8. 0Hz, 1H), 6. 57 (d,J= 2. 3Hz, 1H), 6. 36 (dd,J= 2. 3Hz, 1H),5. 94 (s, 1H),4. 77 (s, 2H),4. 07 (d,J= 5. 3Hz, 2H),3. 83 (s, 4H)〇ESI-MS：m/z 311([M+H]+)。HPLC純度：95%。
[0495]步驟3 :制備5_ {2_甲基_5_「3_脈基1 -辛氨，基} _1H_P比略并「2, 3_blP比口足_2_截 酸甲醅的一般橾作方案。
[0496] 向5-(5-氨基-2-甲基-芐氨基）-lH_吡咯并[2, 3-b]吡啶-2-羧酸甲酯的溶液 加入異氰酸酯或異硫氰酸酯衍生物（1當量）。允許該混合物在室溫下攪拌過夜。除去溶 劑，并用硅膠色譜法純化粗產(chǎn)物。
[0497] 表1顯示根據(jù)以上方案14中所述的合成法合成的各種化合物。
[0498] 表1 _通過實施例A獲得的化合物
[0499]
[0500]
[0501]實施例B:1階段合成5-「2_甲基-5-(磺酰胺基）-芐氨基1-1H-吡咯并「2, 3-bl 吡啶-2-羧酸甲醅
[0502] 方案15表示從已經(jīng)在實施例A中描述的氨基衍生物開始，合成5-[2-甲基-5-(磺 酰胺基）_芐氨基]-1H-吡咯并[2, 3-b]吡啶-2-羧酸甲酯的一般方法。
[0503]
[0504] 方案15 -實施例B的一般合成方案
[0505]步驟1 :合成5_「2_甲基_5_(磺酰胺基）_芐氨基1-1H-吡咯并「2,3-bl吡 啶-2-羧酸甲醅
[0506] 將20yL三甲胺（1. 1當量）加至5-(5_氨基-2-甲基-芐氨基）-lH-吡咯并 [2, 3-b]吡啶-2-羧酸甲酯（40mg，0.13_〇1)的2mL無水DMF冷溶液中。然后滴加磺酰氯 衍生物（1. 2當量）的2mL無水DMF冷溶液。于0°C攪拌反應混合物30分鐘，且在室溫攪拌 過夜。蒸發(fā)DMF，然后加入飽和的NaHC03溶液。過濾所獲得的固體，用水洗滌，獲得黃色固 體。
[0507] 表2顯示根據(jù)以上所述的合成方案15合成的化合物。
[0508] 表2-通過實施例B獲得的化合物
[0509]
[0510]實施例C:1階段合成5-12-甲基-5-「3-酰胺基1-芐氨基丨-1H-吡咯并「2, 3-bl 吡啶-2-羧酸甲醅
[0511] 方案16表不1個步驟合成5-{2-甲基_5_[3-酰胺基]-節(jié)氨基} -1H-吡略并 [2, 3-b]吡啶-2-羧酸甲酯的一般方法。該步驟包含5-(5-氨基-2-甲基-芐氨基）-1H-吡 咯并[2, 3-b]吡啶-2-羧酸甲酯與酰氯或羧酸反應。
[0512]
[0513] 方案16-實施例C的一般合成方案
[0514]詵煩1 :通討酰氯的反應，合成5-12-甲基-5-「3_酰胺基1-芐氨基丨-1H-吡咯并 「2, 3-bl吡啶-2-羧酸甲酉3
[0515] 將55yL的三甲胺（3當量）和1.5當量的酰氯加至5-(5_氨基-2-甲基-芐氨 基）-lH-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-羧酸甲酯（40mg，0. 13mmol)的無水DMF溶液中。于室溫 攪拌反應混合物過夜。蒸發(fā)DMF;將固體吸收于乙酸乙酯中。用飽和NaHCCV^液洗滌有機 層，經(jīng)Na2S04干燥，且減壓下蒸發(fā)，獲得黃色固體狀物。
[0516] 表3顯示根據(jù)上述合成方案16,用選項1合成的化合物（即，酰氯的反應）。
[0517] 表3 -通過實施例C利用酰氯獲得的化合物
[0518]
[0519]
[0520]詵煩2 :通討羧酸的反應合成5-12-甲基-5_「3-酰胺基1-芐氨基丨-1H-吡咯并 「2, 3-bl吡啶-2-羧酸甲酉3
[0521] 該合成反應中涉及的所有羧酸均不是市售可得的。首先描述這些所需的羧酸的合 成方法：
[0522]4-氨甲基-3-取代的苯甲酸的合成
[0523] 方案17表示合成4-氨甲基-3-取代的苯甲酸的一般方法。
[05?41
[0525]方案17
