一種雙核銅(ii)–唑來(lái)膦酸配合物及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及唑來(lái)膦酸配合物，具體涉及一種雙核銅（II)-唑來(lái)膦酸配合物及應(yīng) 用。
【背景技術(shù)】
[0002] 唑來(lái)膦酸（Zoledronic Acid)為新一代的雙膦酸類(lèi)藥物，是破骨細(xì)胞前體的高強(qiáng) 度骨吸收抑制劑，唑來(lái)膦酸及其衍生物表現(xiàn)出良好的骨靶向性，因?yàn)檫騺?lái)膦酸藥物含有膦 酸根上的氧原子及氨基端上的氮原子，均能與金屬離子等配位作用，即唑來(lái)膦酸藥物含有 多個(gè)配位點(diǎn)；如唑來(lái)膦酸可與順鉑、來(lái)曲唑、多西紫杉醇等抗腫瘤靶向藥物協(xié)同發(fā)揮抗腫瘤 作用，降低未發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的肺癌患者的復(fù)發(fā)率與骨轉(zhuǎn)移的發(fā)生率。如公開(kāi)號(hào)為CN102603812 的發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)，就公開(kāi)了雙核鉑（II)-唑來(lái)膦酸配合物，該唑來(lái)膦酸配合物以2個(gè)乙二 胺分子為螯合劑，使唑來(lái)膦酸與抗腫瘤作用的2個(gè)順鉑配位，形成雙核鉑-唑來(lái)膦酸配合 物，其具有優(yōu)異的骨靶向性，提高了順鉑的抗腫瘤性，降低了順鉑的毒副作用和耐藥性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種雙核銅（II)-唑來(lái)膦酸配合物及應(yīng)用， 其為一種新的唑來(lái)膦酸金屬配合物，其具有優(yōu)異的骨靶向功能和抗癌活性。
[0004] 本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為：一種雙核銅（II)-唑來(lái)膦酸 配合物，其化學(xué)式為Cu2(Cl) (H2O) (H2Zdn) (bipy)2 · 4H20,式中H2Zdn為唑來(lái)膦酸，bipy為 2, 2' -聯(lián)吡啶，其結(jié)構(gòu)式如下所示：
[0005]
[0006] 該雙核銅（II)-挫來(lái)膦酸配合物的晶胞參數(shù)如下：?? = 1〇.201(2)Α，ft= 11.235(2)A，c =18.435(4) A, α = 105.76(3)。，β = 96.63(3)。，γ = 105.69(3)。，為三斜晶系，ρ? 空間群。
[0007] 該雙核銅（II)-唑來(lái)膦酸配合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0008] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于一種雙核銅（II)-唑來(lái)膦酸配合物，其化學(xué) 式為 Cu2(Cl) (H2O) (H2zdn) (bipy)2 ·4Η20,式中 H2Zdn 為唑來(lái)膦酸根離子，bipy 為 2, 2' -聯(lián) 吡啶，此配合物具有特定的晶體結(jié)構(gòu)，不僅以唑來(lái)膦酸較高的骨親和力，能被快速傳遞至骨 代謝活躍部位，具有性能優(yōu)異的骨靶向功能和治療效果，又具有良好的抗癌活性，該銅配合 物晶體能夠與靶分子DNA結(jié)合，產(chǎn)生鏈內(nèi)或鏈間交聯(lián)，進(jìn)而干擾DNA正常復(fù)制，導(dǎo)致癌細(xì)胞 死亡，相比于順鉑有較低的毒副作用和耐藥性。
【附圖說(shuō)明】
[0009] 圖1為本發(fā)明雙核銅（II)-唑來(lái)膦酸配合物的單晶型晶體結(jié)構(gòu)圖。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 以下結(jié)合附圖、實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0011] 實(shí)施例1
[0012] 稱(chēng)取0. 145g(0. 5mmol) -水合挫來(lái)膦酸粉末，0. 171g(lmmol)二水合氯化銅， 0. 126g(Immol) 2, 2' -聯(lián)吡啶，不斷攪拌下，依次溶于9mL水與9mL乙醇的混合溶劑中，制 備得淺藍(lán)色懸濁液。隨后滴加 ImL (lmol/L)氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)混合液的pH為2. 5,懸濁液 大部分溶解，且顏色加深。攪拌30min后全部轉(zhuǎn)移到25mL帶有聚四氟乙烯內(nèi)襯的不銹鋼 水熱反應(yīng)釜內(nèi)，于160°C恒溫反應(yīng)72h。然后取出冷卻至室溫，經(jīng)過(guò)濾得藍(lán)色濾液，在室溫 下靜置培養(yǎng)，一周后析出大量深藍(lán)色塊狀晶體和少量綠色條狀晶體。過(guò)濾，干燥，手工挑選 出適合X射線(xiàn)分析的深藍(lán)色塊狀晶體即為本發(fā)明的雙核銅（II)-唑來(lái)膦酸配合物，其分 子式為 Cu2(Cl) (H2O) (H2zdn) (bipy)2 · 4H20,式中 H2Zdn 為唑來(lái)膦酸，bipy 為 2, 2' -聯(lián)P比 啶，其單晶型晶體結(jié)構(gòu)如圖1所示，產(chǎn)率：64%。該雙核銅（II)-唑來(lái)膦酸配合物的晶胞 參數(shù)如下：《 = 10.201(2) A，6 = 11.235(2) A, c = 18.435(4) A, α = 105. 76(3)。，β = 96.63(3)°，γ = 105.69(3)°，為三斜晶系，Ρ?空間群。
[0013] 實(shí)施例2
