一種白楊素的提取工藝的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種白楊素的提取技術(shù)，特別是涉及一種生物酶解輔助超聲醇提的方法提取天然植物中的有效成分，以及應(yīng)用超臨界流體結(jié)晶技術(shù)對白楊素的精制，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]白楊素又稱白楊黃素，英文名稱:Chrysin，分子式:C15HltlO4，分子量:254，CAS NO:480-40-0ο淡黃色棱柱形結(jié)晶(由甲醇中結(jié)晶)，熔點(diǎn)285°C，溶于氫氧化鈉溶液，微溶于乙醚、乙醇和氯仿，不溶于水。存在于紫葳科植物木蝴蝶[Oroxylum indicum(L.) Vent.]的種子、莖皮，松科植物山白松(Pinus mon-ticola Dougl.)的心木，芒松(P.aristataEngelm.)的心木等。對某些癌細(xì)胞有毒害作用。經(jīng)現(xiàn)代研宄證明，白楊素能抗癌、降血脂、防心腦血管疾病、抗菌、消炎等。
[0003]超臨界流體結(jié)晶技術(shù):超臨界流體是指尚于流體臨界點(diǎn)，以單相形式存在的流體，其物理化學(xué)性質(zhì)與非臨界狀態(tài)液體和氣體有很大的不同。由于密度是溶解能力、粘度大小是流體的阻力、擴(kuò)散系數(shù)是傳質(zhì)速率高低的主要參數(shù)，素以流體的特殊物理性質(zhì)決定了超臨界流體結(jié)晶技術(shù)的一系列重要特點(diǎn)。超臨界流體的擴(kuò)散系數(shù)比液體要大得多，粘度類似于氣體，遠(yuǎn)小于液體，有比液體快得多的溶解溶質(zhì)和攜帶能力，這對傳質(zhì)極為有利，縮短了相平衡所需的時(shí)間，是高效傳質(zhì)的理想介質(zhì)。它具有不同尋常的巨大壓縮性，通過簡單的減壓、升溫即會引起流體密度的很大變化，從而使其中的溶質(zhì)迅速地過飽和結(jié)晶析出，所以超臨界流體是一種優(yōu)良的結(jié)晶溶劑。而當(dāng)在超臨界流體中添加第二種、第三種有機(jī)溶劑后，還能在很大程度上使改性超臨界流體結(jié)晶的選擇性大大提高。而且，能夠方便地通過條件的控制獲取從亞微米級超細(xì)晶粒到常規(guī)大顆粒結(jié)晶，還可控制其粒度尺寸的分布。由于超臨界流體是一種介于氣相與液相之間的狀態(tài)，物質(zhì)結(jié)晶時(shí)避免了相的沖突，客服了表面張力的影響，固體微粒表面能不升高，因而生成的固體微粒不易發(fā)生聚集。超臨界流體結(jié)晶技術(shù)具備操作簡便、速度快、產(chǎn)率高、溶劑易徹底除去而無二次污染、少污染或不污染環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)。
[0004]目前，在我國關(guān)于提取白楊素公開的發(fā)明專利“一種制備白楊素的方法”(專利號201010549814.2 )中提取白楊素采取的工藝步驟為:取三葉海棠葉粉碎，加酸性水溶液拌濕，加入2-5%。生物酶酶解，酶解原料再加入5-10倍量80-90%乙醇溶液回流提取2_3次，提取液減壓回收乙醇至醇濃度20-40%，放置結(jié)晶，結(jié)晶物用乙醇溶解與聚酰胺拌樣，裝柱，乙醇溶液梯度洗脫，薄層檢測，收集高濃度流分，減壓濃縮，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物用90-99%乙醇回流溶解結(jié)晶，其所得產(chǎn)品純度低，溶劑消耗量大，生產(chǎn)成本高，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]白楊素又稱白楊黃素，英文名稱:Chrysin，分子式:C15H1(i04，分子量:254，CAS NO:480-40-0ο淡黃色棱柱形結(jié)晶(由甲醇中結(jié)晶)，熔點(diǎn)285°C，溶于氫氧化鈉溶液，微溶于乙醚、乙醇和氯仿，不溶于水。存在于紫葳科植物木蝴蝶[Oroxylum indicum(L.) Vent.]的種子、莖皮，松科植物山白松(Pinus mon-ticola Dougl.)的心木，芒松(P.aristataEngelm.)的心木等。對某些癌細(xì)胞有毒害作用。經(jīng)現(xiàn)代研宄證明，白楊素能抗癌、降血脂、防心腦血管疾病、抗菌、消炎等。