[0526]醅化反應的一般稈序:
[0527] 攪拌含有職04(0 . 260mL，4. 8mmol)的甲醇（50mL)中的4-甲基-3-取代的苯甲酸 (24mmol)，并加熱至回流持續(xù)一夜。蒸發(fā)甲醇，在pH= 7用EtOAc萃取產(chǎn)物。
[0528]4-甲基-3-三氟,甲基-苯甲酸甲酯
[0529]產(chǎn)率=95 %。4NMR(300MHz，CDC13)S 8.25(s，1H)，8.04(dd，J = 1. 2, 8. 0, 1H)，7. 33 (d，J= 8. 0, 1H)，3. 91 (s，3H)，2. 51 (d，J= 1. 5, 3H)。
[0530]4-甲基-3-氟基-苯甲酸甲醅
[0531]產(chǎn)率=83% (4. 0g)，HPLC:98%，ESI-MS: [M+H] + = 169Da。
[0532]溴化反應的一般稈序:
[0533] 攪拌含有NBS(3.9g，22mmol)的CCl4(40mL)中的4-甲基-3-取代的苯甲酸甲酯 (18.3臟〇1)和含有25%水的過氧化苯甲酰（0.55 8，1.7臟〇16)，然后加熱至回流持續(xù)6小 時。蒸發(fā)溶劑，加入K2C03水溶液，用EtOAc萃取產(chǎn)物以獲得淡黃色固體。
[0534]4_(溴甲基）-3_(三氟甲基）苯甲酸甲醅
[0535] 產(chǎn)率=140%(粗產(chǎn)物）。
[0536]4_(溴甲基）_3_氟苯甲酸甲醅
[0537]產(chǎn)率=定量（5. 9g)，ESI-MS: [M+H] + = 247Da。
[0538]在溴甲基h.親核取代的一般稈序:
[0539] 攪拌含有1(20)3(1.5當量）的乙腈（5mL)中的4_(溴甲基）_3_取代的苯甲酸甲 酯（200mg)和胺衍生物（1.05當量），且在氬氣下加熱至回流過夜。蒸發(fā)乙腈，并加入水 (30mL)，用AcOEt萃取產(chǎn)物。用水洗滌有機層，干燥、過濾并濃縮。通過硅膠色譜法進行進 一步的純化，獲得所預期的產(chǎn)物。
[0540]4_(4_甲基哌嗪-1-基甲基）_3_三氟甲基-苯甲酸甲醅:
[0541]產(chǎn)率=54%(1. 75g)。4NMR(300MHz，CDC13)S8. 28(s，1H)，8. 16(d，J = 8. 1，1H)，7. 91 (d，J= 8. 1，1H)，3. 93 (s，3H)，3. 70 (s，2H)，2. 53 (s，8H)，2. 32 (s，3H)。 ESI-MS：[M+H]+= 317Da〇
[0542]3-氟基-4_(4-甲基哌嗪-1-基甲基）_苯甲酸甲醅:
[0543]產(chǎn)率=49%(1.48g)。HPLC:88%，ESI-MS:[M+H] + =267Da。
[0544]4-(4-甲氣羰基-2-三氟甲基-芐基）_哌嗪-1-羧酸叔丁醅
[0545]產(chǎn)率：56% (1. 89g)。HPLC:97%。ESI-MS:[M+H]+= 403Da。
[0546]4-嗎琳-4-基甲基-3-三氟甲基-苯甲酸甲酯
[0547] 產(chǎn)率：23% (343mg)。HPLC:95%。ESI-MS:[M+H]+= 305Da。
[0548] 4-(4_羥基-哌啶-1-基甲基）-3_三氟甲基-苯甲酸甲醅
[0549] 產(chǎn)率：39% (84mg)。ESI-MS: [M+H]+= 318.IDa。
[0550] 4-!T2-(4-甲基-哌嗪-1-基）_乙氨基1-甲基丨-3-三氟甲基-苯甲酸甲醅
[0551] 產(chǎn)率：20% (50mg)。ESI-MS: [M+H]+= 360.IDa。
[0552] 4_(4_甲基-咪P坐_1_基甲基）_3_三氟甲基-苯甲酸甲酯
[0553] 產(chǎn)率：44% (90mg)。HPLC:87%ESI-MS: [M+H] + = 299Da。
[0554] 4-(3-二甲氨基-吡咯烷-1-基甲基）-3-氟-苯甲酸甲醅
[0555] 產(chǎn)率：60% (2g)。HPLC:85%ESI-MS:[M+H] + = 281Da。
