一種酶解法提取陳皮中橙皮苷的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明提供一種酶解法提取橙皮苷的方法，涉及醫(yī)藥領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]橙皮苷具有降低血管脆性，降血壓、抗過(guò)敏、抑制腫瘤等作用，在臨床上用于心血管系統(tǒng)疾病的輔助治療，也可用于醫(yī)藥工業(yè)中制藥的原料，橙皮苷還作為天然抗氧化劑用于食品和化妝品行業(yè)。
[0003]傳統(tǒng)從柑橘皮中提取橙皮苷通常采用熱水提取、醇回流提取、堿提酸沉等方法。這些方法都是采用化學(xué)溶劑浸潤(rùn)溶解藥材中的有效成分，雖然簡(jiǎn)單易操作，但存在提取不完全、造成一些橙皮苷殘留在果渣里，使用的化學(xué)試劑易造成環(huán)境污染等缺點(diǎn)。近年來(lái)報(bào)道微波和超聲波輔助提取橙皮苷。雖然這兩種方法提取時(shí)間短，但超聲法噪音很大，微波法有輻射，它們對(duì)提取設(shè)備有很高的要求，這在一定程度上限制了其在企業(yè)大生產(chǎn)中的應(yīng)用。
[0004]柑橘、檸檬、柚子等果皮中約含30%果膠，果膠主要存在于植物的細(xì)胞壁和細(xì)胞內(nèi)層，由于果膠阻礙了細(xì)胞內(nèi)橙皮苷等有效成分的溶出，采用果膠酶可以酶解果膠，使橙皮苷充分地溶解出來(lái)，從而明顯提高橙皮苷的提取率。
[0005]與傳統(tǒng)方法如醇溶劑回流提取法相比，酶解法提取橙皮苷具有容易過(guò)濾，操作簡(jiǎn)單，無(wú)有機(jī)溶劑殘留，不造成環(huán)境污染的優(yōu)點(diǎn)。與超聲提取法、微波提取法相比，它有無(wú)需特殊設(shè)備、生產(chǎn)安全性好、有利于勞動(dòng)保護(hù)及有利于企業(yè)大生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]一種酶解法提取陳皮中橙皮苷的方法，其特征是:稱取陳皮藥材粗粉適量，按照料液比為1: 8?40 (g/mL)的比例加入蒸餾水，按照用量為藥材質(zhì)量的O?3%加入果膠酶，其用量為藥材質(zhì)量的O?3%，用稀鹽酸將藥液的pH值調(diào)節(jié)至3?5，置于40?55°C恒溫水浴中O?3小時(shí)，取出，過(guò)濾，濾液濃縮至浸膏，然后置于真空干燥箱中干燥成粉末，即得橙皮苷提取物。
【具體實(shí)施方式】
[0007]下面結(jié)合實(shí)施實(shí)例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步描述，但其不代表為本發(fā)明的唯一實(shí)施方式。
[0008]實(shí)施實(shí)例一
[0009]1.橙皮苷的提取:
[0010]將陳皮藥材粉粹成粗粉，稱取100.0Og,加入300mL蒸餾水，加入果膠酶(300000U/g)，用量為藥材質(zhì)量的0.3%，用稀鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為3，置于45°C恒溫水浴箱中酶解2小時(shí)，取出，過(guò)濾，濾液濃縮至浸膏，然后置于真空于燥箱中干燥成粉末，即得橙皮苷提取物。
[0011]2.提取物中橙皮苷的含量測(cè)定
[0012]采用HPLC法測(cè)定，測(cè)定方法是參考2010年版《中國(guó)藥典》陳皮藥材中橙皮苷的含量測(cè)得方法。
[0013](I)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制精確稱取橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品10.lmg，加入適量甲醇，超聲溶解，用甲醇定容到25mL，配制成質(zhì)量濃度為0.404mg/mL的橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
[0014](2)檢測(cè)波長(zhǎng)的確定以空白溶劑甲醇為參比溶液，通過(guò)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)溶液在200?400nm波長(zhǎng)間掃描，同時(shí)，對(duì)陳皮樣品溶液也進(jìn)行光譜掃描。結(jié)果顯示，橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)溶液和陳皮樣品液都在285nm處有強(qiáng)吸收峰，因此取283nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。
