孕甾烷生物堿及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬藥物領(lǐng)域，涉及含孕留烷生物堿的單體化合物及其分離制備、以及用于 治療腫瘤的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 據(jù)報(bào)道，惡性腫瘤是目前危害人們健康的重大疾病之一。目前，臨床實(shí)踐中腫瘤的 治療方案有手術(shù)、放療和化療等治療方案?；熥鳛槟[瘤治療的三大傳統(tǒng)手段之一，在腫瘤 治療中占據(jù)著重要地位。已知治療腫瘤的化學(xué)藥物包括化學(xué)合成藥物和中藥提取物等等， 從天然藥物中尋找發(fā)現(xiàn)活性成分一直是業(yè)內(nèi)抗腫瘤藥物研究的熱點(diǎn)。
[0003] 黃楊科野扇花屬多種植物是我國(guó)民間中藥材，主要用于治療胃病、跌打勞傷、頭暈 心悸、喉嚨腫痛等。研究發(fā)現(xiàn)該植物含生物堿成分，有研究在抗腫瘤天然產(chǎn)物的篩選工作 中，發(fā)現(xiàn)野扇花屬植物清香桂（Sarcococca ruscifolia)的乙醇提取物對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具 有抑制活性，進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)其抗腫瘤的主要活性成分為孕留烷類(lèi)生物堿，多年來(lái)，國(guó)內(nèi) 外對(duì)于這類(lèi)孕留烷類(lèi)生物堿的相關(guān)研究多局限于其對(duì)乙酰膽堿酯酶和丁酰膽堿酯酶的抑 制活性方面。
[0004] 迄今，尚未見(jiàn)有關(guān)清香桂生物堿部位的化學(xué)成分及其藥理作用的系統(tǒng)研究的報(bào) 道。本申請(qǐng)的發(fā)明人擬提供新的一類(lèi)孕留烷生物堿及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的 用途。
[0005] 與本發(fā)明相關(guān)的現(xiàn)有技術(shù)有：
[0006] [1]. Kang He, et al. Two new steroidal alkaloids from the roots of sarcococca ruscifolia. Journal of Asian Natural Product Research,2010, 12(3) :233-238.
[0007] [2]. Yun Sun, et al. Pregnane alkaloids from Pachysandra axillaris. Streoids，2010,75:818-824.
[0008] [3].庾石山，等.海南野扇花中甾體生物堿的化學(xué)研究.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1997， 32(11) :852-856.。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明的目的是提供新的用于治療腫瘤的天然藥用植物單體化合物和藥物組合。 具體的涉及一類(lèi)孕留烷生物堿及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的用途。
[0010] 本發(fā)明對(duì)野扇花屬及其近緣的板凳果屬（又稱(chēng)富貴草屬）植物板凳果 (pachysandra axillaris)的化學(xué)成分及其藥理作用進(jìn)行了系統(tǒng)研究，分離得到包括多個(gè) 新化合物在內(nèi)的一類(lèi)孕留烷生物堿，經(jīng)藥理測(cè)試表明，獲得的多個(gè)化合物具有良好的抗腫 瘤活性。
[0011] 本發(fā)明涉及的天然藥用植物單體化合物為孕甾烷類(lèi)生物堿化合物，具有式（I)的 結(jié)構(gòu)通式。
[0012]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 式（I)通式結(jié)構(gòu)的孕甾烷生物堿，
所述的孕甾烷甾體生物堿的骨架中，2,3位之間的連接和/或16,17位之間的連接是單 鍵或雙鍵； 所述的孕留烷留體生物堿的3-位和20-位為N原子取代； 所述的孕留烷留體生物堿的4-位與R2相連的鍵是單鍵或雙鍵。
2. 按權(quán)利要求1所述的孕留烷生物堿，其特征在于，所述的孕留烷留體生物堿的3-位 N原子上的取代基&和20-位N原子上的取代基R3、R4是烴基、?；螋剩ㄈ┗?。
3. 按權(quán)利要求2所述的孕留烷生物堿，其特征在于，所述的孕留烷留體生物堿的3-位 和20-位的N原子上的取代基札為和R4若為烴基，則該取代基是取代和未取代的烷烴、烯 烴或炔烴。
4. 按權(quán)利要求2所述的孕留烷生物堿，其特征在于，所述的孕留烷留體生物堿的3-位 N原子上的取代基&若為酰基，則該取代基是異戊烯酰基、苯甲酰基、巴豆?；?、肉桂?；?， 取代或未取代的磷酸酰基、磺酰基、苯磺?；蚱渌袡C(jī)酸酰基。
