一種利用梔子制備共軛亞油酸的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及食品領(lǐng)域中共軛亞油酸的制備方法，具體涉及一種利用梔子制備共軛亞油酸的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]梔子為茜草科梔子屬常綠灌木，為我國傳統(tǒng)的大宗中藥材，屬衛(wèi)生部頒布的首批藥食兩用植物資源，也是退耕還林、防治水土流失的好樹種。梔子廣泛用于中藥配方，是150多種中成藥的原料，亦是化工、食品、飲料等領(lǐng)域的重要色素原料。梔子在我國種植面積達20多萬畝，盛產(chǎn)于江、浙、閩、贛、徽、湘等省山區(qū)，以江西、湖南兩省種植面積最大。
[0003]共軛亞油酸(Conjugated linoleic acid,以下簡稱CLA)是一類含有共軛雙鍵的十八碳二烯酸(亞油酸)異構(gòu)體混合物，主要存在于反芻動物的肉制品及乳制品中，在植物和海洋生物中含量極少。大量動物實驗證明CLA具有抗癌、抗動脈粥樣硬化、抑制脂肪堆積、增強機體免疫力等多種生理功能，已廣泛應用于醫(yī)藥、食品、保健品、化妝品等領(lǐng)域。天然產(chǎn)物中CLA含量極少，不足以滿足市場要求，所以開發(fā)低成本、高純度的共軛亞油酸具有重要的意義。
[0004]亞油酸是生產(chǎn)共軛亞油酸的原料，目前共軛亞油酸的制備主要集中于紅花油、葵花油、大豆油等富含亞油酸的植物油。梔子產(chǎn)果期長達二十幾年，果實的含油量與油料作物大豆相近，所含亞油酸占脂肪酸含量的71.8%，比一般食用油脂高。梔子原材料豐富，亞油酸含量可媲美紅花油，以梔子油為原料制備共軛亞油酸，亦可提高梔果加工的經(jīng)濟效益，增強企業(yè)的市場競爭能力，前景廣闊。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種利用梔子制備共軛亞油酸的方法。
[0006]本發(fā)明包括亞油酸制備和亞油酸共軛化兩個關(guān)鍵步驟。由于梔子油中的亞油酸是以亞油酸三甘油酯的形式存在，故采用酶解法制備亞油酸，亞油酸制備包括酶解、離心，然后采用堿式異構(gòu)法對亞油酸進行共軛化，包括異構(gòu)化、酸化和水洗。
[0007]本發(fā)明所述的一種利用梔子制備共軛亞油酸的方法，其特征在于該方法包括以下步驟:
1)亞油酸的制備
將粗提取的梔子油和PH=5~9的緩沖液或去離子水混合后，加入脂肪酶進行酶解，接著加入乙醇終止反應；將反應液離心，取上層液體，即得粗提取的亞油酸；所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液；所述脂肪酶為三?；视王；饷?；
2)亞油酸的共軛化
將溶媒與堿混合均勻后，加入上述亞油酸，在氮氣環(huán)境下加熱回流lh~4h ;所述溶媒為丙二醇；所述堿為氫氧化鈉；然后依次用酸酸化、用去離子水洗至中性、用無水硫酸鈉干燥，得到共軛亞油酸。
[0008]所述粗提取的梔子油是通過將干燥梔子果實粉碎過篩所得的梔子果粉與石油醚以質(zhì)量比1:10的比例混合后在50°c加熱回流2h或者在頻率為32KHZ的超聲波中超聲Ih得到的。
[0009]所述粗提取的梔子油與pH=5~9的緩沖液或去離子水的質(zhì)量比為1:0.25~1:4。
[0010]加入所述脂肪酶的質(zhì)量為粗提取的梔子油質(zhì)量的0.25%~7.5%。
[0011]所述酶解是在30~55°C的水浴中酶解l~7h。
[0012]所述離心是以500~4000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速離心5~10min。
[0013]所述步驟2)中堿與溶媒的質(zhì)量體積比為1:1~1: 6g/mL,堿與加入的粗提取的亞油酸的質(zhì)量體積比為3: 2~l:4g/mL。
[0014]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點:
