一種應(yīng)用于普那霉素分離的吸附劑的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種吸附劑的制備方法，特別是一種應(yīng)用于普那霉素分離的吸附劑的 制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 普那霉素主要用于治療由革蘭氏陽(yáng)性菌包括耐藥菌引起的感染。普那霉素經(jīng)過(guò)化 學(xué)修飾得到的水溶性衍生物哇奴普下/達(dá)福普下對(duì)耐藥性革蘭氏陽(yáng)性菌具有很強(qiáng)的殺菌 作用，且有較長(zhǎng)的抗生素后效應(yīng)和不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，是目前治療由耐藥的革蘭氏陽(yáng) 性菌引起的感染最有效的抗生素之一。
[0003] 普那霉素IA的分子骨架是由1個(gè)3-徑基化晚簇酸殘基和k蘇氨酸、D-氨基下 酸、k脯氨酸、4-二甲基氨基-k苯丙氨酸、4-酬-k六氨化晚簇酸和k苯甘氨酸等6個(gè) 氨基酸殘基聚合而成的環(huán)狀結(jié)構(gòu)。PIA大環(huán)的第5位的L-DMPAPA殘基被4-甲基氨基-k苯 丙氨酸殘基替換就形成PIB，而PIB的第3位D-氨基下酸殘基被D-丙胺酸殘基替換后又形 成PIC分子。
[0004] US3154475公開(kāi)了普那霉素的傳統(tǒng)提取方法。發(fā)酵液調(diào)PH至3,過(guò)濾分離得到濾 液，用稀堿調(diào)濾液PH至7,然后用有機(jī)溶劑二氯甲燒直接萃取濾液，得到含有目的物的萃取 液，真空濃縮，用石油酸處理即得到普那霉素粗品，粗品用二氯甲燒溶解，上粉末狀活性炭 柱層析，二氯甲燒洗脫，收集中央部分，石油酸處理得到沉淀，洗涂干燥后得到純品，提取總 收率約50%。
[0005] CN102558302公開(kāi)了一種分離純化普那霉素的方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。該方法 的主要步驟為：吸附樹(shù)脂洗脫、納濾濃縮、溶媒結(jié)晶、濃縮干燥后獲得普那霉素成品。
[0006] CN102465164公開(kāi)了一種普那霉素的制備方法，發(fā)酵液經(jīng)酸化后，固液分離得到 濾液；濾液經(jīng)大孔樹(shù)脂脫色；脫色液用大孔吸附樹(shù)脂富集后解析；解析液再用活性炭脫色 后濃縮、萃取、堿洗；結(jié)晶，堿洗液結(jié)晶得到普那霉素粗品；粗品再經(jīng)過(guò)重結(jié)晶得到普那霉 素精粉。
[0007] 目前文獻(xiàn)中所報(bào)道的分離純化方法收率較低，不能W足夠穩(wěn)定和可重現(xiàn)的質(zhì)量進(jìn) 行批量生產(chǎn)。由于市售的吸附樹(shù)脂與普那霉素相容性差，吸附能力收到限制，所W需要發(fā)明 一種新型的吸附樹(shù)脂，提高對(duì)普那霉素的吸附能力。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 目的在于針對(duì)從普那霉素發(fā)酵液分離純化普那霉素對(duì)吸附分離材料的要求，本發(fā) 明提供一種應(yīng)用于普那霉素分離的吸附劑的制備方法，同時(shí)公開(kāi)其制備方法。通過(guò)W下步 驟實(shí)現(xiàn)：
[000引步驟1.水相的配制
[0010] 按重量份計(jì)，在壓力反應(yīng)蓋中內(nèi)加入100份純水0. 5-2份有機(jī)化學(xué)分散劑，攬拌均 勻；
[0011] 所述化學(xué)分散劑選自聚乙締醇、明膠或徑甲基纖維素；
[001引步驟2.油相的配制
[0013] 按重量份計(jì)，將100份苯乙締、30-100份二乙締基苯、3-10份甲基丙締酸二甲氨基 乙醋，0. 05-0. 05份1-乙氧基-3-二氣甲基-1，3-下二締，0. 05-0. 05份1-甲氧基-3-二 甲基娃氧基-1，3-下二締混合，再加入0. 5-3份過(guò)氧化物引發(fā)劑、10-40份致孔劑，攬拌均 勻；
[0014] 步驟3.懸浮聚合反應(yīng)
