一株假微型海鏈藻及其作為美洲簾蛤育苗餌料的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于水產(chǎn)養(yǎng)殖餌料培養(yǎng)和投喂技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一株假微型海鏈藻及其 作為美洲簾蛤育苗餌料的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]美洲簾蛤（Mercenaria mercenaria)，又稱硬殼蛤、小圓蛤、北方簾蛤，隸屬于瓣鮑 綱（Lamillibranchia)、簾始目（Venus clam)、簾始科（Veneridae)、簾始屬（Venus)，是一 種較大型的經(jīng)濟(jì)雙殼類，最大個體殼長超過100mm.原產(chǎn)地為美國東西沿岸，適應(yīng)于不同底 質(zhì)養(yǎng)殖，生長速度較快，抗病力強，是美國消費市場最受歡迎的經(jīng)濟(jì)貝類。上世紀(jì)末已經(jīng)引 入到我國，目前在中國沿海養(yǎng)殖規(guī)模日益增加。目前苗種繁育大多集中在東南沿海，其育苗 的主要季節(jié)在每年的3-5月，此時大多育苗地區(qū)陰雨天氣較多，我國貝類苗種繁育常用的 餌料微藻在這種天氣下繁殖速度很慢，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足該品種苗種迅速生長需要的餌料。這 就需要找到一種在生產(chǎn)季節(jié)陰雨天氣下生物量繁殖速度很快的微藻品種。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是提供一株假微型海鏈藻及其作為美洲簾蛤育苗餌料的應(yīng) 用，即從海洋水域中分離篩選到低光照強度下能夠迅速繁殖的一株假微型海鏈藻 Guh005(Thalassiosira pseudonana Guh005)，并作為美洲簾蛤育苗館料的應(yīng)用，從而彌補 現(xiàn)有技術(shù)的不足。
[0004] 本發(fā)明一個方面涉及一株假微型海鏈藻Guh005 (Thalassiosira pseudonana Guh005)，已于2015年1月18日保藏于位于武漢市武漢大學(xué)的中國典型培養(yǎng)物保藏中心， 保藏編號：CCTCC NO :M2015044。
[0005] 本發(fā)明另一方面提供該株假微型海鏈藻作為美洲簾蛤苗種繁育中苗種餌料的應(yīng) 用；
[0006] 本發(fā)明還提供上述假微型海鏈藻的培養(yǎng)方法，是進(jìn)行三級培養(yǎng)制備；其中在一級 培養(yǎng)階段采用培養(yǎng)液配方如下：
[0007]每升海水中加有100mg KN03、20mg KH2P04、10mg Na2Si03、0. 20mg MnS04 .H20、5. Omg FeS04?7H20、20mg EDTA-Na2、6 y gVBJP0? 05 y gVB 12;
[0008] 在二級培養(yǎng)階段，采用培養(yǎng)液配方為每升海水中加有50mg KN03、15mg KH2P04、10mg Na2Si03、2. 50mg FeS04 ? 7H20、10mg EDTA-Na2、6 y g VBJP 0? 05 y g VB 12;
[0009] 在三級培養(yǎng)階段，采用培養(yǎng)液配方為每升海水中加有20mg尿素、20mg KH2P04、10mg Na2Si03；
[0010] 本發(fā)明的假微型海鏈藻，其培養(yǎng)光照強度為2000-8000LUX。
[0011] 本發(fā)明從自然海區(qū)篩選出低光照強度下能夠迅速繁殖的一株假微型海鏈藻 Guh005,在本發(fā)明提供的培養(yǎng)條件下，跟其他微藻餌料效果比較，在陰雨天繁殖速度要遠(yuǎn)遠(yuǎn) 超過其他常規(guī)的餌料微藻，從美洲簾蛤孵化二天后即可投喂，餌料效果跟其他常規(guī)餌料微 藻相比沒有明顯差異，可以滿足陰雨季節(jié)美洲簾蛤苗種規(guī)?；庇酿D料需求，提高了該 貝類生產(chǎn)的穩(wěn)定性。
【具體實施方式】
[0012] 對于本發(fā)明培養(yǎng)基所用的各種組分，均為微藻培養(yǎng)中常用的藥品，本發(fā)明在于使 用藥品之間的互配作用。而且，假微型海鏈藻培養(yǎng)中，除了培養(yǎng)基的選擇外，其它的培養(yǎng)方 法均可采用已公開的海洋微藻的培養(yǎng)方法。對于美洲簾蛤幼苗的培養(yǎng)，也選用公開的方法。
[0013] 以下結(jié)合實施案例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的描述。
[0014] 實施例1 :假微型海鏈藻Guh005的分離純化
