莫沙必利的活性代謝物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及莫沙必利的活性代謝物的制備方法及其應 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 莫沙必利（mosapride)，（±)_4_ 氨基-5-氯-2-乙氧基-N-[[4_(4-氟節(jié) 基）-2-嗎啉基]甲基]苯甲酰胺，是一強效、選擇性苯甲酰胺類5-HT4受體激動劑，作為 新型胃動力藥，其越來越多地用于日本和其它一些亞洲國家。莫沙必利具有以下的化學結(jié) 構(gòu)：
【主權(quán)項】
1. 一種莫沙必利的活性代謝物，其結(jié)構(gòu)如下：
2. 如權(quán)利要求1所述的化合物的制備方法，步驟如下： (1) 代謝物制備的的前期準備 將培養(yǎng)好的雅致小克銀漢霉AS3. 156預培養(yǎng)24h后，加入莫沙必利DMF(N，N-二甲基甲 酰胺）溶液，使底物濃度達到200mg/L，轉(zhuǎn)化120h，轉(zhuǎn)化培養(yǎng)物于4000rpm離心20min，收集 上清轉(zhuǎn)化液約3L，置-20°C冷凍，用于制備莫沙必利代謝物。同時，將離心后的菌絲體沉淀 收集在一起，以2倍量的乙酸乙酯超聲20min,于4000rpm離心20min,收集上清液,重復以 上步驟兩次，合并洗菌絲體的乙酸乙酯，置-20°C冷凍，用于制備莫沙必利代謝物。 (2) 代謝物的分離純化 將轉(zhuǎn)化液用飽和Na2C03堿化至pH9,以2倍量乙酸乙酯萃取2次，合并有機層，與洗菌 絲體的乙酸乙酯層合并，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干，殘渣用約8.OmL甲醇-水（7:3,v/v) 復溶，上樣至填充有SephadexG10填料的內(nèi)徑約5cm的凝膠柱，以甲醇為洗脫溶劑，每8mL 收集一瓶。洗脫流份經(jīng)UPLC-MS檢測，將含有代謝物的流份合并，減壓蒸干，用甲醇溶解，運 用0DS開放柱色譜法，以甲醇-水混合溶劑系統(tǒng)進行梯度洗脫（10:90, 30:70, 50:50, 70:30， 90:10)，每50mL收集一瓶。洗脫流份經(jīng)UPLC-MS檢測，合并含代謝物的流份，減壓蒸干；用 甲醇復溶，用制備液相色譜進一步分離純化即得。所采用的制備液相色譜條件為色譜柱： ZorbaxC18柱（10. 7X250mmI.D.，7iim，美國安捷倫公司）；流動相：甲醇-10mmol/L醋酸 銨水溶液（45:55,v:v)，等度洗脫；流速：20.OmL/min;檢測波長274nm;柱溫：室溫。
3. 如權(quán)利要求1所述的化合物在制備胃動力藥的應用。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種低毒、高效的莫沙必利的活性代謝物，從而為以后臨床上成為莫沙必利的替代物。本發(fā)明提供的代謝物如下所示： 。
【IPC分類】C12P13-02, C07C237-44, A61K31-166, C12R1-645, A61P1-14
【公開號】CN104693064
【申請?zhí)枴緾N201310667000
【發(fā)明人】趙龍山, 孫曉紅, 李發(fā)美
【申請人】沈陽藥科大學
【公開日】2015年6月10日
【申請日】2013年12月10日