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      一種用嗜熱細菌處理含油脂廢水生產(chǎn)耐高溫脂肪酶的培養(yǎng)基的制作方法

      文檔序號:8425766閱讀:390來源:國知局
      一種用嗜熱細菌處理含油脂廢水生產(chǎn)耐高溫脂肪酶的培養(yǎng)基的制作方法
      【技術領域】
      [0001] 在生活或者工業(yè)生產(chǎn)中會產(chǎn)生大量高溫、含油脂的廢水,本發(fā)明的培養(yǎng)基,適合于 處理含油脂廢水的嗜熱細菌的生長,且可促進耐高溫脂肪酶生產(chǎn)。
      【背景技術】
      [0002] 生活、工業(yè)生產(chǎn)中會產(chǎn)生大量的高溫、含油脂廢水。微生物技術治理含油脂廢水, 是利用微生物的分解作用來減少水中油的濃度,消除或降低其危害程度。傳統(tǒng)的工藝中,當 含油脂污水溫度較高時,需要等待冷卻才能使用常溫嗜油菌處理,這就造成了效率的低下 與時間的浪費,而使用人工降溫散熱時,產(chǎn)生能源浪費。嗜熱微生物俗稱高溫菌或嗜熱菌, 通常是最低生長溫度45右,最適生長溫度在50~60°C最高生長溫度在70°C以上的一類微 生物的總稱,采用嗜熱微生物直接處理含油廢水并生產(chǎn)工業(yè)用霉,可以縮短處理時間,提高 處理效益。而篩選合適的培養(yǎng)基是該處理技術的重要環(huán)節(jié)。
      [0003] 傳統(tǒng)的處理培養(yǎng)基為無機鹽或HB培養(yǎng)基,在這些培養(yǎng)基中細菌處理效率和產(chǎn)酶 效率較低,這對該技術的實際應用造成了一定的阻礙。因此,優(yōu)化培養(yǎng)基是首要任務。
      [0004] 本發(fā)明結合傳統(tǒng)培養(yǎng)基中的成分,同時加入生長因子和微量元素促進細胞生長速 度和代謝活性,可以大幅度提高油脂處理效率和產(chǎn)酶效率。
      [0005] 處理含油脂廢水的嗜熱細菌來源于環(huán)境中的含油脂土壤,最適生長溫度在55°C。 在應用方面,處理含油脂廢水的嗜熱細菌能夠產(chǎn)生耐高溫的脂肪酶。該種脂肪酶的活性和 熱穩(wěn)定性有待進一步探索。

