一種姥鮫烷的合成方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于生物試劑領域，具體涉及一種姥鮫烷的合成方法。
【背景技術】
[0002]姥鮫烷是從姥鯊魚中提取出來的一種飽和萜類化合物，無色油狀液體。其作為一種免疫抑制劑，通過注射在老鼠體內，激發(fā)老鼠的自身免疫系統(tǒng)，在老鼠的腹水中獲得抗腫瘤的單克隆抗體。這種抗體的效價往往高于培養(yǎng)細胞上清液的100~1000倍。目前由姥鮫烷誘導產生的抗腫瘤的單克隆抗體，有希望用于臨床的抗腫瘤用途，具有非常強的應用前景。
[0003]由于姥鯊魚于2002年被華盛頓國際公約組織列為第二類保護動物。鑒于自然資源匱乏，而市場需求日益增加，所以迫切需要一項成熟的合成工藝解決市場的需求問題。
[0004]已公開的化學合成方法有以下兩種:
(I)如圖1所示，Ticam等于1969年公開了通過氧化斷裂葉綠醇得到醛，再經(jīng)甲基格氏反應、脫水反應、氫化反應得到姥鮫燒(Ticam, C.Jain, and Robert, J.Striha,Studies related to Bute Inlet wax.The identity of norphytane, pristane， andbute hydrocarbon, Canadian Journal of Chemistry.1969， 47， 4359-4361)0
[0005](2)如圖2所示，日本專利申請JP2007332105A公開了以法呢醇為起始原料，經(jīng)過二氧化錳氧化成醛，再經(jīng)異丁基格氏反應、脫水反應、高壓氫化反應得到姥鮫烷。
[0006]上述兩種合成方法雖然路線較短，但工藝化生產存在一些問題。每步產物都為極性相似的、高沸點油狀液體，分離提純困難；尤其是在脫水反應中，因關環(huán)、甲基迀移而產生的同分異構體副產物，分離純化相當困難。據(jù)報道，為了控制異構化的發(fā)生，從溫度控制、加料速度、投料量都進行了嚴格控制，操作也變得更加復雜，從而限制了規(guī)模化生產。最后的高壓氫化反應步驟涉及高壓反應釜等昂貴的設備，同時高壓的條件給整個生產安全帶來一定的安全隱患。

【發(fā)明內容】

[0007]本發(fā)明的目的在于降低成本，提高工藝安全性，解決原有合成方法中異構化導致的純化問題，適合工藝化的姥鮫烷合成方法。
[0008]本發(fā)明的姥鮫烷合成方法的技術方案如下:
一種姥鮫烷的合成方法，包括以下步驟:
a、氧化反應:采用異植物醇為原料，在催化劑A催化下，常溫常壓下反應2~10h，再加熱到40~100°C反應2~10h，經(jīng)分離提純，得到產物植酮，催化劑A為KMnO4、過氧酸、0s04、Ru02、Na14^H14、Pb (OAc) 4、CrO3、H2Cr2O7中的一種，催化劑A的加入量為相對異植物醇的1.5-8
摩爾當量；
b、甲基格氏反應:控制溫度在_30~10°C之間，將a步驟中的產物植酮與格式試劑B混合均勻，之后升溫到15~30°C反應0.5~8h，經(jīng)后處理，得到b步驟中間物，格式試劑B為MeMgBr、MeMg1、MeMgCl、LiMe、ZnMe2*的一種，格式試劑B的加入量為相對植酮的1_3摩爾
、r' 曰-
白里；
C、磺?；磻?控制溫度在-10~10°c之間，將b步驟中間物與磺?；噭〤混合，隨后升溫至15~25°C反應l~5h，經(jīng)后處理，得到C步驟中間物，磺?；噭〤為甲基磺酰氯、三氟甲磺酰氯、苯磺酰氯、對甲苯磺酰氯中的任意一種，磺酰化試劑D的加入量為相對b步驟中間物的1-3摩爾當量；
d、鹵代反應:將c步驟中間產物、與鹵鹽D攪拌混合，加熱到40~110°C反應10~20h，經(jīng)后處理，得到d步驟中間物，鹵鹽D為Cl、Br、I中的一種，鹵鹽D的加入量為相對c步驟中間物的1-6摩爾當量；
e、還原反應:控制溫度在_10~10°C之間，將d步驟中間物與還原劑E混合，隨后升溫至15~25°C反應10~20h，經(jīng)后處理，得到姥鮫烷，還原劑E為四氫鋁鋰、硼烷、氫氣、鋅粉、鐵粉、DIBAL-H、Red-Al, NaBH4, LiBH4, ZnBH#的一種，還原劑E的加入量為相對d步驟中間物的
1-3摩爾當量的；
所述的b步驟反應在惰性氣體保護中進行。
[0009]本發(fā)明中，步驟a中催化劑A優(yōu)選為KMnO4;
步驟b中格式試劑B為MeMgBr ；