[0015] 將步驟2燒杯中配好的油相溶液加到步驟1中裝有已配制水相的壓力反應(yīng)蓋中， 在70-115°C反應(yīng)8-20h，反應(yīng)結(jié)束后放料，水洗微球至水清澈，烘干后將致孔劑抽提干凈， 得到產(chǎn)品。
[0016] 步驟2所述的甲基丙締酸二甲氨基乙醋為市售產(chǎn)品。如上海順強(qiáng)生物科技有限公 司生產(chǎn)的產(chǎn)品。
[0017]步驟2所述的1-乙氧基-3-S氣甲基-1，3-下二締，結(jié)構(gòu)式見(jiàn)式（2)，為市售產(chǎn) 品，如上海御略化工有限公司生產(chǎn)的產(chǎn)品。
[0018]
[0019] 步驟2所述的1-甲氧基-3-S甲基娃氧基-1,3-下二締，結(jié)構(gòu)式見(jiàn)式（3)，為市售 產(chǎn)品，如鄭州阿爾法化工有限公司生產(chǎn)的產(chǎn)品。
[0020]
[0021] 步驟2所述的過(guò)氧化物引發(fā)劑優(yōu)選過(guò)氧化苯甲酯。
[0022] 步驟2所述的致孔劑是良溶劑或非良溶劑或混合溶劑，如白油，溶劑油，甲苯等， 優(yōu)選甲苯。
[0023] 本發(fā)明的有益效果：
[0024] 本發(fā)明在聚合中引入少量甲基丙締酸二甲氨基乙醋作為共聚單體，W提高樹(shù)脂與 含有氨基糖巧結(jié)構(gòu)的普那霉素的相容性，從而提高了普那霉素的收率；1-乙氧基-3-=氣 甲基-1，3-下二締，1-甲氧基-3-=甲基娃氧基-1，3-下二締的二締基團(tuán)帶給聚合物支鏈 結(jié)構(gòu)，可W提高吸附能力。
【具體實(shí)施方式】
[0025] W下實(shí)施例僅僅是進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，并不是限制本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0026] 實(shí)施例1
[0027] 步驟1.水相的配制
[0028] 按重量份計(jì)，在壓力反應(yīng)蓋內(nèi)加入100份純水，0. 5份明膠，攬拌均勻。
[002引步驟2.油相的配制
[0030] 將W下比例的油相組分在燒杯中混合，攬拌均勻；
[0031] 組分 重量份 苯立婦 100 二乙婦苯 50 甲基丙帰酸二甲氨基己醋 6 1-石氧基-3-H氣甲基-1，3-T二婦 0. 2 1-甲氧基-3-H甲基桂氧基-1,3-了二帰0.2 甲苯 30 過(guò)氧化苯甲醜 2
[0032] 步驟3.懸浮聚合反應(yīng)
[0033] 將步驟2中配好的油相溶液加到步驟1中裝有已配制水相的壓力反應(yīng)蓋中，在 90°C反應(yīng)16h，反應(yīng)結(jié)束后放料，反應(yīng)結(jié)束后放料，水洗微球至水清澈，烘干后將致孔劑抽提 干凈，得到產(chǎn)品.編號(hào)為W-I
[0034] 實(shí)施例2
[003引步驟1.水相的配制
[0036] 按重量份計(jì)，在壓力反應(yīng)蓋內(nèi)加入100份純水，1. 5份聚乙締醇，攬拌均勻。
[0037] 步驟2.油相的配制
[0038] 將W下比例的油相組分在燒杯中混合，攬拌均勻；
[0039] 組分 重量份 苯乙婦 100 二乙婦苯 30 甲基丙婦酸二甲氨基古醋 3
[0040] 1-乙氧基-3-H氣甲基-1，3-了二締 0. 05 1-甲氧基-3-H甲基插氧基-1，3-T二締0.05 白油 40 過(guò)氧化苯甲酯 0.5
[0041] 步驟3.懸浮聚合反應(yīng)
[0042] 將步驟2中配好的油相溶液加到步驟I中裝有已配制水相的壓力反應(yīng)蓋中，在 7(TC反應(yīng)20h，反應(yīng)結(jié)束后放料，反應(yīng)結(jié)束后放料，水洗微球至水清澈，烘干后將致孔劑抽提 干凈，得到產(chǎn)品.編號(hào)為W-2 [004引 實(shí)施例3
[0044] 步驟1.水相的配制
[0045] 按重量份計(jì)，在壓力反應(yīng)蓋內(nèi)加入100份純水，2份徑甲基纖維素，攬拌均勻。
[004引步驟2.油相的配制
[0047] 將W下比例的油相組分在燒杯中混合，攬拌均勻；