[0015](3) HPLC 色譜條件色譜柱:Waters Symmetry C18 (250_X 4.6mm，5 μ m)，流動(dòng)相:甲醇-2%冰醋酸溶液(34: 66)，流速:0.5mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng):283nm，溫度為室溫。進(jìn)樣量:20 μ Lo橙皮苷保留時(shí)間為5.lmin。
[0016](4)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
[0017]分別精密吸取橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)溶液l、2、3、4、5mL于1mL的容量瓶中，用甲醇定容，配成質(zhì)量濃度分別為40.4,80.8、121.2、161.6,202 μ g/mL的一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行HPLC測(cè)定，在283nm波長(zhǎng)處測(cè)峰面積。以橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(y g/mL)為橫坐標(biāo)，以其峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為y = 185220x-25642，R2= 0.999，其中y表示峰面積，X表示橙皮苷的濃度。線性范圍為40.4?202 μ g/mL。
[0018](5)橙皮苷提取率的測(cè)定
[0019]提取所得溶液，用0.45 μ m微孔濾膜過(guò)濾，通過(guò)HPLC測(cè)其峰面積。通過(guò)回歸方程計(jì)算樣品中橙皮苷的含量。實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次，求平均值，測(cè)得橙皮苷提取物中橙皮苷有5.58g，則橙皮苷的提取率為5.58%。
[0020]實(shí)施實(shí)例二
[0021]1.橙皮苷的提取:
[0022]稱取陳皮藥材藥材粗粉100g，加入200mL蒸餾水，加入果膠酶(30000U/g)，用量為藥材質(zhì)量的3%，用稀鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH值為4，置于45°C恒溫水浴箱中酶解1.5小時(shí)，取出，過(guò)濾，濾液濃縮至浸膏，然后置于真空干燥箱中干燥成粉末，即得橙皮苷提取物。
[0023]2.橙皮苷提取率的測(cè)定
[0024]根據(jù)以上的HPLC法測(cè)定，測(cè)得橙皮苷提取物中橙皮苷有5.02g，則橙皮苷的提取率為5.02%o
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種酶解提取陳皮中橙皮苷的方法，其特征是:稱取陳皮藥材粗粉適量，按照料液比為1: 8?40 (g/mL)的比例加入蒸餾水，按照用量為藥材質(zhì)量的O?3%加入果膠酶，用稀鹽酸將藥液的PH值調(diào)節(jié)至3?5，置于40?55°C恒溫水浴中酶解O?3小時(shí)，取出，過(guò)濾，濾液濃縮至浸膏，然后置于真空干燥箱中干燥成粉末，即得橙皮苷提取物。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種酶解法提取陳皮中橙皮苷的方法，涉及醫(yī)藥領(lǐng)域。因柑橘等果皮富含果膠，而果膠阻礙了細(xì)胞內(nèi)有效成分的溶出。本發(fā)明是采用果膠酶來(lái)酶解藥材細(xì)胞壁和細(xì)胞間的果膠，從而破壞細(xì)胞壁，使橙皮苷充分地溶解出來(lái)，達(dá)到明顯提高橙皮苷提取率的目的。此法可用于提取陳皮、枳殼及枳實(shí)等藥材中橙皮苷。它具有操作簡(jiǎn)單，無(wú)有機(jī)溶劑殘留，不造成環(huán)境污染、無(wú)需特殊設(shè)備、生產(chǎn)安全性好、有利于企業(yè)大生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。
【IPC分類】C07H17-07, C07H1-08
【公開(kāi)號(hào)】CN104558072
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410624367
【發(fā)明人】許玲玲, 楊曉東, 陳菲, 盛柳青, 李群力, 麻佳蕾, 蔡力玲, 陳貴穎
【申請(qǐng)人】金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院
【公開(kāi)日】2015年4月29日
【申請(qǐng)日】2014年10月31日