蟲草酵素深層液體發(fā)酵及其擴(kuò)培方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種利用藥食同源用真菌一一冬蟲夏草，經(jīng)過深層液體發(fā)酵二級(jí)擴(kuò)大 培養(yǎng)制得蟲草酵素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 北冬蟲夏草又稱蛹蟲草、北蟲草等，屬于真菌門，子囊菌亞門，肉座菌門，麥角菌 科，蟲草屬，富含豐富的蟲草酸、蟲草素、蟲草多糖、核苷類物質(zhì)、S0D、生物堿、留醇、有機(jī)酸 等活性成分，在藥理功能及臨床效果方面與野生冬蟲夏草基本一致，是野生冬蟲夏草最理 想的代用品。我國現(xiàn)有的具有食用、藥用價(jià)值的北冬蟲夏草主要源于人工培養(yǎng)。人工培養(yǎng) 北蟲草主要有兩種培養(yǎng)方法：固態(tài)發(fā)酵法和液態(tài)發(fā)酵法，其中液態(tài)發(fā)酵法具有周期短、原料 利用率高、發(fā)酵效率高、操作方便、成本低、占地面積小、產(chǎn)量高、污染少等特點(diǎn)，這為蟲草酵 素的工業(yè)化生產(chǎn)提供了理論基礎(chǔ)和現(xiàn)實(shí)依據(jù)。
[0003] 酵素是一種由氨基酸組成的具有特殊生物活性的物質(zhì)，它存在于所有活的動(dòng)植物 體內(nèi)，幾乎參與所有的生命活動(dòng)。酵素可使體內(nèi)的血液成弱堿性，清除體內(nèi)廢物，具有抗菌、 抗炎、激活免疫細(xì)胞和促進(jìn)細(xì)胞新生等作用。目前，日本和我國臺(tái)灣對(duì)酵素的研宄均遙遙領(lǐng) 先，我國內(nèi)陸對(duì)酵素的研宄、發(fā)展相對(duì)滯后，但隨著生物技術(shù)的融入、發(fā)酵技術(shù)的迅猛發(fā)展， 以及市場(chǎng)的需求，中國的酵素業(yè)也逐漸更新?lián)Q代。如今，市場(chǎng)中已存在多種酵素產(chǎn)品，涉及 保健食品、飲品、飲料、美容化妝品等領(lǐng)域，其中蟲草酵素除具有酵素的基本作用之外還融 合了北冬蟲夏草的功效，具有了抗癌、防衰、潤(rùn)肺補(bǔ)腎、降血脂、降血壓等作用，具有光明的 發(fā)展前景和廣闊的應(yīng)用領(lǐng)域。
[0004] 在生產(chǎn)蟲草酵素過程中，北冬蟲夏草真菌先經(jīng)3~5天停滯期，充分分解培養(yǎng)基中 的碳源、氮源，大量合成自身生長(zhǎng)繁殖所需成分；之后進(jìn)入對(duì)數(shù)期，北冬蟲夏草真菌大量繁 殖，其形態(tài)和生理特性比較穩(wěn)定，此時(shí)進(jìn)行菌種的一級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)，為延長(zhǎng)真菌的穩(wěn)定期，提 高蟲草酵素有效內(nèi)容物含量，進(jìn)行第二次擴(kuò)大培養(yǎng)，此時(shí)蟲草多糖、蟲草酸、蟲草素、超氧化 物歧化酶、核苷類物質(zhì)等大量積累，在衰亡期之前停止發(fā)酵，收集分離發(fā)酵產(chǎn)物。經(jīng)連續(xù)深 層液體發(fā)酵得到的蟲草酵素?zé)o任何添加劑，均為菌種的次生代謝產(chǎn)物。蟲草酵素可應(yīng)用于 食品、保健品、藥品和化妝品等領(lǐng)域。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種蟲草酵素深層液體發(fā)酵及逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)方法。
[0006] 本發(fā)明包括以下步驟：
[0007] ( -）、本發(fā)明所用的培養(yǎng)基是由下述重量百分比的組分組成：
[0008]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種蟲草酵素深層液體發(fā)酵及其擴(kuò)培方法，該方法包括w下步驟： (一） 、所用的培養(yǎng)基是由下述重量百分比的組分組成：
(二） 、培養(yǎng)過程如下： (1) 、配制培養(yǎng)基 配制培養(yǎng)基，煮沸后調(diào)節(jié)抑值到5. 5~6. 5,趁熱將培養(yǎng)基分裝到錐形瓶中，封口準(zhǔn)備 滅菌； (2) 、培養(yǎng)基滅菌與接種 將配好的培養(yǎng)基放入滅菌鍋，121°C滅菌20min，放在無菌操作臺(tái)，紫外滅菌30min后接 北冬蟲夏草菌株； (3) 、搖床培養(yǎng) 溫度為24°C~25°C，轉(zhuǎn)速為16化/min,避光培養(yǎng)3~4天，使菌種活化； (4) 、一級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng) 將培養(yǎng)基倒入2化發(fā)酵罐，在位滅菌30min，降溫后，迅速倒入種子液開始發(fā)酵；設(shè)置發(fā) 酵溫度為24°C~25°C，轉(zhuǎn)速為12化/min,控制通氣量為；1~1. 2 (v/v'min)，避光培養(yǎng)1~ 2天。 巧）、二級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng) 將配制好的培養(yǎng)基倒入30化發(fā)酵罐中，在位滅菌30min，降溫，將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至30化 發(fā)酵罐發(fā)酵；設(shè)置通氣量為1~1. 2(v/v'min)，溫度為24°C~25°C，轉(zhuǎn)速為80r/min培養(yǎng) 1~2天，轉(zhuǎn)速為10化/min培養(yǎng)2~3天，調(diào)節(jié)二級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)的初始抑為5. 5~6. 5。 化）、發(fā)酵后處理 發(fā)酵結(jié)束后，將發(fā)酵液全部收集，過濾、離屯、得到蟲草酵素。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種蟲草酵素深層液體發(fā)酵及其擴(kuò)培方法，北冬蟲夏草菌株接種到液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)3～5天，制備種子液，經(jīng)過一、二級(jí)擴(kuò)培后，將發(fā)酵液過濾，離心，得到蟲草酵素。制得的蟲草酵素可應(yīng)用于食品、保健品、藥品和化妝品等領(lǐng)域。該工藝操作簡(jiǎn)單，無污染，原料利用率較高，在此培養(yǎng)條件下得到的蟲草酵素中蟲草多糖、蟲草素、超氧化物歧化酶、有機(jī)酸等有效成分含量較高，可以滿足市場(chǎng)對(duì)蟲草酵素的需求。
【IPC分類】C12P1-02, C12R1-645
【公開號(hào)】CN104846018
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510267583
【發(fā)明人】邱芳萍
【申請(qǐng)人】吉林省方平科技有限公司
【公開日】2015年8月19日
【申請(qǐng)日】2015年5月23日