[0048] 組分 重量份 苯乙婦 100 二乙?guī)⒈?100 甲基丙婦酸二甲氨基石醋 10 1-乙氧基-3-H氣甲基-1，3-了二帰 0. 5 1-甲氧基-3-H甲基娃氧基-1,3-下二帰0.5 溶劑油 10 過(guò)氧化苯甲酯 3
[0049] 步驟3.懸浮聚合反應(yīng)
[0050] 將步驟2燒杯中配好的油相溶液加到步驟1中裝有已配制水相的壓力反應(yīng)蓋中， 在115 °C反應(yīng)化，反應(yīng)結(jié)束后放料，反應(yīng)結(jié)束后放料，水洗微球至水清澈，烘干后將致孔劑 抽提干凈，得到產(chǎn)品.編號(hào)為W-3
[00川對(duì)比例1
[0052] 步驟2中甲基丙締酸二甲氨基乙醋重量份為0,其它同實(shí)施例1。所得產(chǎn)品編號(hào)為 W-4
[00閲對(duì)比例2
[0054] 步驟2中1-乙氧基-3-S氣甲基-1,3-下二締重量份為0,其它同實(shí)施例1。所 得產(chǎn)品編號(hào)為W-5 [00財(cái)對(duì)比例3
[0056] 步驟2中1-甲氧基-3-S甲基娃氧基-1,3-下二締重量份為0,其它同實(shí)施例1。 所得產(chǎn)品編號(hào)為W-6
[0057] 實(shí)施例4
[0058] 準(zhǔn)確稱取預(yù)處理后的實(shí)施例1-3和對(duì)比例1-3制得的吸附劑各5g，置于250mL具 塞磨口S角瓶中，精密加人IOOmL提取原液，將S角瓶在室溫下振蕩化，充分吸附后，過(guò)濾， 取濾液使用LC-IOAD高效液相色譜儀測(cè)定普那霉素的濃度，計(jì)算普那霉素收率，見(jiàn)表1 :
[0059] 表I:本專(zhuān)利制得的吸附劑收率一覽表
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種應(yīng)用于普那霉素分離的吸附劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟： 步驟1.水相的配制 按重量份計(jì)，在壓力反應(yīng)釜中內(nèi)加入100份純水0. 5-2份有機(jī)化學(xué)分散劑，攪拌均勻； 所述化學(xué)分散劑選自聚乙烯醇、明膠或羥甲基纖維素； 步驟2.油相的配制 按重量份計(jì)，將100份苯乙稀、30-100份二乙烯基苯、3_10份甲基丙稀酸二甲氨基乙 酯，0.05-0. 05份1-乙氧基-3-三氟甲基-1，3-丁二烯，0.05-0. 05份1-甲氧基-3-三甲 基硅氧基-1，3- 丁二烯混合，再加入0. 5-3份過(guò)氧化物引發(fā)劑、10-40份致孔劑，攪拌均勻； 步驟3.懸浮聚合反應(yīng) 將步驟2燒杯中配好的油相溶液加到步驟1中裝有已配制水相的壓力反應(yīng)釜中，在 70-115Γ反應(yīng)8-20h，反應(yīng)結(jié)束后放料，水洗微球至水清澈，烘干后將致孔劑抽提干凈，得到 廣品。
【專(zhuān)利摘要】發(fā)明了一種應(yīng)用于普那霉素分離的吸附劑的制備方法：在反應(yīng)釜中，打入純水，加入一定量的分散劑，引發(fā)劑，苯乙烯/交聯(lián)劑單體/甲基丙烯酸二甲氨基乙酯，以及1-乙氧基-3-三氟甲基-1，3-丁二烯，1-甲氧基-3-三甲基硅氧基-1，3-丁二烯，致孔劑等，升溫至反應(yīng)溫度，待反應(yīng)結(jié)束.烘干，抽提致孔劑，烘干收袋.本發(fā)明在聚合中引入少量甲基丙烯酸二甲氨基乙酯作為共聚單體，以提高樹(shù)脂與含有氨基糖苷結(jié)構(gòu)的普那霉素的相容性，從而提高了普那霉素的收率。
【IPC分類(lèi)】C08F2/20, C08F220/34, C08F236/14, C08F212/08, C08F236/16, C08J9/28, B01J20/30, B01J20/26, C08F212/36
【公開(kāi)號(hào)】CN105294910
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510846262
【發(fā)明人】王琪宇, 馬駿
【申請(qǐng)人】王金明
【公開(kāi)日】2016年2月3日
【申請(qǐng)日】2015年11月30日