一種橄欖苦苷的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于天然植物提取技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種橄欖苦苷的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]橄欖苦苷是一種重要的苯酚類裂環(huán)烯醚萜苷，屬于植物多酚。裂環(huán)烯醚萜類化合物是環(huán)戊烷單萜衍生物中的一類化合物，一直被認(rèn)為是木樨欖屬植物化合物分類學(xué)上的標(biāo)記化合物，在多種天然產(chǎn)物生成途徑中顯得尤為重要。橄欖苦苷因含有多個酚羥基，所以具有極強(qiáng)的抗氧化能力，能減輕低密度脂蛋白的氧化程度，預(yù)防冠心病、動脈粥樣硬化的發(fā)生，也能舒緩血管平滑肌和降低血壓，并有很強(qiáng)的抗菌抗病毒的效果。橄欖苦苷還多用于護(hù)膚品中保持肌膚的彈性和柔嫩，防止老化現(xiàn)象，重現(xiàn)肌膚的光滑，抵御由氧化導(dǎo)致的肌膚破壞，國外已有很多知名化妝品中均有添加。
[0003]目前國內(nèi)研宄橄欖苦苷提取方面的報道較少，主要集中在從植物小葉丁香中提取橄欖苦苷，提取方法多為有機(jī)溶劑萃取。國內(nèi)工業(yè)化生產(chǎn)，主要是利用木犀欖屬植物油橄欖葉，采用傳統(tǒng)水提醇沉得到苦苷粗制品。由于物種和環(huán)境的差異，橄欖葉中橄欖苦苷含量相差較大，加上傳統(tǒng)提取工藝，有機(jī)溶劑消耗大，產(chǎn)品含量低，生產(chǎn)成本較高。
[0004]本發(fā)明采用超臨界萃取法提取、大孔吸附樹脂富集與高效逆流色譜分離純化相結(jié)合的方法制備橄欖苦苷。該方法溶劑用量少、提取率高，無污染，且工藝簡單、操作方便。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種橄欖苦苷的制備方法。
[0006]本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
(1)取油橄欖葉干燥、粉碎，置于萃取釜中，以總?cè)軇w積5%的乙醇為夾帶劑，設(shè)置萃取溫度為50~60°C，待溫度穩(wěn)定后通入CO2氣體，流量為20~30L/h，并調(diào)節(jié)壓力到30~40MPa，進(jìn)行萃取2~3h后，收集萃取物；
(2)將所得萃取物濃縮至無醇味，上大孔吸附樹脂，先用2~3BV的蒸餾水洗脫，再用2-3BV的20~30%的乙醇洗脫，后用4~6BV的70~80%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，得濃縮物；
(3)將濃縮物采用高速逆流色譜法分離純化，以氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng)，取上相做固定相、下相為流動相，主機(jī)轉(zhuǎn)速800-1000rpm，流速為3~4mL/min，收集目標(biāo)流分，回收試劑，真空干燥得產(chǎn)品。
[0007]步驟(2)中所述的大孔吸附樹脂類型為AB-8、D-101、XDA-1中的任意一種。
[0008]步驟(2)中所述的樹脂用量與原料的質(zhì)量比為1:1。
[0009]步驟(3)中所述的氯仿-甲醇-水體積比為10:5:7。
[0010]本發(fā)明的有益效果在于:采用超臨界流體提取，提取時間短、提取效率高，無毒、無味，廉價易得；采用大孔樹脂柱層析富集純化，可除去多種雜質(zhì)，減輕了后面工序的工作量；采用高速逆流色譜分離效果好，產(chǎn)品純度高。
【具體實(shí)施方式】
[0011]實(shí)施例1:
取油橄欖葉干燥、粉碎，置于萃取釜中，以總?cè)軇w積5%的乙醇為夾帶劑，設(shè)置萃取溫度為50°C，待溫度穩(wěn)定后通入CO2氣體，流量為20L/h，并調(diào)節(jié)壓力到30MPa，進(jìn)行萃取2h后，收集萃取物；將所得萃取物濃縮至無醇味，上與原料等質(zhì)量的AB-8大孔吸附樹脂，先用2BV的蒸餾水洗脫，再用2BV的20%的乙醇洗脫，后用4BV的70%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇味，得濃縮液；以氯仿-甲醇-水(10:5:7)為兩相溶劑系統(tǒng)，置于分液漏斗中混合均勻，取上相為固定相，下相為流動相，取上述濃縮物溶于流動相中備用，開啟高速逆流色譜儀，設(shè)定流動相流速為3mL/min，同時開啟主機(jī)電機(jī)，自流動相流出時開始進(jìn)樣，轉(zhuǎn)速控制為800rpm，通過檢測器收集橄欖苦苷流分，濃縮并干燥得橄欖苦苷，高效液相檢測含量為88.9%。
[0012]實(shí)施例2:
取油橄欖葉干燥、粉碎，置于萃取釜中，以總?cè)軇w積5%的乙醇為夾帶劑，設(shè)置萃取溫度為60°C，待溫度穩(wěn)定后通入CO2氣體，流量為25L/h，并調(diào)節(jié)壓力到35MPa，進(jìn)行萃取3h后，收集萃取物；將所得萃取物濃縮至無醇味，上與原料等質(zhì)量的XDA-1大孔吸附樹脂，先用3BV的蒸餾水洗脫，再用3BV的25%的乙醇洗脫，后用5BV的75%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇味，得濃縮液；以氯仿-甲醇-水(10:5:7)為兩相溶劑系統(tǒng)，置于分液漏斗中混合均勻，取上相為固定相，下相為流動相，取上述濃縮物溶于流動相中備用，開啟高速逆流色譜儀，設(shè)定流動相流速為3.5mL/min,同時開啟主機(jī)電機(jī)，自流動相流出時開始進(jìn)樣，轉(zhuǎn)速控制為lOOOrpm，通過檢測器收集橄欖苦苷流分，濃縮并干燥得橄欖苦苷，高效液相檢測含量為92.3%。
[0013]實(shí)施例3:
取油橄欖葉干燥、粉碎，置于萃取釜中，以總?cè)軇w積5%的乙醇為夾帶劑，設(shè)置萃取溫度為55°C，待溫度穩(wěn)定后通入CO2氣體，流量為30L/h，并調(diào)節(jié)壓力到40MPa，進(jìn)行萃取3h后，收集萃取物；將所得萃取物濃縮至無醇味，上與原料等質(zhì)量的D-101大孔吸附樹脂，先用3BV的蒸餾水洗脫，再用3BV的30%的乙醇洗脫，后用6BV的80%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇味，得濃縮液；以氯仿-甲醇-水(10:5:7)為兩相溶劑系統(tǒng)，置于分液漏斗中混合均勻，取上相為固定相，下相為流動相，取上述濃縮物溶于流動相中備用，開啟高速逆流色譜儀，設(shè)定流動相流速為4mL/min，同時開啟主機(jī)電機(jī)，自流動相流出時開始進(jìn)樣，轉(zhuǎn)速控制為900rpm，通過檢測器收集橄欖苦苷流分，濃縮并干燥得橄欖苦苷，高效液相檢測含量為87.4%。
【主權(quán)項】
1.一種橄欖苦苷的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)取油橄欖葉干燥、粉碎，置于萃取釜中，以總?cè)軇w積5%的乙醇為夾帶劑，設(shè)置萃取溫度為50~60°C，待溫度穩(wěn)定后通入CO2氣體，流量為20~30L/h，并調(diào)節(jié)壓力到30~40MPa，進(jìn)行萃取2~3h后，收集萃取物； (2)將所得萃取物濃縮至無醇味，上大孔吸附樹脂，先用2~3BV的蒸餾水洗脫，再用2-3BV的20~30%的乙醇洗脫，后用4~6BV的70~80%的乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，得濃縮物； (3)將濃縮物采用高速逆流色譜法分離純化，以氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng)，取上相做固定相、下相為流動相，主機(jī)轉(zhuǎn)速800-1000rpm，流速為3~4mL/min，收集目標(biāo)流分，回收試劑，真空干燥得產(chǎn)品。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種橄欖苦苷的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的大孔吸附樹脂類型為AB-8、D-101、XDA-1中的任意一種。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種橄欖苦苷的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的樹脂用量與原料的質(zhì)量比為1:1。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種橄欖苦苷的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述的氯仿-甲醇-水體積比為10:5:7。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種橄欖苦苷的制備方法，其步驟如下：1）取油橄欖葉干燥、粉碎，置于萃取釜中，以總?cè)軇w積5%的乙醇為夾帶劑，設(shè)置萃取溫度為50~60℃，待溫度穩(wěn)定后通入CO2氣體，流量為20~30L/h，并調(diào)節(jié)壓力到30~40MPa，進(jìn)行萃取2~3h后，收集萃取物；2）將所得萃取物濃縮至無醇味，上大孔吸附樹脂，乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至無醇味，得濃縮物；3）將濃縮物進(jìn)行高效逆流色譜分離，得高含量橄欖苦苷。本發(fā)明方法樣品損耗少，分離效果好，成本低廉，能得到含量高、品質(zhì)好的橄欖苦苷。
【IPC分類】C07H17/04, C07H1/08
【公開號】CN104910223
【申請?zhí)枴緾N201510270831
【發(fā)明人】劉東鋒, 楊成東
【申請人】南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2015年9月16日
【申請日】2015年5月26日