5. 按權(quán)利要求2所述的孕留烷生物堿，其特征在于，所述的孕留烷留體生物堿的20-位 N原子上的取代基R3和R4是氫或甲基。
6. 按權(quán)利要求1所述的孕留烷生物堿，其特征在于，所述的孕留烷留體生物堿4-位的 馬基團(tuán)是氫、烴基、含氧基團(tuán)、含氮基團(tuán)、含硫基團(tuán)或其它雜原子基團(tuán)。
7. 按權(quán)利要求6所述的孕留烷生物堿，其特征在于，所述的孕留烷留體生物堿4-位的 R2基團(tuán)若為含氧基團(tuán)，則該基團(tuán)是羥基或4-羰基。
8. 權(quán)利要求1所述通式結(jié)構(gòu)的孕留烷生物堿單體化合物，其特征在于，單體化合物是： 化合物1 : (20s)-20-甲胺基-3-異戊烯酰胺基-5 a -2-孕留烯-4-酮； 化合物2 : (20s) -20-甲胺基-3-異戊烯酰胺基-5 a -2, 16-孕留二烯-4-酮； 化合物3 : (20s) -20- (N，N-二甲胺基）-3 0 -苯甲酰胺基-5 a -16-孕甾烯； 化合物 4 : (20S) -20- (N, N-dimethylamino) _3 0 - (benzamido) _5 a -pregnane，即表粉 蕊黃胺 D(epipachysamine D); 化合物 5 : (20s) -20- (N，N-dimethylamino) _3 0 -senecioylamino-5 a -pregn-2-ene-4_one，即富貴草喊 M(pachysamine M); 化合物 6 : (20s) -20- (N，N-dimethylamino) -3 0 -tigoylamino-5 a -pregn-2-ene_4-〇 ne,艮P Sarcovagine D〇
9. 按權(quán)利要求8所述通式結(jié)構(gòu)的孕留烷生物堿單體化合物，其特征在于，通過(guò)色譜分 離方法從黃楊科野扇花屬植物清香桂和板凳果屬植物的板凳果中或其他屬含類(lèi)似孕甾烷 生物堿的同科植物中提取分離得到。
10. 按權(quán)利要求9所述通式結(jié)構(gòu)的孕留烷生物堿單體化合物，其特征在于，所述的色譜 分離方法中，采用正相氧化鋁或硅膠色譜方法，用石油醚、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、 乙醇或甲醇有機(jī)溶劑作為洗脫劑； 或，采用反相色譜方法，反相色譜填料選用C18鍵合相硅膠、C8鍵合相硅膠、苯基鍵合相 硅膠或氰基鍵合相硅膠，用醇-水混合溶劑進(jìn)行洗脫； 或，采用凝膠、大孔吸附樹(shù)脂、離子交換樹(shù)脂、甲基丙烯酸聚合樹(shù)脂的色譜方法，用 醇-水混合溶劑進(jìn)行洗脫。
11. 權(quán)利要求1的孕留烷生物堿及其單體化合物及其組合在制備抗腫瘤藥物中的用 途。
12. 按權(quán)利要求11所述的用途，其特征在于，所述的腫瘤是結(jié)腸癌、肺癌、腦癌或乳腺 癌。
13. 按權(quán)利要求11所述的用途，其特征在于，所述的抗腫瘤藥物通過(guò)抑制A549、H1299、 HCT116、HT29、U87、U251、MCF-7或BT549腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，達(dá)到治療腫瘤。
14. 按權(quán)利要求11所述的用途，其特征在于，所述的抗腫瘤藥物用載體或賦形劑給予 全身或局部給藥。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明屬藥物領(lǐng)域，涉及含孕甾烷生物堿的單體化合物及其分離制備、以及用于治療腫瘤的用途。本發(fā)明對(duì)野扇花屬及其近緣的板凳果屬植物板凳果(pachysandra axillaris)的化學(xué)成分及其藥理作用進(jìn)行了系統(tǒng)研究，分離得到一類(lèi)孕甾烷生物堿及其單體化合物，經(jīng)藥理測(cè)試表明，獲得的化合物具有良好的抗腫瘤活性。所述孕甾烷生物堿單體化合物及組合可制備抗腫瘤藥物，用載體或賦形劑給予全身或局部用藥，用于治療結(jié)腸癌、肺癌、腦癌及乳腺癌。
【IPC分類(lèi)】A61K31-57, A61P35-00, C07J41-00
【公開(kāi)號(hào)】CN104804057
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410036401
【發(fā)明人】程科軍, 俞培忠, 石智, 張鵬, 胡昌奇, 程文亮
【申請(qǐng)人】復(fù)旦大學(xué), 麗水市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院, 暨南大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年7月29日
【申請(qǐng)日】2014年1月26日