步驟c中的磺酰化試劑C優(yōu)選甲基磺酰氯；
步驟d中的鹵鹽D優(yōu)選碘鹽，如KI ；
步驟e中的還原劑E優(yōu)選四氫鋁鋰。
[0010]本發(fā)明中，優(yōu)選地，所述步驟a的后處理為:過濾，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥提純；
優(yōu)選地，所述步驟b的后處理為:將反應液倒入冰水浴中，緩慢加入2mol/L的鹽酸，直到pH=6~7。用乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥，蒸餾回收溶劑，過柱，用PE:EA=100:1作為流動相，洗滌，回收溶劑，得到201g無色油狀液體；
優(yōu)選地，所述步驟c的后處理為:將反應液用乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥，干燥物直接用于后續(xù)反應；
優(yōu)選地，所述步驟d的后處理為:將反應物直接過濾，減壓蒸餾回收溶劑；
優(yōu)選地，所述步驟e的后處理為:將還原反應產物緩慢倒入冰水中，用鹽酸中和至pH為
2-3,乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥，過柱，石油醚作為流動相，得到無色液體。
[0011]本發(fā)明的有益效果在于:
我們通過自有的合成技術得到的姥鮫烷，效果等同于姥鮫魚提取物，有效地保護了匱乏的自然資源。通過以廉價的異植物醇為起始原料的合成路線，同已報道的用昂貴的合金歡醇為起始原料的合成方法相比，原料成本更低，避免了高壓反應所帶來的生產安全問題；成功解決了已報道合成方法中制約規(guī)?；?、工藝化生產的因素，即消除反應中的因環(huán)化、甲基迀移所形成的異構化產物，導致分離純化成本高，純化相當困難，操作更加復雜。本發(fā)明方法原料便宜，操作簡單，具有可重復性，且不需要購置昂貴的高壓設備；所有的溶劑做到了有效的回收利用，適合于工業(yè)化生產。
【附圖說明】
[0012]圖1、Ticam等人于1969年公開的通過葉綠醇制備姥鮫烷反應方程式；
圖2、Koichi等人于2007年公開的以法呢醇為起始原料制備姥鮫烷反應方程式；
圖3、本發(fā)明制備姥鮫烷反應方程式。
【具體實施方式】
[0013]以下以具體實施例來說明本發(fā)明的技術方案，但本發(fā)明的保護范圍不限于此。參見圖3:
實施例1
(I)氧化反應，植酮2的合成:
先將250g異植物醇1，2L丙酮，50ml乙酸，依次加入到5L的反應瓶中。緩慢分批、分批加入501g ΚΜη04。隨著反應時間的延長，慢慢有放熱現(xiàn)象，稍微用水循環(huán)冷卻，直到加料完畢，繼續(xù)反應5h，然后加熱60°C繼續(xù)反應5h，反應完畢，過濾，乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥。得到212g植酮2，收率:93%。
[0014]植酮2核磁譜圖為:
1HNMR (500MHz，CDCl3):2.42-2.38 (2H，t，CH2)，2.13 (3Η，s，CH3)，1.54-1.51 (3Η，m，CH)，1.26-1.25 (2H，m，CH2)，1.15-1.07 (16H，m，CH2)，0.88-0.84 (12H，m，CH3)。
[0015](2)甲基格氏反應，化合物3的合成:
將200g植酮2放入3L干燥的反應瓶中，抽真空，充入N2，加入1.5L的無水四氫呋喃，冷卻到-20 °C，緩慢滴加298ml的3mol/L的甲基格氏試劑MeMgBr，滴加完畢，自然升溫到室溫，繼續(xù)攪拌2h，TLC分析反應完畢，將反應液倒入冰水浴中，緩慢加入2mol/L的鹽酸，直到pH=6~7。用乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥，蒸餾回收溶劑，過柱，用PE:EA=100:1作為流動相，洗滌，回收溶劑，得到201g無色油狀液體化合物3。收率:95%，b.p.:3220C。
[0016]化合物3核磁譜圖為:
1HNMR (500M，CDCl3):1.72 (1H，s，0H)，1.53-1.50 (3H，m，CH)，1.42-1.25 (12H，m，CH2)，1.21 (6H，m，CH3)，1.13-1.07 (6H，m，CH2)，0.87-0.83 (12H，m，C