      【發(fā)明內(nèi)容】

      [0006] 本發(fā)明的目的在于提供用于處理含油脂廢水的嗜熱細菌生產(chǎn)耐高溫脂肪酶的培 養(yǎng)基,其制備方法及應用。
      [0007] 本發(fā)明的第一方面,提供一種處理含油脂廢水的嗜熱細菌的培養(yǎng)基,所述培養(yǎng)基 包括以下組分:
      【主權項】
      1.兩種適合于處理含油脂廢水的嗜熱細菌生長的培養(yǎng)基,其特征在于,所述包括以下 組分: 無機鹽培養(yǎng)基 磷酸氫二鉀 2g/L; 磷酸二氫鉀 〇.5g/L; 氯化鈉 〇.5g/L; 氯化銨 〇.5g/L; 硫酸鎂 〇.2g/L; 氯化鈣 10mg/L和 維生素母液 ImLZL 生長因子胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素 硫酸鈣 0.2g/L; 七水合硫酸亞鐵 〇.2g/L; 硫酸猛 0,02g/L; 鉬酸鈉 0.0 lg/L· 硫酸銅 0.02g/L; 七水硫酸鈷 O.Olg/L和 硼酸 0.005g/L。 在無機鹽培養(yǎng)基中加入1 %生長因子和1 %微量元素,組成培養(yǎng)基A。 在另一優(yōu)選案例中,所述培養(yǎng)基包括以下組分: HB培養(yǎng)基 硫酸鎂 0.2g/L; 氯化鈣 0.02g/L; 磷酸二氫鉀 l.〇g/L; 磷酸氫二鉀 1.0g/L; 磷酸氫二鈉 1.0431g/'L; 氯化銨 0.6688g/L; 硝酸鈉 1.0625g/L和 氯化鐵: 0.05g/L。 生長因子胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素 硫酸0.2g/L; 七水合硫酸亞鐵 〇.2g/L; 硫酸錳 0.02g/L; 鉬酸鈉 O.Olg/L; 硫酸銅 0.02g/L; 七水硫酸鈷 0.01g/L和 硼酸 0.005g/L。 在HB培養(yǎng)基中加入1 %生長因子和1 %微量兀素,組成培養(yǎng)基B。
      2.如權利要求1所述的培養(yǎng)基,其特征在于,所述培養(yǎng)基組分如下所示: 無機鹽培養(yǎng)基 磷酸氫二鉀 2g/L; 磷酸二氫鉀 0.5g/L; 氯化鈉 0.5g/L; 氯化銨 〇.5g/L; 硫酸鎂 0.2g/L; 氯化鈣 10mg/Lfll 維生素母液 lmL/L 生長因子胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素 硫酸齊 〇.2g/L; 七水合硫酸亞鐵 〇.2g/L; 硫酸錳 0.02g/L; 鉬酸鈉 O.Olg/L; 硫酸銅 0.02g/L; 七水硫酸鈷 0.01 g/L和 硼酸 0.005g/L。 在無機鹽培養(yǎng)基中加入1 %生長因子和1 %微量元素,組成培養(yǎng)基A。 在另一優(yōu)選案例中,所述培養(yǎng)基包括以下組分: HB培養(yǎng)基 硫酸鎂 0.2g/L; 氯化鈣 0.02g/L; 磷酸二氫鉀 l.Og/L; 磷酸氫二鉀 l.Og/L: 磷酸氫二鈉 丨.043lg/L: 氯化銨 0.6688g/L; 硝酸鈉 1.0625g/L和 氯化鐵: 0.05g/L。 生長因子胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素 硫酸興 0.2g/L; 七水合硫酸亞鐵 0.2g/L; 硫酸錳 0.02g/L; 鉬酸鈉 0.01g/L; 硫酸銅 0.02g/L; 七水硫酸鈷 0.0 IgZL和 硼酸 0.005g/U 在HB培養(yǎng)基中加入1 %生長因子和1 %微量兀素,組成培養(yǎng)基B。
      3. 如權利要求1-2所述的培養(yǎng)基,其特征在于,所述培養(yǎng)基中,還含有有效量的生長因 素和微量元素:較佳的, 生長因子含量為:胰蛋白胨 〇. lg/L和 酵母提取物〇.〇5g/L。 微量元素含量為:硫酸鈣 〇.2g/L; 七水合硫酸亞鐵 〇.2g/L; 硫酸錳 0.02gZL; 鉬酸鈉 0.01 g/L; 硫酸銅 0.02g/L; 七水硫酸鈷 0.01 g/L和 硼酸 0.005g/L。
      4. 如權利要求1-3任一所述培養(yǎng)基,其特征在于,所述培養(yǎng)基中,各組分配置于水中; 和/或所述培養(yǎng)基的pH值7. 0±0. 5。
      5. 權利要求1-3任一所述培養(yǎng)基的用途,用于培養(yǎng)處理含油脂廢水的嗜熱細菌,生產(chǎn) 耐高溫的脂肪酶。
      6. -種制備權利要求1-3任一所述的處理含油脂廢水的嗜熱細菌的培養(yǎng)基的方法,其 特征在于,所述方法包括: a) 將所述胰蛋白胨、酵母提取物、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化銨、硫酸鎂、氯 化鈣、維生素母液、硫酸鈣、七水合硫酸亞鐵、硫酸錳、鉬酸鈉、硫酸銅、七水硫酸鈷和硼酸用 去離子水溶解混合。 b) 將所述胰蛋白胨、酵母提取物、硫酸鎂、氯化鈣、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、硝酸銨、氯 化銨、硝酸鈉、氯化鐵、硫酸鈣、七水合硫酸亞鐵、硫酸錳、鉬酸鈉、硫酸銅、七水硫酸鈷和硼 酸用去離子水溶解混合。
      7. -種利用處理含油脂廢水的嗜熱細菌,生產(chǎn)耐高溫的脂肪酶的方法,其特征在于,所 述方法包括:利用權利要求1-3任一所述的培養(yǎng)基培養(yǎng)處理含油脂廢水的嗜熱細菌,從而 生產(chǎn)耐高溫的脂肪酶。
      8. 如權利要求6所述的方法,其特征在于,將處理含油脂廢水的嗜熱細菌按體積比3% 的接種量接種入權利要求1-3任一所述的培養(yǎng)基,55°C,置于搖床中160rpm/min,發(fā)酵培養(yǎng) 24h后,離心分離發(fā)酵上清液,其中含有脂肪酶。
      【專利摘要】本實驗涉及一種用于處理含油脂廢水的嗜熱細菌生產(chǎn)耐高溫脂肪酶的培養(yǎng)基。在生活或者工業(yè)生產(chǎn)中會產(chǎn)生大量的含油脂的廢水,本發(fā)明的培養(yǎng)基,適合于處理含油脂廢水的嗜熱細菌的生長并生產(chǎn)耐高溫的脂肪酶。
      【IPC分類】C12N9-20, C12N1-20
      【公開號】CN104745508
      【申請?zhí)枴緾N201510126483
      【發(fā)明人】李琳, 肖雅, 周遠群, 張強, 閆筱, 羅明志, 董進, 周歡, 邱國華, 鄧林紅
      【申請人】常州大學
      【公開日】2015年7月1日
      【申請日】2015年3月20日
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