[0556] 皂化反應的一般稈序:
[0557] 將酯衍生物溶解于THF(0. 8mol/L)中，并加入LiOH(3當量）的水溶液。將混合物 加熱至回流持續(xù)4小時。蒸發(fā)THF，并于pH= 12用EtOAc萃取雜質。用NaCl(w+)飽和水 層，并用HC1 6N酸化直到pH= 3。用丁 -1-醇萃取產(chǎn)物。蒸發(fā)丁 -1-醇，并用EtOAc洗滌 所獲得的固體以除去鹽和雜質。獲得白色固體。
[0558] 4_(4_甲基哌嗪-1-基甲基）_3_三氟甲基-苯甲酸:
[0559] 產(chǎn)率=100%(1.218)。111匪1?(3001抱，0150-(16)5 10.44(111，111)，8.19(8，111)，8. 18 (m，1H)，7. 93 (m，1H)，3. 79 (s，2H)，2. 75 (s，3H)。ESI-MS: [M+H] += 303Da。
[0560] 3-氟基-4_(4-甲基哌嗪-1-基甲基）_苯甲酸:
[0561] 產(chǎn)率=65% (0? 91g)。HPLC:>99%，ESI-MS:[M+H] + = 253Da。
[0562] 4- (4-羧基-2-三氟甲基-芐基）-哌嗪-1-羧酸
[0563] 產(chǎn)率：57% (265mg)。HPLC:97%ESI-MS:[M+H] + = 389Da。
[0564] 4-嗎啉-4-基甲基-3-三氟甲基-苯甲酸
[0565] 產(chǎn)率：35% (114mg)。ESI-MS: [M+H]+= 290Da。
[0566] 4-(4_羥基-哌啶-1-基甲基）-3_三氟甲基-苯甲酸
[0567] 產(chǎn)率：94% (128mg)。ESI-MS: [M+H]+= 304.IDa。
[0568] 4-!T2-(4-甲基-哌嗪-1-基）_乙氨基1-甲基丨-3-三氟甲基-苯甲酸
[0569] 產(chǎn)率：95% (176mg)。ESI-MS: [M+H]+= 346.IDa。
[0570] 4-(4_甲基-咪曄-1-基甲基）-3_三氟甲基-苯甲酸
[0571] 產(chǎn)率：99% (224mg)。ESI-MS: [M+H]+= 285Da。
[0572] 4-(3-二甲氨基-吡咯烷-1-基甲基）-3-氟基-苯甲酸
[0573] 產(chǎn)率：36% (687mg)。ESI-MS: [M+H]+= 267Da。
[0574] 3-氨甲基-5-三氟甲基-苯甲酸的合成
[0575] 方案18表示合成[3-氨基]-5-三氟甲基-苯甲酸的一般方法。
[0576]
[0577] 方案 18
[0578] 親核取代反應的一般程序：
[0579] 于145°C，攪拌3-氟-5-三氟甲基-苯甲腈（1當量）和對應的胺（3當量）在DMA 中的溶液3小時。加入NaCl(7WSift)。將產(chǎn)物吸收于乙酸乙酯中。用水洗滌有機層二次，然 后經(jīng)Na2S04干燥，并減壓下蒸發(fā)，得到黃色固體。
[0580] 3_(4_甲基-哌嗪-1-基）_5_三氟甲基-苯甲腈
[0581] 產(chǎn)率：定量。HPLC:94%ESI-MS:[M+H]+= 270Da。
[0582] 3-(1H-吡曄-3-基氨基）-5-三氟甲基-苯甲腈
[0583] 產(chǎn)率：83%。HPLC:92%ESI-MS:[M+H]+= 253Da。
[0584] 腈的水解反應的一般稈序:
[0585] 向腈衍生物的二氧六環(huán)（0? 13M)溶液中加入H20中的Na0H(10當量，lg/L)?；亓?下加熱混合物過夜。蒸發(fā)二氧六環(huán)后，用AcOEt洗滌水層，然后用HC1 2N酸化，用AcOEt萃 取。經(jīng)Na2S04干燥有機層，過濾并濃縮。
[0586] 3_(4_甲基-哌曝-1-基）_5_三氟甲基-苯甲酉$
[0587] 產(chǎn)率：60%。HPLC:100%。ESI-MS:[M+H] + = 289Da。
[0588] 3- (1H-吡曄-3-基氨基）-5-三氟甲基-苯甲酸
