終的蛋白消化酶，其酶的純度可達(dá)98%。
[0006]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明通過三步制法，提取到的蛋白消化酶的純度高、活性大，且產(chǎn)量高，利用未成熟的木瓜的莖、根和葉子作為提取物純度更高。
【具體實(shí)施方式】
[0007]本說(shuō)明書中公開的所有特征，或公開的所有方法或過程中的步驟，除了互相排斥的特征和/或步驟以外，均可以以任何方式組合。
[0008]本說(shuō)明書中公開的任一特征，除非特別敘述，均可被其他等效或具有類似目的的替代特征加以替換。即，除非特別敘述，每個(gè)特征只是一系列等效或類似特征中的一個(gè)例子而已。
[0009]一種利用番木瓜莖、根、葉制備蛋白消化酶的方法，具體包括以下幾個(gè)步驟:
一、選用快成熟但還未成熟的新鮮番木瓜，將其莖、根和葉子中的乳汁作為提取物；
二、將番木瓜的莖、根和葉子進(jìn)行搗碎，搗碎時(shí)注意使用力度，避免用力過重導(dǎo)致乳汁中夾帶過量的植物雜質(zhì)；
三、在搗碎時(shí)，避免在陽(yáng)光直射下進(jìn)行操作，防止?jié){液在紫外線的照射下產(chǎn)生化學(xué)變化；
四、將莖、根和葉子絞碎成漿液后，在其漿液中加入保護(hù)劑，然后將漿液離心取上清液放置于鼓風(fēng)干燥箱中；
五、在50到65°的溫度下烘干，烘干粉碎，粉碎后加入適量的木瓜乳汁再攪混，呈水酶混合狀；
六、將中空纖維超濾膜洗凈，然后取一定量絮凝處理后的清液，控制一定壓力和流量，進(jìn)行超濾；
七、濾布采用300到500目來(lái)對(duì)水酶狀的木瓜乳汁進(jìn)行水酶分離；
八、微慮:依次用0.4 μπι的中空纖維管、0.2 μπι的中空纖維管和0.1微米的中空纖維管進(jìn)行過濾；
九、超濾:用4000分子量的中空纖維組合超濾；
十、過濾時(shí)，在下端放置一收集容器，通過重力來(lái)進(jìn)行雜質(zhì)的分離，分離后的溶液進(jìn)行下一步處理；
i^一、在其混合液中加入某種化合物，該化合物與木瓜蛋白酶生成難溶性的復(fù)合物，從而使酶從溶液中沉淀析出，得到最終的蛋白消化酶，其酶的純度可達(dá)98%。
[0010]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明通過三步制法，提取到的蛋白消化酶的純度高、活性大，且產(chǎn)量高，利用未成熟的木瓜的莖、根和葉子作為提取物純度更高。
[0011]以上所述，僅為本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何不經(jīng)過創(chuàng)造性勞動(dòng)想到的變化或替換，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)該以權(quán)利要求書所限定的保護(hù)范圍為準(zhǔn)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種利用番木瓜莖、根、葉制備蛋白消化酶的方法，其特征在于:具體包括以下幾個(gè)步驟: 一、選用快成熟但還未成熟的新鮮番木瓜，將其莖、根和葉子中的乳汁作為提取物； 二、將番木瓜的莖、根和葉子進(jìn)行搗碎，搗碎時(shí)注意使用力度，避免用力過重導(dǎo)致乳汁中夾帶過量的植物雜質(zhì)； 三、在搗碎時(shí)，避免在陽(yáng)光直射下進(jìn)行操作，防止?jié){液在紫外線的照射下產(chǎn)生化學(xué)變化； 四、將莖、根和葉子絞碎成漿液后，在其漿液中加入保護(hù)劑，然后將漿液離心取上清液放置于鼓風(fēng)干燥箱中； 五、在50到65°的溫度下烘干，烘干粉碎，粉碎后加入適量的木瓜乳汁再攪混，呈水酶混合狀； 六、將中空纖維超濾膜洗凈，然后取一定量絮凝處理后的清液，控制一定壓力和流量，進(jìn)行超濾； 七、濾布采用300到500目來(lái)對(duì)水酶狀的木瓜乳汁進(jìn)行水酶分離； 八、微慮:依次用0.4 μπι的中空纖維管、0.2 μπι的中空纖維管和0.1微米的中空纖維管進(jìn)行過濾； 九、超濾:用4000分子量的中空纖維組合超濾； 十、過濾時(shí)，在下端放置一收集容器，通過重力來(lái)進(jìn)行雜質(zhì)的分離，分離后的溶液進(jìn)行下一步處理； i^一、在其混合液中加入某種化合物，該化合物與木瓜蛋白酶生成難溶性的復(fù)合物，從而使酶從溶液中沉淀析出，得到最終的蛋白消化酶，其酶的純度可達(dá)98%。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用番木瓜莖、根、葉制備蛋白消化酶的方法，將莖、根和葉子絞碎成漿液后，在其漿液中加入保護(hù)劑，然后將漿液離心取上清液放置于鼓風(fēng)干燥箱中；在50到65℃的溫度下烘干，烘干粉碎，粉碎后加入適量的木瓜乳汁再攪混，呈水酶混合狀；將中空纖維超濾膜洗凈，然后取一定量絮凝處理后的清液，控制一定壓力和流量，進(jìn)行超濾；在其混合液中加入某種化合物，該化合物與木瓜蛋白酶生成難溶性的復(fù)合物，從而使酶從溶液中沉淀析出，得到最終的蛋白消化酶，其酶的純度可達(dá)98%；本發(fā)明通過三步制法，提取到的蛋白消化酶的純度高、活性大，且產(chǎn)量高，利用未成熟的木瓜的莖、根和葉子作為提取物純度更高。
【IPC分類】C12N9-50
【公開號(hào)】CN104531641
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410616989
【發(fā)明人】龍曉鵬, 龐作雄, 賴德杰
【申請(qǐng)人】廣西宏美農(nóng)業(yè)科技有限公司
【公開日】2015年4月22日
【申請(qǐng)日】2014年11月6日