1.本發(fā)明利用脂肪酶(三酰基甘油?；饷?酶解法處理梔子油制備亞油酸，與傳統(tǒng)皂化、酸洗制備亞油酸相比較，具有綠色環(huán)保，避免有毒溶劑的大量使用，成本低廉，反應條件溫和，副反應少等優(yōu)點。
[0015]2.本發(fā)明以梔子為原料制備共軛亞油酸，梔子種植面積大，原料成本低。
[0016]3.本發(fā)明工藝流程簡單，可操作性強，適合規(guī)?；a(chǎn)。
【具體實施方式】
[0017]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明。
[0018]實施例1
亞油酸的制備:將20g pH為7.5的磷酸鹽緩沖液、20g粗提取的梔子油和質(zhì)量為粗提取的梔子油質(zhì)量2.5%的三酰基甘油?；饷富旌暇鶆?，于30°C水浴中酶解3h，然后加入ImL乙醇終止反應。將反應液以500r/min的轉(zhuǎn)速離心lOmin，取上層液體，得到純度為38.21%的亞油酸。
[0019]共軛亞油酸的制備:在氮氣保護下，將75mL丙二醇與25g氫氧化鈉混合，攪拌加熱到150°C，待氫氧化鈉溶解后，加入50mL上述亞油酸，加熱回流lh。然后依次用55mL濃鹽酸酸化、用高于50°C去離子水洗至中性、用無水硫酸鈉干燥，得到轉(zhuǎn)化率為25.01%的共軛亞油酸。
[0020]實施例2
亞油酸的制備:將80g去尚子水、20g桅子油和質(zhì)量為粗提取的桅子油質(zhì)量0.25%的三?；视王；饷富旌暇鶆?，于45°C水浴中酶解lh，然后加入ImL乙醇終止反應。將反應液以2000r/min的轉(zhuǎn)速離心8min，取上層液體，得到純度為26.45%的亞油酸。
[0021]共軛亞油酸的制備:在氮氣保護下，將10mL丙二醇與25g氫氧化鈉混合，攪拌加熱到190°C，待氫氧化鈉溶解后，加入10mL上述亞油酸，加熱回流4h。然后依次用55mL濃鹽酸酸化、用高于50°C去離子水洗至中性、用無水硫酸鈉干燥，得到轉(zhuǎn)化率為66.65%的共軛亞油酸。
[0022]實施例3
亞油酸的制備:將20g pH為5的磷酸鹽緩沖液、20g梔子油和質(zhì)量為粗提取的梔子油質(zhì)量1.25%的三?；视王；饷富旌暇鶆?，于55°C水浴中酶解2h，然后加入ImL乙醇終止反應。將反應液以3000r/min的轉(zhuǎn)速離心8min，取上層液體，得到純度為39.88%亞油酸。
[0023]共軛亞油酸的制備:在氮氣保護下，將150mL丙二醇與25g氫氧化鈉混合，攪拌加熱到170°C，待氫氧化鈉溶解后，加入25mL上述亞油酸，加熱回流2h。然后依次用55mL濃鹽酸酸化、用高于50°C去離子水洗至中性、用無水硫酸鈉干燥，得到轉(zhuǎn)化率為43.99%的共軛亞油酸。
[0024]實施例4
亞油酸的制備:將20g去尚子水、60g桅子油和質(zhì)量為粗提取的桅子油質(zhì)量3.75%的三酰基甘油?；饷富旌暇鶆?，于40°C水浴中酶解4h，然后加入ImL乙醇終止反應。將反應液以4000r/min的轉(zhuǎn)速離心5min，取上層液體，得到純度為40.68%亞油酸。
[0025]共軛亞油酸的制備:在氮氣保護下，將75mL丙二醇與75g氫氧化鈉混合，攪拌加熱到180°C，待氫氧化鈉溶解后，加入75mL上述亞油酸，加熱回流3h。然后依次用165mL濃鹽酸酸化、用高于50°C去離子水洗至中性、用無水硫酸鈉干燥，得到轉(zhuǎn)化率為55.85%的共軛亞油酸。
[0026]實施例5
亞油酸的制備:將20g pH為9的磷酸鹽緩沖液、80g梔子油和質(zhì)量為粗提取的梔子油質(zhì)量7.5%的三酰基甘油?；饷富旌暇鶆?，于45°C水浴中酶解7h，然后加入ImL乙醇終止反應。將反應液以4000r/min的轉(zhuǎn)速離心7min，取上層液體，得到純度為31.41%亞油酸。
[0027]共軛亞油酸的制備:在氮氣保護下，將75mL丙二醇與25g氫氧化鈉混合，攪拌加熱到170°C，待氫氧化鈉溶解后，加入50mL上述亞油酸，加熱回流4h。然后依次用55mL濃鹽酸酸化、用高于50°C去離子水洗至中性、用無水硫酸鈉干燥，得到轉(zhuǎn)化率為97.60%的共軛亞油酸。
