一種翅果油樹(shù)種仁油粕蛋白質(zhì)的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及蛋白質(zhì)提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002]翅果油樹(shù)是胡頹子科胡頹子屬植物，經(jīng)第四世紀(jì)冰川作用后殘存下來(lái)的孑遺植物之一，目前全球僅存在于陜西和山西兩省，集中分布于呂梁山南端和中條山東端，屬國(guó)家二級(jí)保護(hù)植物。其種仁中富含蛋白質(zhì)、多不飽和脂肪酸、維生素C、維生素E及微量元素等對(duì)人體有益的活性成分。其中蛋白質(zhì)含量高到32.21%，由清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白4種類型的儲(chǔ)存蛋白組成，谷蛋白的含量最高，達(dá)61.9mg/g。蛋白質(zhì)由17種氨基酸組成，含有人體及動(dòng)物所必需的8種氨基酸中的7種，并且對(duì)人體有重要生理功能的谷氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、精氨酸的含量均較高，所以翅果油樹(shù)種仁是一種良好的蛋白源。
[0003]CN104543326A公開(kāi)了一種翅果蛋白粉的制備方法，是將種仁油柏粉碎、過(guò)篩后的細(xì)粉作為翅果蛋白粉。其不足是制得的蛋白質(zhì)純度低(蛋白質(zhì)含量多45%)，對(duì)其后期在其他領(lǐng)域的應(yīng)用有一定的限制。除此之外，對(duì)翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)提取技術(shù)的研究未見(jiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種提取率高、純度高的翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)的提取方法。該方法制備工藝簡(jiǎn)單，適宜工業(yè)化生產(chǎn)。
[0005]本發(fā)明提供的一種翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)的提取方法，包括如下步驟:
[0006](1)將干燥后的翅果油樹(shù)種仁油柏粉碎，過(guò)篩(彡40目)后備用；
[0007](2)按料液比1:30?70，在種仁油柏中加入提取液，用NaOH溶液調(diào)pH至9?11，在35?65°C下提取1.0?3.0小時(shí)，提取1?2次，離心分離取上清液，得到翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白提取液；
[0008](3)將蛋白提取液用鹽酸溶液調(diào)pH至4.5?5.5，充分?jǐn)嚢枋沟鞍踪|(zhì)沉淀完全，靜置2?4個(gè)小時(shí)，離心，棄去上清液，得沉淀；
[0009](4)沉淀用水洗至pH為7.0 ;
[0010](5)將步驟(4)處理的沉淀冷凍干燥，制得翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)。
[0011]步驟(1)所述的種仁油柏為各種脫脂方法所得的油柏。
[0012]步驟(2)所述的提取液為去離子水、蒸餾水或純凈水。
[0013]步驟⑵所述的料液比為1:40?60，提取溫度35?55°C，提取時(shí)間1.0?2.0小時(shí)。
[0014]步驟(2)中調(diào)節(jié)pH的NaOH溶液濃度為lmol/L。
[0015]步驟(3)中調(diào)節(jié)pH的鹽酸溶液濃度為lmol/L。
[0016]步驟⑷所述的水洗條件:料液比1:15?20，水洗2?3次。
[0017]步驟(5)所述的冷凍干燥的條件為真空度15?50Pa，溫度低于_40°C，干燥時(shí)間24?36小時(shí)。
[0018]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果:
[0019]本發(fā)明采用堿溶酸沉法提取翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)的提取率高達(dá)93.85 %，純度為84.81 % ;得到的蛋白質(zhì)為淺灰色粉末，持水性1.3?1.77g/g，持油性2.6?3.2g/g，乳化及乳化穩(wěn)定性在最佳條件下分別為25m2/g，45min，起泡性及泡沫穩(wěn)定性較好，在最佳條件下分別為190%，88%。
[0020]該發(fā)明工藝簡(jiǎn)單、成本低，適于工業(yè)化生產(chǎn)，可實(shí)現(xiàn)翅果油樹(shù)種仁的合理開(kāi)發(fā)及綜合利用。
【具體實(shí)施方式】
[0021]實(shí)施例1
[0022]將采用無(wú)水乙醚脫脂后的1kg干燥的翅果油樹(shù)種仁油柏粉碎過(guò)40目篩，以料液比1:50加入蒸餾水，用lmol/L NaOH溶液調(diào)pH至11，55°C水浴提取2.0h，離心取上清液，沉淀在相同條件下再提取一次，離心，合并兩次上清液。經(jīng)考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定蛋白質(zhì)的提取率達(dá)93.85%。用lmol/L的HC1溶液調(diào)節(jié)蛋白提取液的pH至等電點(diǎn)5.0，充分?jǐn)嚢枋沟鞍踪|(zhì)沉淀完全，再次離心，保留沉淀物。沉淀用料液比1:20的蒸餾水洗滌2次(pH為7.0)，冷凍干燥24h得到粉末狀成品0.547kg。經(jīng)凱氏定氮法測(cè)定純度達(dá)84.81 %。
