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      脅迫誘導型衍生啟動子的制作方法

      文檔序號:8460348閱讀:428來源:國知局
      脅迫誘導型衍生啟動子的制作方法
      【專利說明】脅迫誘導型衍生啟動子
      [0001] 發(fā)明背景
      [0002] 本發(fā)明涉及通過非生物脅迫可誘導的衍生植物啟動子,以及用所述非生物脅迫誘 導性啟動子轉化的宿主細胞和轉基因植物。
      [0003] 非生物脅迫包括干旱、鹽度和極端溫度。這些脅迫,特別是干旱,引起農作物生產 重大的損失。作物耐受干旱條件的能力將是有益于降低這些損失。
      [0004] PCT/IB2008/054628(公開為W02009/060402)中描述了在非生物脅迫條件下可 誘導的植物啟動子,將其內容通過引用合并入本文中。總的來說,與通過組成型啟動子的 高水平轉基因表達相比,脅迫誘導性啟動子在轉基因植物中具有低的基因表達水平。另一 方面,發(fā)現(xiàn)從耐干燥的單子葉植物Xerophyta viscosa的基因組分離的脅迫誘導型啟動子 XvPSapl有效地表達。然而,XvPSapl啟動子具有缺陷,因為序列相對大。大的啟動子大小 是其用于轉基因植物研發(fā)中的限制因素,因為轉基因DNA序列越長,轉化效率和形狀穩(wěn)定 性越低。因此,這將很大程度地限制XvPSapl在生物技術應用中的使用。
      [0005] 因此,對可以用于轉化作物并且其具有短于XvPSapl的長度而且仍然能夠至少起 到與XvPSapl同樣好的作用的非生物脅迫誘導型啟動子存在需求。

      【發(fā)明內容】

      [0006] 根據本發(fā)明的第一個實施方案,提供了從Xerophyta viscosa分離的衍生植物啟 動子核苷酸序列,其作為通過非生物脅迫可誘導的植物啟動子。
      [0007] 所述核苷酸序列可以源自Xerophyta viscose XvPSapl或可以人工合成。
      [0008] 衍生啟動子片段核苷酸序列可以包括如下鑒定的一個或多個調控元件:富TC 重復序列actttctcca,attttctaac ;MYB轉錄因子結合位點,caactg;或ABA-應答原件
      【主權項】
      1. 一種衍生啟動子,包含選自由以下組成的組的核酸序列: (a) 呈現(xiàn)出與SEQ ID NO: 1-3中的任一個至少80%序列同一性的核酸序列;和 (b) SEQ ID NO: 1-3中的任一個的核酸序列; 其中所述衍生啟動子作為啟動子起作用。
      2. 根據權利要求1所述的衍生啟動子,其中所述衍生啟動子是誘導型啟動子。
      3. 根據權利要求2所述的衍生啟動子,其中所述衍生啟動子是通過非生物脅迫可誘導 的。
      4. 根據權利要求3所述的衍生啟動子,其中所述非生物脅迫選自由滲透脅迫、脫水脅 迫、溫度脅迫、干旱、鹽度或干燥組成的組。
      5. -種核苷酸盒,包含權利要求1至4中任一項所述的衍生啟動子,可操作地連接異源 可轉錄DNA序列,和,其中表達盒進一步可選含有可操作地連接異源可轉錄DNA序列的終止 子序列。
      6. -種重組載體,包含權利要求5所述的核苷酸盒。
      7. -種用權利要求6所述的重組載體轉化的宿主細胞。
      8. -種包含權利要求7所述的宿主細胞的轉基因植物。
      9. 一種獲自權利要求8所述的轉基因植物的轉基因種子。
      10. -種調控宿主細胞中異源可轉錄DNA序列的轉錄的方法,所述方法包括用權利要 求5所述的核苷酸盒轉化宿主細胞。
      11. 一種調節(jié)轉基因植物中異源可轉錄DNA序列的轉錄的方法,所述方法包括用權利 要求5所述的核苷酸盒轉化所述植物。
      12. -種生產轉基因植物的方法,所述方法包括將權利要求5所述的核苷酸盒引入宿 主細胞中,并且從所述細胞再生轉基因植物。
      【專利摘要】本發(fā)明涉及非生物脅迫誘導型衍生啟動子,所述非生物脅迫誘導型衍生啟動子來自含有可操作地連接異源可轉錄DNA序列的Xerophyta viscosa、核苷酸盒、重組載體、細胞和轉基因植物。
      【IPC分類】C12N15-82, A01H5-00, C07K14-415
      【公開號】CN104781406
      【申請?zhí)枴緾N201380047042
      【發(fā)明人】林恩·阿倫德則-貝利 布朗溫, 安·湯姆森 詹妮弗, 克什尼·伊耶, 蘇海勒·拉富迪恩 穆罕默德, 雷維爾·伊耶, 洛倫·艾利克 塔馬英
      【申請人】開普敦大學
      【公開日】2015年7月15日
      【申請日】2013年9月9日
      【公告號】CA2883151A1, WO2014037919A1
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