[0589] 黃色固體。產(chǎn)率：76% (85mg)。HPLC:100%。ESI-MS:[M+H]+= 272Da。
[0590] 3-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基）-5-三氟甲基-苯甲酸的合成
[0591] 方案19表示從3-甲基-5-三氟甲基-苯甲腈開始，3步合成3_(4_甲基-哌 嗪-1-基甲基）-5-三氟甲基-苯甲酸的一般方法。
[0592]
[0593] 方案 19
[0594] 3-溴甲基-5-三氟甲基-苯甲腈
[0595] 攪拌含有AIBN(0.017當量）的MeCN(0.42mol/L，l當量）中的3-甲基-5-三氟 甲基-苯甲腈，并在氬氣下于85°C加熱。每15分鐘加入0.25當量的NBS和0.005當量的 AIBN，加6次（每次的添加在50°C進行，然后再于85°C加熱混合物）。添加后，攪拌混合物 并保持在85°C持續(xù)2小時。減壓下蒸發(fā)MeCN，并用Et20洗滌固體，而溴化物衍生物在濾 液中。減壓下蒸發(fā)Et20,以得到粉紅色固體。直接將粗產(chǎn)物用于下一步。產(chǎn)率：沒有測定。 HPLC純度：沒有測定。ESI-MS:[M+H]+= 264Da。
[0596] 3-(4_甲基-哌嗪-1-基甲基）-5_三氟甲基-苯甲腈
[0597] 攪拌含有K2C03(2, 5當量）的MeCN(0. 17mol/L，1當量）中的3-溴甲基-5-三氟 甲基-苯甲腈和甲基哌嗪（1，5當量），并在氬氣下回流下加熱過夜。加入水。將產(chǎn)物吸收 于乙酸乙酯中。用Na2S04干燥有機層，并在減壓下蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物直接用于下一步。粗產(chǎn) 率：21%〇
[0598] 3_(4_甲基-哌嗪-1-基甲基）_5_三氟甲基-苯甲酸
[0599] 向3-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基）-5-三氟甲基-苯甲腈的二氧六環(huán)（0. 13M)溶 液中加入氏0中的Na0H(10當量，lg/L)?；亓飨录訜峄旌衔镞^夜。減壓下蒸發(fā)二氧六環(huán)，并 過濾在H20中的沉淀物，用H20洗滌?；厥諡V液，然后除去水，以得到白色固體。用MeOH洗 滌，并回收濾液，減壓下濃縮。在40g的硅膠上，用含有1 %呢一的CH2C12至含有1 %NEt3 的MeOH純化粗產(chǎn)物。減壓下濃縮回收的部分，用石油醚/AcOEt(1/1)的混合物洗滌獲得的 固體。產(chǎn)率：83%。HPLC純度：100%。ESI-MS:[M+H]+= 303Da。
[0600] 3-二甲氨基-5-三氟甲基-苯甲酸的合成
[0601] 合成3-二甲氨基-5-甲基-苯甲酸的一般方法以2步驟示于方案20中：
[0602]
[0603]方案 20
[0604]3-二甲氨基-5-三氟甲基-苯甲酸甲醅
[0605] 將K2C03 (400mg，3當量）和碘甲烷（0? 6mL，7當量）加至3-氨基-5-三氟甲基-苯 甲酸（200mg，0. 96mmol)的乙腈（8mL)溶液中?；亓飨录訜岱磻旌衔?天。溶劑蒸發(fā)后 得到230mg的粗產(chǎn)物3-二甲氨基-5-三氟甲基-苯甲酸甲酯，其未經(jīng)進一步純化而使用。
[0606]LC/MS：97%, [M+H] + = 248.lDa〇
[0607]3-二甲氨基-5-三氟甲基-苯甲酸
[0608] 向于3-二甲氨基-5-三氟甲基-苯甲酸甲酯（240mg)的THF(2mL)溶液中加入 LiOH(3當量）的水（2ml)溶液?；亓飨聰嚢杌旌衔?小時。然后蒸發(fā)THF;加入更多的水， 并用HC1 2N酸化。用AcOEt萃取產(chǎn)物，經(jīng)Na2S04干燥并濃縮，以得到白色固體。
[0609]產(chǎn)率：82% (183mg)，LC/MS:90%，[M+H] + = 234Da。