[0023]實(shí)施例2
[0024]將冷榨法脫脂后的1kg干燥的翅果油樹(shù)種仁油柏粉碎過(guò)40目篩后，在與實(shí)施例1相同的條件下提取，得粉末狀成品0.530kg。其純度達(dá)82.64%。經(jīng)測(cè)定得知蛋白質(zhì)的提取率達(dá) 91.28%o
[0025]實(shí)施例3
[0026]除蛋白質(zhì)沉淀洗滌用料液比為1:15的蒸餾水洗滌3次(pH為7.0)外，其它步驟均采用與實(shí)施例1相同方法，得粉末狀成品0.535kg。其純度達(dá)83.07%。經(jīng)測(cè)定得知蛋白質(zhì)的提取率達(dá)91.55%。
[0027]實(shí)施例4
[0028]將超臨界0)2脫脂后的1kg干燥的翅果油樹(shù)種仁油柏粉碎過(guò)40目篩后，在與實(shí)施例3相同的條件下提取，得粉末狀成品0.521kg。其純度達(dá)82.29%。經(jīng)測(cè)定得知蛋白質(zhì)的提取率達(dá)90.07%。
[0029]實(shí)施例5
[0030]除用lmol/L NaOH溶液調(diào)pH至9不同外，其它步驟均采用與實(shí)施例1相同的方法，得粉末狀成品0.510kg。其純度達(dá)82.30%。經(jīng)測(cè)定得知蛋白質(zhì)的提取率達(dá)88.21%。
[0031]實(shí)施例6
[0032]除以料液比1:40加入蒸餾水，35°C水浴提取2.0h不同外，其它步驟均采用與實(shí)施例1相同的方法，得粉末狀成品0.525kg。其純度達(dá)83.04%。經(jīng)測(cè)定得知蛋白質(zhì)的提取率達(dá) 91.94%o
[0033]實(shí)施例7
[0034]除以料液比1:60加入蒸餾水，45°C水浴提取2.0h不同外，在與實(shí)施例3相同的條件下提取，得粉末狀成品0.531kg。其純度達(dá)83.60%。經(jīng)測(cè)定得知蛋白質(zhì)的提取率達(dá)93.21%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)的提取方法，其特征在于包括如下步驟: (1)將干燥后的翅果油樹(shù)種仁油柏粉碎，過(guò)篩后備用； (2)按料液比1:30?70，在種仁油柏中加入提取液，用NaOH溶液調(diào)pH至9?11，在35?65°C下提取1.0?3.0小時(shí)，提取1?2次，離心分離取上清液，得到翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白提取液； (3)將蛋白提取液用鹽酸溶液調(diào)pH至4.5?5.5，充分?jǐn)嚢枋沟鞍踪|(zhì)沉淀完全，靜置2?4個(gè)小時(shí)，離心，棄去上清液，得沉淀； (4)將沉淀用水洗至pH為7.0 ; (5)將步驟(4)處理的沉淀冷凍干燥，制得翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)的提取方法，其特征在于步驟(2)所述的提取液為去離子水、蒸餾水或純凈水。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)的提取方法，其特征在于步驟(2)所述的料液比為1:40?60，提取溫度35?55°C，提取時(shí)間1.0?2.0小時(shí)。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)的提取方法，其特征在于步驟(2)中調(diào)節(jié)pH的NaOH溶液濃度為lmol/L。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)的提取方法，其特征在于步驟(3)中調(diào)節(jié)pH的鹽酸溶液濃度為lmol/L。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)的提取方法，其特征在于步驟(4)所述的水洗條件:料液比1:15?20，水洗2?3次。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種翅果油樹(shù)種仁油柏蛋白質(zhì)的提取方法，其特征在于步驟(5)所述冷凍干燥的條件:真空度15?50Pa，溫度低于-40°C，干燥時(shí)間24?36小時(shí)。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種翅果油樹(shù)種仁油粕蛋白質(zhì)的提取方法。該方法以翅果油樹(shù)種仁油粕為原料，以料液比1:30～70加入提取液，調(diào)pH至9～11，35～65℃下對(duì)油粕進(jìn)行蛋白質(zhì)的提取，離心取上清液，上清液調(diào)pH至4.5～5.5使蛋白質(zhì)充分沉淀，離心，取沉淀用水洗至pH為7.0，冷凍干燥得翅果油樹(shù)種仁油粕蛋白。本發(fā)明蛋白質(zhì)提取率高達(dá)93.85％，純度為84.81％，操作簡(jiǎn)便、易于工業(yè)化生產(chǎn)。
【IPC分類】C07K1/14, C07K1/30
【公開(kāi)號(hào)】CN105294823
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510844090
【發(fā)明人】張生萬(wàn), 馮笑笑, 張連水, 李娟 , 張立山, 李美萍
【申請(qǐng)人】山西大學(xué), 山西琪爾康翅果生物制品有限公司
【公開(kāi)日】2016年2月3日
【申請(qǐng)日】2015年11月26日