一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種高分子藥物載體領(lǐng)域，具體涉及一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖 材料及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 殼聚糖來源于天然的動(dòng)物甲殼，結(jié)構(gòu)和性質(zhì)均十分接近天然的多糖，具有良好的 生物相容性、天然可降解性及對(duì)細(xì)胞無毒性，且易溶于酸性環(huán)境下的水溶液，因此成為研宄 的熱門，尤其是作為藥物控釋載體而受到極大的重視。殼聚糖分子鏈中含有大量的活潑氨 基，可與多種親電試劑進(jìn)行反應(yīng)，形成穩(wěn)定的化學(xué)接枝，這種便于改性的特點(diǎn)進(jìn)一步增強(qiáng)了 殼聚糖的實(shí)用性，其中利用配體對(duì)其進(jìn)行共軛接枝從而與細(xì)胞表面受體形成特異性識(shí)別的 方法是目前靶向載藥研宄領(lǐng)域的常用手段。已被較多研宄的生物素和葉酸作為上述配體種 類中的典型，在應(yīng)用于殼聚糖抗癌藥物載體的靶向改性中各自均能達(dá)到較佳的實(shí)驗(yàn)效果， 由二者之一修飾的殼聚糖納米載體均在一定程度上對(duì)肝癌細(xì)胞構(gòu)成主動(dòng)革G向，并在載藥的 情況下主要對(duì)病變組織產(chǎn)生藥效，而基本上不會(huì)傷害正常細(xì)胞，但利用生物素與葉酸作為 雙配體的研宄還未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述不足，提供一種合成周 期短、反應(yīng)效率高的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料及其制備方法。
[0004] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是：
[0005] 提供一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料，所述葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料 以殼聚糖為載體，葉酸和生物素為配體，利用N-?；磻?yīng)制備葉酸/生物素修飾的殼聚糖 材料，其結(jié)構(gòu)式如下：
[0006]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料，其特征在于，所述葉酸/生物素修飾的殼聚糖 材料以殼聚糖為載體，葉酸和生物素為配體，利用N-?；磻?yīng)制備葉酸/生物素修飾的殼 聚糖材料。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料，其特征在于：所述殼聚糖 分子量為20000-50000,脫乙酰度多85%。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料，其特征在于：所述葉酸/生 物素修飾的殼聚糖材料中葉酸和生物素的接枝率均多5%。
4. 一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料的制備方法，其特征在于步驟如下： 1) 制備殼聚糖溶液：將殼聚糖溶于醋酸溶液中，得到濃度為5-10mg/mL的殼聚糖溶液， 并調(diào)節(jié)pH值至4. 7-6.0,備用； 2) 制備琥珀酰亞胺基生物素酯：將DCC、NHS與生物素按摩爾比1. 2-1. 5:1:1混合后于 50-60°C條件下反應(yīng)16-24h，過濾后在冰浴條件下向?yàn)V液中滴加乙醚析出沉淀，然后用異丙 醇對(duì)沉淀進(jìn)行重結(jié)晶，過濾收集結(jié)晶并用DMF溶解結(jié)晶，過濾后逐滴加入無水乙醚中，冷藏 過夜，移走上清液，室溫下真空干燥得到琥珀酰亞胺基生物素酯，備用； 3) 制備具有氨基反應(yīng)活性的葉酸活性酯溶液：將葉酸溶于無水DMSO中，并加入EDC. HC1，在避光條件下于25-40°C磁力攪拌反應(yīng)l_4h，得到葉酸活性酯溶液，濃度以葉酸質(zhì)量 濃度計(jì)為26-44mg/mL，備用； 4) 將步驟2)所得琥珀酰亞胺基生物素酯溶于DMF中，得到濃度為20-34mg/mL的生物 素酯溶液，在磁力攪拌條件下，將生物素酯溶液緩慢加入步驟1)所得殼聚糖溶液中，在室 溫條件下反應(yīng)至反應(yīng)液澄清，然后在攪拌條件下緩慢加入步驟3)所得葉酸活性酯溶液，在 室溫下繼續(xù)反應(yīng)12-24h，反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液移入透析袋，于蒸餾水中透析3d，每6h換水 一次，透析后經(jīng)冷凍干燥即得到葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料的制備方法，其特征在于： 步驟3)所述葉酸與EDC. HCl的摩爾比為1:5-10。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料的制備方法，其特征在于： 步驟4)所述琥珀酰亞胺基生物素酯與殼聚糖的摩爾比為20-30:1 ;所述葉酸活性酯與殼聚 糖的摩爾比為20-30:1。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料及其制備方法，所述葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料以殼聚糖為載體，葉酸和生物素為配體，利用N-?；磻?yīng)制備葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料。本發(fā)明通過先后加入活性生物素酯和活性葉酸酯與殼聚糖反應(yīng)一次合成雙配體修飾的殼聚糖材料，接枝率高，反應(yīng)時(shí)間較兩步法大大縮短，所制備的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料可用作一種靶向抗癌藥物載體材料。
【IPC分類】A61K47-36, C08B37-08
【公開號(hào)】CN104558246
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510027979
【發(fā)明人】王勇, 何法
【申請(qǐng)人】武漢理工大學(xué)
【公開日】2015年4月29日
【申請(qǐng)日】2015年1月20日