考布他汀類似物水溶性前-前藥及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種水溶性的考布他汀類似物（Combretastatin A-4 analogue)的 前-前藥及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 考布他汀類似物是一類小分子腫瘤血管革E向阻斷試劑（Vascular Disrupting Agents，VDA)。它能針對腫瘤血管顯示出特異性靶向和阻斷破壞已生成的腫瘤血管，使腫 瘤得不到氧氣和營養(yǎng)，直至腫瘤"餓死"。因此，對于現(xiàn)有化療和放療不能輕易殺死的腫瘤核 心部位的癌細胞，考布他汀類似物可以從內(nèi)到外地徹 110, 2170-2177 (29 April 2014))〇
[0003] 考布他汀類似物是一類順式1，2-二苯乙烯芳胺衍生物。由于其水溶性非常低，限 制了臨床應(yīng)用。目前，考布他汀類似物的絲氨酸鹽酸鹽(AVE8062)水溶性前藥由賽諾飛-安 萬特制藥公司研發(fā)進入II期臨床研宄。但仍存在著水解穩(wěn)定性差，體內(nèi)傳運性質(zhì)不好，毒 性較大等問題。（Lancet Oncol. 2015 Apr 8.) 前藥（prodrug)設(shè)計已成為藥物設(shè)計領(lǐng)域中重要的有效手段之一。關(guān)于前藥概念和應(yīng) 用已有諸多專利申請并獲權(quán)。但是，這樣的前藥常常存在一些問題，如根據(jù)特異性靶位裂解 機制（如酶活性）設(shè)計的前藥，往往因達不到靶位組織而失效；為改善水溶性而設(shè)計的注射 用前藥，會因其不穩(wěn)定，在溶液中易分解而不能應(yīng)用等?？朔八幍纳鲜鋈秉c，改善前藥的 性質(zhì)，目前看來較有前途的方法是采用串聯(lián)潛伏化（Cascade Latentiation)方法，即設(shè)計 雙前藥（Double prodrug)或前-前藥（Pro_prodrug)(Bundgaard Η· The double prodrug concept and its applications. Adv Drug Delivery Rev 1999; 3: 39)。例如：將在特異 性部位裂解的前藥，進一步潛伏化，改善其傳運性能，制成在體內(nèi)具有良好傳運性質(zhì)，能有 效地到達作用靶位的前藥的前藥。再如：采用串聯(lián)潛伏化，使前藥具有較理想的性質(zhì)，即同 時具有體外的足夠穩(wěn)定性和體內(nèi)再生母體藥物的高度敏感性。一般的思路是使體外足夠穩(wěn) 定的雙前藥在體內(nèi)先經(jīng)酶解成前藥，然后經(jīng)酶或非酶分解迅速釋放出母體藥物，從而發(fā)揮 藥效。更進一步地研宄發(fā)現(xiàn)：雙前藥或前-前藥在體內(nèi)先經(jīng)酶解生成前藥，而后可經(jīng)酶或非 酶的化學作用迅速釋放出母體藥物，發(fā)揮藥效。前期研宄表明，化合物3- (2'_羥基-4'， 6' -二甲基苯基）-3, 3-二甲基丙酸的酰胺形式在人體內(nèi)pH值環(huán)境下具有快速反應(yīng)活性， 可以滿足雙前藥設(shè)計的要求。Milstien和Cohen小組的研宄（J. Am. Chem. Soc. 1972， 94 (26)，9158-9165)以及 Caswell 和 Schmir 小組的研宄（J. Am. Chem. Soc. 1980，102 (14)，4815-4821)都表明3, 3位上二甲基和6'位上的甲基組成一個所謂"三甲基鎖"效 應(yīng)，使得其分子具有快速內(nèi)酯化作用。正是由于這個特性，它可以很好的用來設(shè)計胺類化合 物的前藥。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的之一在于提供一種考布他汀類似物前-前藥。
[0005] 本發(fā)明的目的之二在于提供該前-前藥的制備方法。
[0006] 本發(fā)明創(chuàng)造性的運用"磷酸鈉鹽"水溶性前藥和"羥基-酰胺類化合物的'三甲基 鎖效應(yīng)'，提高體內(nèi)傳運性能"的理念，設(shè)計合成考布他汀類似物的前-前藥，首先構(gòu)筑具 有"三甲基鎖效應(yīng)"的化合物2c。用3，5-二甲基苯酚和異戊烯酸甲酯在甲基磺酸溶液中 回流反應(yīng)，得到4，4，5，7-四甲基-3，4-二氫香豆素（2a)。隨后2a在氫化鋁鋰作還原 劑，無水四氫呋喃作溶劑的條件下，還原成3- (2' -羥基-4'，6' -二甲基苯基）-3， 3-二甲基丙醇（2b)?；衔?b溶于二氯甲烷，加入保護試劑叔丁基二甲基氯硅烷，在縛酸 劑三乙胺的作用下，室溫反應(yīng)24小時，得到1-0-叔丁基二甲基硅基-3-(2' -羥基-4'， 6' -二甲基苯基）-3，3-二甲基丙醇（2c)。接著實施磷酸酯化，形成水溶性磷酸二鈉鹽前 藥?；衔?c溶于無水四氫呋喃，在叔丁醇鉀和焦磷酸四芐酯作用下，60°C反應(yīng)1小時，得 到1-0-叔丁基二甲基硅基_3-[2' -氧代（二芐基磷酸酯基）-4'，6' -二甲基苯基]-3， 3-二甲基丙醇（2d)，化合物2d溶解在丙酮中，加入氟化鉀后，滴入新制Jones試劑，反應(yīng) 后得3-[2' -氧代（二芐基磷酸基）-4'，6' -二甲基苯基]-3，3-二甲基丙酸（2e)。在 四氫呋喃溶劑中，化合物2e在攪拌下溶解，再加入新蒸的亞硫酰氯，加熱回流4小時候，減 壓除去溶劑和過量的亞硫酰氯，隨后再次加入無水四氫呋喃溶解反應(yīng)余留物，加入cis-1， 2- (3，4，4'，5-四甲氧基-3' -氨基）二苯乙稀(考布他汀類似物；Combretastatin A-4 analogue)，室溫反應(yīng)過夜，柱層析分離純化后，得到考布他汀類似物酰胺化前藥（2f)。 考布他汀類似物酰胺化前藥（2f)溶于干燥乙腈中，在冰水浴條件下，滴加三甲基溴硅烷，用 薄板層析（TCL)跟蹤反應(yīng)完全后，加入甲醇鈉/甲醇溶液，室溫攪拌下，出現(xiàn)大量沉淀時， 加入丙酮，攪拌過夜至沉淀完全，得考布他汀類似物水溶性前-前藥2g，該方法的合成路線 為.