[0015] 將2010年5月取自浙江樂清市翁洋鎮(zhèn)山嶼村對蝦養(yǎng)殖池塘的海水樣品，在倒置顯 微鏡下用毛細(xì)管挑離單個藻細(xì)胞后，放于96孔板中培養(yǎng)，培養(yǎng)所用到的培養(yǎng)基為f/2培養(yǎng) 基（Guillard and Ryther 1962，Guillard 1975)，培養(yǎng)溫度25±1°C，光暗比 12h:12h，每天 定時搖動兩次。在不同光照強度（l〇〇-l〇〇〇〇LuX)下，篩選到1株光照強度2000-8000Lux范 圍內(nèi)均可正常繁殖的海洋微藻一一假微型海鏈藻Guh005藻株，并已于2015年1月18日保 藏于位于武漢市武漢大學(xué)的中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號：CCTCC N0.M2015044。本 發(fā)明篩選的藻株可在鹽度5-30、溫度10-30°C范圍內(nèi)生長，是一個廣鹽、廣溫性品種，尤其 在低光照強度下具備明顯優(yōu)于其他微藻的繁殖速度。
[0016] 實施例2 :假微型海鏈藻Guh005的擴(kuò)大培養(yǎng)
[0017] 將假微型海鏈藻Guh005藻種接種到2500mL的玻璃錐形瓶中，錐形瓶中裝有進(jìn) 行一級培養(yǎng)所用的培養(yǎng)液，培養(yǎng)液配方為每升海水中加有l(wèi)〇〇mg KN03、20mg KH2P04、10mg Na2Si03、0.20mg MnS04*H20、5.0mg FeS04*7H20、20mg EDTA-Na2、6yg VBjPl0.05iig VB12，海 水鹽度為20. 5,但海水的鹽度可以在5-30范圍內(nèi)變化。培養(yǎng)時每天搖瓶3-6次，（20±2) °C 下自然光培養(yǎng)1周密度達(dá)到5000cell?yL4左右后接入50L的白色塑料桶中連續(xù)充空氣進(jìn) 行二級培養(yǎng)（接種密度40-50cell?UI71)，二級培養(yǎng)的培養(yǎng)液配方為每升海水中加有50mg KN03、15mg KH2P04、10mg Na2Si03、2.50mg FeS04*7H20、10mg EDTA-Na2、6yg VBjP0.05yg VB12，在自然光、溫度（20~25°C)下再培養(yǎng)5d左右，密度達(dá)到2000~3000cell?yL-1后 接入15-30m2水泥池（接種密度20-30cell ? y L_〇，沙濾海水的水位lm，連續(xù)充空氣培養(yǎng)， 三級培養(yǎng)液配方為每升海水中加有20mg尿素、20mg KH2P04、10mg Na2Si03，在自然光、溫度 (20~25°C)下培養(yǎng)3-5d后密度達(dá)到1000-1200cell ? y I71后進(jìn)行投喂。
[0018] 表1不同光照條件下三株藻的擴(kuò)繁倍數(shù)比較
[0019]
【主權(quán)項】
1. 一株擬微型海鏈藻，其特征在于，所述的擬微型海鏈藻的保藏編號為CCTCC NO. M2015044。
2. 權(quán)利要求1所述的擬微型海鏈藻作為貝類餌料的應(yīng)用。
3. 如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的貝類為美洲簾蛤。
4. 一種培養(yǎng)權(quán)利要求1所述的擬微型海鏈藻的方法，其特征在于，所述的方法是通過 三級培養(yǎng)制備；其中在一級培養(yǎng)階段采用培養(yǎng)液配方如下： 每升海水中加有 IOOmg KN03、20mg KH2P04、10mg Na2Si03、0.20mg MnSO4 ·Η20、5· Omg FeSO4 · 7H20、20mg EDTA-Na2、6 μ g VBjP 0· 05 μ g VB 12; 在二級培養(yǎng)階段，采用培養(yǎng)液配方為每升海水中加有50mg KN03、15mg KH2PO4UOmg Na2Si03、2. 50mg FeSO4 · 7H20、10mg EDTA-Na2、6 μ g VBjP 0· 05 μ g VB 12; 在三級培養(yǎng)階段，采用培養(yǎng)液配方為每升海水中加有20mg尿素、20mg KH2PO4UOmg Na2SiO30
5. 如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述的培養(yǎng)階段，其光照強度為低光照強 度。
6. 如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述的低光照強度為2000Lux。
【專利摘要】本發(fā)明提供一株擬微型海鏈藻Guh005，其保藏編號為CCTCC NO.M2015044。分別采用特定的培養(yǎng)液配方對該藻類進(jìn)行三級擴(kuò)大培養(yǎng)，并在美洲簾蛤(Mercenaria mercenaria)D形浮浪幼蟲變態(tài)36h后進(jìn)行投喂，餌料效果跟常規(guī)貝類餌料沒有差別。在本發(fā)明提供的培養(yǎng)液配方培養(yǎng)下，該海洋硅藻在光照強度2000-8000Lux范圍內(nèi)均可進(jìn)行露天快速三級擴(kuò)繁，尤其可作為陰雨天美洲簾蛤苗種培育餌料的優(yōu)先選擇。CCTCC NO：M201504420150118
【IPC分類】A23K1-18, C12R1-89, A23K1-14, C12N1-12
【公開號】CN104651235
【申請?zhí)枴緾N201510092775
【發(fā)明人】饒志鵬, 徐繼林, 周成旭, 吳旻, 馬斌, 嚴(yán)小軍
【申請人】寧波大學(xué)
【公開日】2015年5月27日
【申請日】2015年3月2日