[0028]實施例6
亞油酸的制備:將20g pH為7.5的磷酸鹽緩沖液、20g梔子油和質(zhì)量為粗提取的梔子油質(zhì)量3.75%的三?；视王；饷富旌暇鶆颍?5°C水浴中酶解4h，然后加入ImL乙醇終止反應。將反應液以4000r/min的轉(zhuǎn)速離心5min，取上層液體，得到純度為45.81%亞油酸。
[0029]共軛亞油酸的制備:在氮氣保護下，將75mL丙二醇與25g氫氧化鈉混合，攪拌加熱到180°C，待氫氧化鈉溶解后，加入50mL上述亞油酸，加熱回流2h。然后依次用55mL濃鹽酸酸化、用高于50°C去離子水洗至中性、用無水硫酸鈉干燥，得到轉(zhuǎn)化率為96.62%的共軛亞油酸。
【主權(quán)項】
1.一種利用梔子制備共軛亞油酸的方法，其特征在于該方法包括以下步驟: 1)亞油酸的制備 將粗提取的梔子油和PH=5~9的緩沖液或去離子水混合后，加入脂肪酶進行酶解，接著加入乙醇終止反應；將反應液離心，取上層液體，即得粗提取的亞油酸；所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液；所述脂肪酶為三?；视王；饷?； 2)亞油酸的共軛化 將溶媒與堿混合均勻后，加入上述亞油酸，在氮氣環(huán)境下加熱回流lh~4h ;所述溶媒為丙二醇；所述堿為氫氧化鈉；然后依次用酸酸化、用去離子水洗至中性、用無水硫酸鈉干燥，得到共軛亞油酸。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述粗提取的梔子油是通過將干燥梔子果實粉碎過篩所得的梔子果粉與石油醚以質(zhì)量比1:10的比例混合后在50°C加熱回流2h或者在頻率為32KHz的超聲波中超聲Ih得到的。3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述粗提取的梔子油與pH=5~9的緩沖液或去尚子水的質(zhì)量比為1:0.25?1:4。4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:加入所述脂肪酶的質(zhì)量為粗提取的梔子油質(zhì)量的 0.25%~7.5%ο5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述酶解是在30~55°C的水浴中酶解l~7h。6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述離心是以500~4000轉(zhuǎn)/分鐘的轉(zhuǎn)速離心5?1min07.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟2)中堿與溶媒的質(zhì)量體積比為I: Tl: 6g/mL，堿與加入的粗提取的亞油酸的質(zhì)量體積比為3: 2~l:4g/mL。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用梔子制備共軛亞油酸的方法，屬于食品領(lǐng)域。本發(fā)明以粗提取的梔子油為原料，將粗提取的梔子油和pH=5~9的緩沖液或去離子水混合后，加入脂肪酶進行酶解，接著加入乙醇終止反應；將反應液離心，取上層液體，即得粗提取的亞油酸；將溶媒與堿混合均勻后，加入上述亞油酸，在氮氣環(huán)境下加熱回流1h~4h；然后依次用酸酸化、用去離子水洗至中性、用無水硫酸鈉干燥，得到共軛亞油酸。本發(fā)明工藝簡單，可操作性強，成本低廉，綠色環(huán)保，避免了有毒溶劑的大量使用，適合規(guī)?；a(chǎn)。
【IPC分類】C12P7/64, C07C57/12, C07C51/353
【公開號】CN105087690
【申請?zhí)枴緾N201410217735
【發(fā)明人】戚歡陽, 師彥平, 陳厚芳
【申請人】中國科學院蘭州化學物理研究所
【公開日】2015年11月25日
【申請日】2014年5月22日