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案： 一種的考布他汀類似物的水溶性前-前藥，其特征在于其結(jié)構(gòu)式如下：
[0007] -種制備上述的考布他汀類似物的水溶性前-前藥的方法，其特征在于該方法的 具體步驟為： a. 將3，5-二甲基苯酚與異戊烯酸甲酯按1:1. 1~1:1.5的摩爾比溶于甲基磺酸中， 攪拌下回流反應(yīng)至TLC跟蹤反應(yīng)結(jié)束；將反應(yīng)液用水稀釋，用乙酸乙酯萃取，有機層用質(zhì)量 百分比濃度為5%的NaHCCV冼滌，再用飽和NaCl溶液洗滌，無水MgSO 4干燥，過濾，濾液旋 轉(zhuǎn)蒸發(fā)，再經(jīng)提純得黃色固體，即為4，4，5，7-四甲基-3，4-二氫香豆素，其結(jié)構(gòu)式為：
b. 在惰性氣氛保護下，將步驟a所得4，4，5，7-四甲基-3，4-二氫香豆素在氫化 鋁鋰無水四氫呋喃作溶劑的鑾仳下不庖成·?-〇，-羥基-4，，6，-二甲基苯基）-3，
3-二甲基丙醇，其結(jié)構(gòu)式爻 c. 在惰性氣氛下，將步驟b所得3_ (2' -羥基_4'，6' -二甲基苯基）_3，3_二 甲基丙醇和保護試劑叔丁基二甲基氯硅烷按1:1. 1~1:1. 5的摩爾比溶于二氯甲烷，在縛 酸劑三乙胺的作用下，攪拌反應(yīng)至TLC跟蹤反應(yīng)結(jié)束；反應(yīng)液過濾，濾液旋干后，用二氯甲 烷溶解，水洗滌，有機相用無水MgSO 4干燥，過濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，經(jīng)分離提純得到1-0-叔 丁基二甲基硅基_3-(2' -羥基-4'，6' -二甲基苯基）-3,3_二甲基丙醇，其結(jié)構(gòu)式為：
d. 將步驟c所得1-0-叔丁基二甲基硅基_3-(2' -羥基-4'，6' -二甲基苯 基）-3, 3-二甲基丙醇和叔丁醇鉀按1:1. 1~1:1.5的摩爾比溶于四氫呋喃中，回流至 反應(yīng)液由藍色變?yōu)辄S色；再加入焦磷酸四芐酯，繼續(xù)攪拌回流反應(yīng)至TLC跟蹤反應(yīng)結(jié) 束；冷至室溫后加入石油醚，過濾，濾液去除溶劑，經(jīng)分離提純得到l-o-叔丁基二甲基硅 基-3-[2'-氧代(二芐基磷酸酯基)-4'，6' -二甲基苯基]-3，3-二甲基丙醇，其結(jié)構(gòu)式 為
1 ;所述的焦磷酸四芐酯與1-0-叔丁基二甲基硅基-3-(2'_羥 基-4'，6' -二甲基苯基）-3, 3-二甲基丙醇的摩爾比為：1:1. 1~1:1.5 ; e. 在冰水浴中，將步驟d所得1-0-叔丁基二甲基硅基-3-(2'_羥基-4'，6'-二甲 基苯基）-3, 3-二甲基丙醇和氟化鉀按1:4~1:7的摩爾比溶于丙酮中，在緩慢滴加催化劑 用量的Jones試劑，繼續(xù)攪拌反應(yīng)至TLC跟蹤反應(yīng)結(jié)束；向反應(yīng)液中滴加異丙醇至反應(yīng)液 由黃綠色變成土綠色，繼續(xù)攪拌至反應(yīng)液呈藍綠色；除去溶劑得深綠色固體，用乙酸乙酯溶 解，水洗，用乙酸乙酯萃取，有機相用飽和NaCl溶液洗，干燥，過濾，去除溶劑，再經(jīng)提純得 白色固體，即為3-[2' -氧代(二芐基磷酸基)-4'，6' -二甲基苯基]-3，3-二甲基丙酸， 其結(jié)構(gòu)式為
f. 將步驟e所得3-[2' -氧代(二芐基磷酸基）-4'，6' -二甲基苯基]-3，3-二甲 基丙酸和亞硫酰氯按1:2~1:5的摩爾比溶于四氫呋喃溶劑中，回流反應(yīng)4小時候