一種草酸青霉菌生產(chǎn)麥黑酮酸(sad)發(fā)酵優(yōu)化工藝的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及發(fā)酵工程技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種高產(chǎn)、高穩(wěn)定表達(dá)的草酸青霉菌發(fā) 酵工藝優(yōu)化。
【背景技術(shù)】
[0002] Secalonic acids類化合物及其類似物廣泛分布于各類真菌或地衣的次級(jí)代謝產(chǎn) 物中,是一系列通過2-2'、2-4'或4-4'連接的雙四氫化口山酮類化合物,2-2'連接主 要是secalonic acids A-G類化合物),它們互為差向/對(duì)映異構(gòu)體。
[0003]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種草酸青霉菌生產(chǎn)麥黑酮酸(SAD)發(fā)酵優(yōu)化工藝,所述發(fā)酵工藝如下: 菌種培養(yǎng):配制菌種培養(yǎng)基(真菌四號(hào)),接入草酸青霉菌 中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心新(CGMCC)編號(hào):8504),獲得液體發(fā)酵菌 種; 配制發(fā)酵培養(yǎng)基:甘露醇48. 25g、酵母膏14. 5g、玉米漿1. 65g、KH2P04,0. 81g,去離子 水定容至l〇〇〇ml ; 得到發(fā)酵培養(yǎng)基; 發(fā)酵:量取上述發(fā)酵培養(yǎng)基l〇〇ml與500ml三角瓶中,滅菌后接入菌種lml (1%,v/v), 于28°C,搖床轉(zhuǎn)速180r/min,經(jīng)7天發(fā)酵完成發(fā)酵過程; 收集菌種:將發(fā)酵液經(jīng)12層醫(yī)用紗布過濾后得到菌體,菌體干燥后經(jīng)丙酮超聲破碎、 提取純化得到目標(biāo)代謝產(chǎn)物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種草酸青霉菌生產(chǎn)麥黑酮酸(SAD)發(fā)酵優(yōu)化工藝,其特征 是,培養(yǎng)基組成為(〖/1):甘露醇48.25、酵母膏14.5、玉米漿1.65、1(11 2?04,0.81,去離子水 定容,發(fā)酵條件為:裝瓶量1〇〇1111(50〇1111三角瓶),接種量1.51111(1%,¥八),初始??jī)?cè)-7(未 人為調(diào)節(jié)),培養(yǎng)溫度28°C,搖床轉(zhuǎn)速180r/min,經(jīng)8天發(fā)酵完成發(fā)酵過程。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種草酸青霉菌生產(chǎn)麥黑酮酸(SAD)發(fā)酵優(yōu)化工藝,其特征 是,所用培養(yǎng)基配制為甘露醇48. 25g、酵母膏14. 5g、玉米漿1. 65g、KH2P04,0. 81g,去離子 水定容至l〇〇〇ml。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種草酸青霉菌生產(chǎn)麥黑酮酸(SAD)發(fā)酵優(yōu)化工藝,其特征 是,其發(fā)酵過程特點(diǎn)為裝瓶量100 ml (500ml三角瓶),接種量1. 5ml (1%,v/v)。
【專利摘要】本發(fā)明涉及發(fā)酵工程技術(shù)領(lǐng)域,涉及一種草酸青霉菌生產(chǎn)麥黑酮酸(SAD)發(fā)酵優(yōu)化工藝,具體涉及一種高產(chǎn)、高穩(wěn)定表達(dá)的草酸青霉菌發(fā)酵工藝優(yōu)化。一種草酸青霉菌生產(chǎn)SAD發(fā)酵優(yōu)化工藝,其特征是,所述的發(fā)酵上培養(yǎng)基組成為(g/l):甘露醇48.25、酵母膏14.5、玉米漿1.65、KH2PO4,0.81,去離子水定容,發(fā)酵條件為:裝瓶量100ml(500ml三角瓶),接種量1.5ml(1%,v/v),初始pH6-7(未人為調(diào)節(jié)),培養(yǎng)溫度28℃,搖床轉(zhuǎn)速180r/min,經(jīng)8天發(fā)酵完成發(fā)酵過程。本發(fā)明工藝具有組成簡(jiǎn)單,經(jīng)濟(jì),高穩(wěn)定產(chǎn)生SAD的特點(diǎn)。SAD產(chǎn)量約900mg/l,具有一定應(yīng)用前景。
【IPC分類】C12P17-16, C12R1-80
【公開號(hào)】CN104611389
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410754162
【發(fā)明人】裴月湖, 陳剛, 王海峰, 白皎, 何鳳軍
【申請(qǐng)人】沈陽藥科大學(xué)
【公開日】2015年5月13日
【申請(qǐng)日】2014年12月10日