[0014] 人肺癌細(xì)胞株Α549(購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞生物學(xué)研宄所）用含10%新生胎牛 血清，lOOU/mL青霉素，lOOU/mL鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)基于37°C、5% CO2，飽和濕度條件 下培養(yǎng)。采用一種常用的檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法，即MTT法，檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制。將培 養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的肺癌細(xì)胞以10 X IO3Ail密度接種于96孔無(wú)菌培養(yǎng)板（每孔加200uL)， 置于37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。為防止邊緣細(xì)菌污染，周邊孔加200uL的滅菌水。過(guò)夜， 肺癌細(xì)胞完全貼壁后，設(shè)置五組測(cè)試組，分別加入IOOuL不同終濃度（10ug/mL為測(cè)試組1、 20ug/mL為測(cè)試組2、40ug/mL為測(cè)試組3、80ug/mL為測(cè)試組4、100ug/mL為測(cè)試組5)的實(shí) 施例1的雙核銅（II)-唑來(lái)膦酸配合物的溶液，對(duì)照組只加 IOOuL培養(yǎng)液不加藥物，每組 設(shè)置5個(gè)復(fù)孔。48h或72h后加入2ug/mL的MTT液（50uL/孔），放置5% CO2培養(yǎng)箱中繼 續(xù)培養(yǎng)3h。終止培養(yǎng)，選用檢測(cè)波長(zhǎng)為492nm，震蕩IOs的測(cè)試條件，用酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔OD 值（被檢測(cè)物吸收掉的光密度值）。記錄結(jié)果（該試驗(yàn)重復(fù)3次），綜合平均，得到不同濃 度的雙核銅（II)-唑來(lái)膦酸配合物對(duì)人肺癌細(xì)胞平均存活表；測(cè)試結(jié)果如下表1所示：
[0015] 表1 :不同濃度的雙核銅（II)-唑來(lái)膦酸配合物對(duì)人肺A549細(xì)胞存活表
[0016]
[0017] 測(cè)試結(jié)果處理與分析：采用Excel和Graphpad Prism5軟件計(jì)算雙核銅（II)-挫 來(lái)膦酸配合物的細(xì)胞存活率與半數(shù)抑制濃度（IC50)值，其對(duì)A549細(xì)胞作用48h和72h的 IC50值分別為21. 14±0. 68uM和12. 18±0. 20uM。從劑量依賴(lài)性看，該藥物在10 - IOOuM 系列濃度下對(duì)A549細(xì)胞抑制率隨濃度的增加而增大；從時(shí)間依賴(lài)性看，72h后產(chǎn)生的抑制 作用比48h產(chǎn)生的抑制作用強(qiáng)。說(shuō)明該配合物對(duì)人肺癌細(xì)胞具有明顯的抑制作用，在很小 的給藥劑量時(shí)就可達(dá)到不錯(cuò)的作用效果，是具有較好應(yīng)用前景的抗腫瘤藥物，也可以在制 備治療乳腺癌、腎癌、人骨肉瘤及其他原因?qū)е鹿切赞D(zhuǎn)移藥物中有潛在的應(yīng)用，在此不一一 列舉。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種雙核銅（II)-唑來(lái)膦酸配合物，其特征在于化學(xué)式為 Cu2(Cl) (H2O) (H2zdn) (bipy)2 ? 4H20,式中H2Zdn為唑來(lái)膦酸，bipy為 2, 2' -聯(lián)吡啶， 其結(jié)構(gòu)式如下所示：2. 如權(quán)利要求1所述的一種雙核銅（II) _唑來(lái)膦酸配合物，其特征在于該雙核銅 (II)-唑來(lái)膦酸配合物的晶胞參數(shù)如下：〇=10.20丨(2)A,kll.235(2)A,c= 18.435(4)A，a= 105.76(3)。，0 = 96.63(3)。，y= 105.69(3)。，為三斜晶系，Pl空間群。3. 權(quán)利要求1所述的一種雙核銅（II) _唑來(lái)膦酸配合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種雙核銅(II)–唑來(lái)膦酸配合物，其化學(xué)式為Cu2(Cl)(H2O)(H2zdn)(bipy)2·4H2O，式中H2zdn為唑來(lái)膦酸根離子，bipy為2,2’–聯(lián)吡啶，此配合物具有特定的晶體結(jié)構(gòu)，不僅以唑來(lái)膦酸較高的骨親和力，能被快速傳遞至骨代謝活躍部位，具有性能優(yōu)異的骨靶向功能和治療效果，又具有良好的抗癌活性，該銅配合物晶體能夠與靶分子DNA結(jié)合，產(chǎn)生鏈內(nèi)或鏈間交聯(lián)，進(jìn)而干擾DNA正常復(fù)制，導(dǎo)致癌細(xì)胞死亡，相比于順鉑有較低的毒副作用和耐藥性。
【IPC分類(lèi)】C07F9/6506, A61P35/00, C07F1/08, C07F9/6558
【公開(kāi)號(hào)】CN104961752
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510346405
【發(fā)明人】牛青君, 鄭岳青, 周細(xì)武, 朱紅林, 許偉
【申請(qǐng)人】寧波大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年10月7日
【申請(qǐng)日】2015年6月19日