[0006]超臨界流體結(jié)晶技術(shù):超臨界流體是指尚于流體臨界點(diǎn)，以單相形式存在的流體，其物理化學(xué)性質(zhì)與非臨界狀態(tài)液體和氣體有很大的不同。由于密度是溶解能力、粘度大小是流體的阻力、擴(kuò)散系數(shù)是傳質(zhì)速率高低的主要參數(shù)，素以流體的特殊物理性質(zhì)決定了超臨界流體結(jié)晶技術(shù)的一系列重要特點(diǎn)。超臨界流體的擴(kuò)散系數(shù)比液體要大得多，粘度類似于氣體，遠(yuǎn)小于液體，有比液體快得多的溶解溶質(zhì)和攜帶能力，這對傳質(zhì)極為有利，縮短了相平衡所需的時(shí)間，是高效傳質(zhì)的理想介質(zhì)。它具有不同尋常的巨大壓縮性，通過簡單的減壓、升溫即會引起流體密度的很大變化，從而使其中的溶質(zhì)迅速地過飽和結(jié)晶析出，所以超臨界流體是一種優(yōu)良的結(jié)晶溶劑。而當(dāng)在超臨界流體中添加第二種、第三種有機(jī)溶劑后，還能在很大程度上使改性超臨界流體結(jié)晶的選擇性大大提高。而且，能夠方便地通過條件的控制獲取從亞微米級超細(xì)晶粒到常規(guī)大顆粒結(jié)晶，還可控制其粒度尺寸的分布。由于超臨界流體是一種介于氣相與液相之間的狀態(tài)，物質(zhì)結(jié)晶時(shí)避免了相的沖突，客服了表面張力的影響，固體微粒表面能不升高，因而生成的固體微粒不易發(fā)生聚集。超臨界流體結(jié)晶技術(shù)具備操作簡便、速度快、產(chǎn)率高、溶劑易徹底除去而無二次污染、少污染或不污染環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)。
[0007]目前，在我國關(guān)于提取白楊素公開的發(fā)明專利“一種制備白楊素的方法”(專利號201010549814.2 )中提取白楊素采取的工藝步驟為:取三葉海棠葉粉碎，加酸性水溶液拌濕，加入2-5%。生物酶酶解，酶解原料再加入5-10倍量80-90%乙醇溶液回流提取2_3次，提取液減壓回收乙醇至醇濃度20-40%，放置結(jié)晶，結(jié)晶物用乙醇溶解與聚酰胺拌樣，裝柱，乙醇溶液梯度洗脫，薄層檢測，收集高濃度流分，減壓濃縮，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物用90-99%乙醇回流溶解結(jié)晶，其所得產(chǎn)品純度低，溶劑消耗量大，生產(chǎn)成本高，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種白楊素的提取工藝，其特征在于采用以下步驟: (O原材料的處理:將新鮮原材料放在溫度為60-80°C的烘箱中干燥，粉碎過20-60目篩，收集粗粉備用； (2)酶解:稱取一定量的粗粉置于提取器中，加入粗粉重量0.19^0.5%的生物酶，并同時(shí)加入料液比為1:3~5的乙醇，在pH值4~5，溫度為45~50°C的條件下酶解l~2h ； (3)超聲提取:酶解完成后，將提取器中的物料在溫度為40~60°C的條件下超聲提取30~50min，過濾，收集提取液減壓濃縮成浸膏； (4)精制:將所得浸膏加水溶解，并將溶解液上大孔吸附樹脂柱，先用3~5倍柱體積的蒸餾水洗脫，再用3~5倍柱體積、10%的乙醇溶液洗脫，最后用3~8倍柱體積、60%~80%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液； (5)超臨界流體結(jié)晶:將洗脫液通過溶液泵以高壓狀態(tài)急速噴入結(jié)晶釜內(nèi)，流速為20~200ml/min，在結(jié)晶釜底部收集析出的白楊素晶體。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種白楊素的提取工藝，其特征在于:步驟I)中所述的原材料為木蝴蝶的種子、莖皮，山白松的心木，芒松的心木，三葉海棠葉等中的一種或兩種。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種白楊素的提取工藝，其特征在于:步驟2)中所述的生物酶為果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶中的一種或兩種以上的混合物。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種白楊素的提取工藝，其特征在于:步驟3)中所述的超聲提取頻率為20~40KHz。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種白楊素的提取工藝，其特征在于:步驟4)中所述的大孔吸附樹脂為 X-5、AB-8、NK-2、NKA-2、NK-9、D3520、DlOUffLD 中的一種。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種白楊素的提取工藝，其特征在于:步驟5)中所述結(jié)晶釜工作壓力為10~20MPa，溫度為30~50°C，結(jié)晶時(shí)間為30~150min。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種白楊素的提取工藝，具體涉及一種生物酶解輔助超聲醇提的方法。其處理步驟為：原材料的處理→酶解→超聲提取→精制→超臨界流體結(jié)晶，即得白楊素成品。本發(fā)明工藝簡單，提取效率高，節(jié)約能源，成本低，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
【IPC分類】C07D311/30
【公開號】CN104926771
【申請?zhí)枴緾N201510263706
【發(fā)明人】劉東鋒, 楊成東
【申請人】南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年5月22日