[0610]用于制備5-12-甲基-5-「3-酰胺基1-芐氨基丨-1H-吡咯并「2, 3-bl吡啶-2-羧 酸甲醅的一般橾作方案
[0611] 將酸衍生物溶解于含有DIEA(5當量）和HATU(2當量）的無水DMF(0.06mol/ L)中。15分鐘后，緩慢加入5-{2_甲基-5-[3-氨基]-芐氨基}-lH-吡咯并[2,3-b]吡 啶-2-羧酸甲酯，于室溫攪拌混合物12小時。蒸發(fā)DMF，并加入飽和NaHC03溶液。用EtOAc 萃取產(chǎn)物、干燥、過濾并蒸發(fā)，以獲得暗色混合物。通過用MeOH或EtOAc洗滌或通過二氧化 硅柱純化后，獲得呈淡黃色或橙色粉末狀的預期產(chǎn)物。
[0612] 表4顯示根據(jù)以上所述合成方案16,使用選項2 (S卩，羧酸的反應）合成的化合物。
[0613] 表4 -通過實施例C使用羧酸獲得的化合物
[0614]
[0615]
[0616]
[0617]
[0618]
[0619]

[0620]
[0621]
[0622] Luou」

[0624]
[0625]
[0626]
[0627]實施例D:從由OriBasePharma公司購得的試劑開始，3階段合成5_{5_「4_(4_甲 基-哌嗪-1-基甲基）-3_三氟甲基-苯甲酰胺基1-芐氨基丨-1H-吡咯并「2,3-b1吡 啶-2-羧酸甲醅
[0628] 方案21表示以3步合成5-{5-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基）-3-三氟甲基-苯 甲酰胺基]-芐氨基}-lH-吡咯并[2,3-b]吡啶-2-羧酸甲酯的一般方法。
[0629]
[0630] 方案21 _實施例D的一般合成方案
[0631] 步驟1 :制備5_(3_硝基-芐氨基）-lH_吡咯并「2, 3-bl吡啶-2-羧酸甲醅的一 般橾作方案
[0632] 在MeOH和Ac0H(10% )的混合物中攪拌5-氨基-1H-吡咯并[2, 3-b]吡啶-2-羧 酸甲酯（l〇〇mg)和硝基苯甲醛衍生物（1當量）2小時。然后緩慢加入NaBH3CN(2當量）， 并在氬氣下，于室溫攪拌混合物過夜。蒸發(fā)溶劑，并加入NaHC03的飽和溶液直至中性。用 EtOAc萃取水層。經(jīng)Na2S04干燥有機層，過濾并濃縮，得到預期的產(chǎn)物。
[0633] 5_(2_氯基-5-硝基-芐氨基）-lH_吡咯并「2, 3-bl吡啶-2-羧酸甲醅
[0634] 黃色粉末。產(chǎn)率：85% (158mg)。HPLC:80%。MS:361(M+1)。
[0635]5-(2-氟基-5-硝基-芐氨基）-lH_吡咯并「2, 3-bl吡啶-2-羧酸甲醅
[0636] 黃色固體。產(chǎn)率：74% (800mg)。HPLC:>99%。MS:345(M+1)。
[0637] 5-(3-硝基-4-甲基-芐氨基）-lH_吡咯并「2, 3-bl吡啶-2-羧酸甲醅
[0638] 黃色固體。產(chǎn)率：86% (152mg)。HPLC:85%。MS:341(M+1)。
[0639] 5-(3-硝基-芐氨基）-lH_吡咯并「2, 3-bl吡啶-2-羧酸甲醅
[0640] 棕色粉末。產(chǎn)率：87% (443mg)。HPLC:94%。MS:327(M+1)。
[0641] 步驟2 :制備5_(3_氨基-芐氨基）-lH_吡咯并「2, 3-bl吡啶-2-羧酸甲醅的一 般橾作方案
[0642] 將5_(硝基-芐氨基）-lH_吡咯并[2,3_b]吡啶-2-羧酸甲酯衍生物（200mg)、甲 醇（150mL)和10%鈀碳（10%w/w)置于填充有30bar氫氣的高壓反應器中，攪拌48小時。 在硅藻土上過濾混合物，用甲醇洗滌。蒸發(fā)溶劑，以得到預期的產(chǎn)物。
[0643] 5-(5-氨基-3-氯-芐氨基）-lH_吡咯并「2, 3-bl吡啶-2-羧酸甲醅
[0644] 黃色粉末。產(chǎn)率：99% (183mg)。HPLC:77%。MS:331(M+1)。
[0645] 5-(5-氨基-3-氟-芐氨基）-lH_吡咯并「2, 3-bl吡啶-2-羧酸甲醅
[0646]