一種利用鴨骨制備降血壓肽的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用鴨骨制備降血壓肽的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]降血壓肽(ACEIP)又稱(chēng)ACE抑制肽，是一類(lèi)具有顯著降血壓功效的多肽短鏈物質(zhì)，可競(jìng)爭(zhēng)性地與ACE結(jié)合達(dá)到降壓效果。
[0003]天然食品中的降血壓肽通常是由蛋白質(zhì)水解酶在溫和條件下水解蛋白質(zhì)而獲得的一類(lèi)多肽，具有降壓效果且無(wú)副作用。許多動(dòng)物、植物、微生物蛋白及發(fā)酵食品中都含有豐富的降血壓肽，目前已成功地從牛奶、魚(yú)、貝、雞蛋、大豆、清酒和酒柏、玉米、麥胚等食物中分離出了各種不同的ACE抑制肽。
[0004]鴨骨含有豐富的蛋白質(zhì)，其作為肉鴨加工副產(chǎn)品，長(zhǎng)期以來(lái)沒(méi)有引起人們的重視，利用鴨骨蛋白制備降壓肽至今還未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足之處，本發(fā)明提供一種成本低、效果好的利用鴨骨制備降血壓肽的方法。
[0006]本發(fā)明為達(dá)到以上目的，是通過(guò)這樣的技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的:提供一種利用鴨骨制備降血壓肽的方法，包括以下步驟:
(O取新鮮鴨骨，剔凈非骨骼成分，清洗，粉碎，高壓蒸煮4h，按質(zhì)量體積比1:1加入蒸餾水乳糜化處理制成鴨骨泥，冷藏備用；
(2)取一定量鴨骨泥，溶于4倍重量體積的去離子水，攪勻，加熱至90°C處理lOmin，冷卻至55°C?60°C ;調(diào)節(jié)PH5.5，加入木瓜蛋白酶，55°C?60°C酶解4?6h，將酶解反應(yīng)產(chǎn)物迅速升溫至85°C并保持此溫度10?15分鐘，再迅速冷卻至O?30°C以終止酶解反應(yīng)，調(diào)節(jié)pH值至7.0左右，8000r / min離心15min，獲得上清酶解液，4°C冷藏備用；
(3)活性炭用量為酶解液總重的5-30%，溫度55°C，攪拌脫色20-30min;再進(jìn)行粗濾處理后得粗濾酶解液；將粗濾酶解液在0.1?0.2Mpa的工作壓力和O?45°C的工作溫度下，采用截留分子質(zhì)量為3kD超濾膜進(jìn)行超濾處理，以除去大分子蛋白類(lèi)物質(zhì)，得超濾酶解液；再將超濾酶解液依次進(jìn)行真空濃縮、冷凍干燥，得降壓肽，_20°C保存。
[0007]以上所述的一種利用鴨骨制備降血壓肽的方法，其特征是:所述步驟(2)中木瓜蛋白酶是酶比活力1X 104u/g ;加酶量是酶底比8000u/g。
[0008]本發(fā)明的一種利用鴨骨制備取降血壓肽的方法，具有如下優(yōu)點(diǎn):
1.本發(fā)明所制備的降血壓肽是鴨骨經(jīng)生物酶水解而得，屬于天然提取物，具有天然、無(wú)毒、無(wú)污染、無(wú)殘留、無(wú)副作用、高效等特點(diǎn)，是一種新型的綠色降血壓藥物。
[0009]2.采用本發(fā)明方法制備的降血壓肽，具有分子量小、易吸收、不產(chǎn)生耐藥性，ACE抑制率達(dá)90%以上，高于降血壓藥尼莫地平和硝苯地平的ACE抑制率。
[0010]3.本發(fā)明所采用的原料來(lái)源廣泛，價(jià)格低廉，經(jīng)過(guò)本發(fā)明的技術(shù)轉(zhuǎn)化可以有效的提高鴨骨副產(chǎn)物的附加值，減少了直接排放的污染。
[0011 ] 4.本發(fā)明的產(chǎn)品可以作為藥品、保健食品、食品、食品添加劑、藥物增效劑等，工藝科學(xué)合理，操作簡(jiǎn)單，具有較強(qiáng)的工業(yè)實(shí)施性。
【具體實(shí)施方式】
[0012]—種利用鴨骨制備取降血壓肽的方法，其特征包括以下步驟:
(O取新鮮鴨骨，剔凈非骨骼成分，清洗，粉碎，高壓蒸煮4h，按質(zhì)量體積比1:1加入蒸餾水乳糜化處理制成鴨骨泥；
(2)取一定量鴨骨泥50kg，溶于200L的去離子水，攪勻，加熱至90°C處理lOmin，冷卻至55°C?60°C;調(diào)節(jié)PH5.5，加入400g木瓜蛋白酶(酶比活力1X 104u/g)，55°C?60°C酶解4?6h，將酶解反應(yīng)產(chǎn)物迅速升溫至85°C并保持此溫度10?15分鐘，再迅速冷卻至O?30°C以終止酶解反應(yīng)，調(diào)節(jié)pH值至7.0左右，8000r / min離心15min，獲得上清酶解液21OL ；
(3)酶解液中加入活性炭15kg，溫度55°C，攪拌脫色20-30min;再進(jìn)行粗濾處理后得粗濾酶解液；將粗濾酶解液在0.1?0.2Mpa的工作壓力和O?45°C的工作溫度下，采用截留分子質(zhì)量為3kD超濾膜進(jìn)行超濾處理，得超濾透過(guò)液；再將超濾透過(guò)液真空濃縮至15L，冷凍干燥，得降壓肽98g，_20°C保存。
[0013]經(jīng)檢測(cè)，本發(fā)明方法制得的降壓肽的分子量在2000_3000Da肽段占85%以上，其ACE抑制率達(dá)90%以上，高于降血壓藥尼莫地平和硝苯地平的ACE抑制率。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種利用鴨骨制備降血壓肽的方法，其特征是包括以下步驟: (O取新鮮鴨骨，剔凈非骨骼成分，清洗，粉碎，高壓蒸煮4h，按質(zhì)量體積比1:1加入蒸餾水乳糜化處理制成鴨骨泥，冷藏備用； (2)取一定量鴨骨泥，溶于4倍重量體積的去離子水，攪勻，加熱至90°C處理lOmin，冷卻至55°C?60°C ;調(diào)節(jié)PH5.5，加入木瓜蛋白酶，55°C?60°C酶解4?6h，將酶解反應(yīng)產(chǎn)物迅速升溫至85°C并保持此溫度10?15分鐘，再迅速冷卻至O?30°C以終止酶解反應(yīng)，調(diào)節(jié)pH值至7.0左右，8000r / min離心15min，獲得上清酶解液，4°C冷藏備用； (3)活性炭用量為酶解液總重的5-30%，溫度55°C，攪拌脫色20-30min;再進(jìn)行粗濾處理后得粗濾酶解液；將粗濾酶解液在0.1?0.2Mpa的工作壓力和O?45°C的工作溫度下，采用截留分子質(zhì)量為3kD超濾膜進(jìn)行超濾處理，以除去大分子蛋白類(lèi)物質(zhì)，得超濾酶解液；再將超濾酶解液依次進(jìn)行真空濃縮、冷凍干燥，得降壓肽，_20°C保存。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用鴨骨制備降血壓肽的方法，其特征是:所述步驟(2)中木瓜蛋白酶是酶比活力10\10411/^，加酶量是酶底比800011/8。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種利用鴨骨制備降血壓肽的方法，包括以下步驟：將鴨骨制成鴨骨泥，再將鴨骨泥加水蒸煮、除油脂、酶解、脫色、超濾、真空濃縮、凍干，即得降壓肽；所述木瓜蛋白酶的加酶量是酶底比8000U／g，在pH5.5、溫度55℃～？60℃條件下，酶解反應(yīng)時(shí)間4？～6h。本發(fā)明方法制得的降壓肽的分子量小于3000Da，ACE抑制率達(dá)90%以上，高于降血壓藥尼莫地平和硝苯地平的ACE抑制率。
【IPC分類(lèi)】C12P21/06
【公開(kāi)號(hào)】CN105002250
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510499213
【發(fā)明人】寧成勇, 寧發(fā)子, 張娜
【申請(qǐng)人】重慶都好生物科技有限公司
【公開(kāi)日】2015年10月28日
【申請(qǐng)日】2015年8月14日