]
[0056] 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，4-硝基鄰苯二腈、對羥基芐胺和1(20)3按摩爾比1:1:2加入到DMF中， 然后加入10mL二氯甲烷作為溶劑，60°C下反應(yīng)6h，得到中間體3 ;
[0057] (2)4-(4-((三苯甲氨基）甲基）苯氧基）鄰苯二腈的合成
[0058] 反應(yīng)式如下式所示：
[0060] 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，三苯基氯甲烷用二氯甲烷溶解，用恒壓滴液漏斗緩慢的滴入中間體3 和碳酸鉀的二氯甲烷溶液中，中間體3與三苯基氯甲烷和碳酸鉀摩爾比為1:1. 2:2. 5,滴定 約5h，然后常溫反應(yīng)4h，得中間體4 ;
[0061] (3)2,9，16,23_四-((4-(((三苯甲基）氨基）甲基）苯氧基）鋅酞菁的合成
[0062] 反應(yīng)式如下式所示：
[0064] 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，中間體4、金屬鹽和DBU按摩爾比4:2. 5:6加入正戊醇中，回流反應(yīng) 24h得到含有三苯甲基保護(hù)的非離子酞菁5 ;
[0065] (4)2,9，16,23_四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁的合成
[0066] 反應(yīng)式如下式所示：
[0067]
[0068] 冰水浴下，8當(dāng)量的三氟乙酸加入三苯甲基保護(hù)的非離子酞菁5的二氯甲烷溶液 中，攪拌反應(yīng)lh，升至室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h，之后用10 %的氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH約為 9-10,得到2, 9, 16, 23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁6;
[0069] (5)2,9，16,23_四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁?xì)涞馑猁}的合成
[0070] 反應(yīng)式如下式所示：
[0072] 將2, 9, 16, 23-四- ((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁6懸浮于蒸餾水中，加入30當(dāng) 量的5%的氫碘酸，常溫下攪拌直至2, 9, 16, 23-四- ((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁6完全 溶解。濃縮反應(yīng)液，傾入50mL丙酮中，有藍(lán)綠色絮狀固體析出。過濾，得到所述的鋅酞菁?xì)?碘酸鹽I。
[0073] 實(shí)施例2
[0074] 2, 9, 16, 23-四- ((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁?xì)涞馑猁}的合成方法，步驟如下：
[0075] (1)4-((4-氨甲基）苯氧基）鄰苯二腈的合成
[0076] 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，4-硝基鄰苯二腈、對羥基芐胺和LiOH按摩爾比1:1. 5:2加入到DMF 中，然后加入10mL二氯甲烷作為溶劑80°C下反應(yīng)6h，得到中間體3 ;
[0077] (2)4-(4-((三苯甲氨基）甲基）苯氧基）鄰苯二腈的合成
[0078] 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，三苯基氯甲烷用二氯甲烷溶解，恒壓滴液漏斗緩慢的滴入中間體3 和LiOH的二氯甲烷溶液中，中間體3與三苯基氯甲烷和LiOH按摩爾比為1:1. 5:2,滴定約 5h，然后常溫反應(yīng)4h，得中間體4 ;
[0079] (3)2,9，16,23_四-((4-(((三苯甲基）氨基）甲基）苯氧基）鋅酞菁的合成
[0080] 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，中間體4、金屬鹽和DBU按摩爾比1:1. 6:4加入正戊醇中，回流反應(yīng) 24h得到含有三苯甲基保護(hù)的非離子酞菁5 ;
[0081] (4)2,9，16,23_四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁的合成
[0082] 冰水浴下，12當(dāng)量三氟乙酸加入三苯甲基保護(hù)的非離子酞菁5的二氯甲烷溶液 中，攪拌反應(yīng)lh，升至室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)2h，之后用10 %的氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH約為 9-10,得到2, 9, 16, 23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁6;
[0083] (5)2,9，16,23_四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁?xì)涞馑猁}的合成
[0084] 將2, 9, 16, 23-四- ((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁6懸浮于蒸餾水中，加入40當(dāng) 量的5%的氫碘酸，常溫下攪拌直至2, 9, 16, 23-四- ((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁6完全 溶解。濃縮反應(yīng)液，傾入50mL丙酮中，有藍(lán)綠色絮狀固體析出。過濾，得到所述的鋅酞菁?xì)?碘酸鹽I。
[0085] 實(shí)施例3
[0086] 2, 9, 16, 23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁鹽酸鹽（II )的合成，步驟如下：
[0088] ⑴按照實(shí)施例1步驟⑴~（4)，制得2, 9, 16, 23-四-((4-氨甲基）苯氧基） 鋅酞菁；
[0089] (2)2,9，16,23_四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁鹽酸鹽的合成
[0090] 將2, 9, 16, 23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁6懸浮于蒸餾水中，加入30當(dāng)量 的5%的鹽酸，常溫下攪拌直至2, 9, 16, 23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁6完全溶解。 濃縮反應(yīng)液，傾入50mL丙酮中，有藍(lán)綠色絮狀固體析出。過濾，得到2, 9, 16, 23-四-((4-氨 甲基）苯氧基）鋅酞菁鹽酸鹽II。
[0091] 實(shí)施例4
[0092] (1)將酞菁溶液與ADPA水溶液混合，665nm的LED燈照射，每分鐘記錄一次378nm 處的紫外吸收峰。
[0093] (2)單線態(tài)氧的產(chǎn)生速度通過下列公式計算而得：
[0094] ln([ADPA]t/[ADPA]〇) =-kt
[0095] 其中[ADPA],和[ADPA]。是光照前后ADPA的濃度，k是單線態(tài)氧的產(chǎn)生速度，t為 光照的時間。
[0096] (3)由兩個酞菁在水中的單線態(tài)氧產(chǎn)生速度擬合值可知，2, 9, 16, 23-四- ((4-氨 甲基）苯氧基）鋅酞菁?xì)涞馑猁}（I )相比于2,9, 16, 23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅 酞菁鹽酸鹽（II )單線態(tài)氧產(chǎn)生能力有了明顯的增強(qiáng)。
[0097] 實(shí)施例5
[0098] (1)細(xì)胞給藥后孵育4h，加入無熒光的DCFH-DA (二氯二氫熒光素-乙酰乙酸酯）。 用波長為665nm的LED燈對其照射5min。無熒光的DCFH-DA可以被藥物產(chǎn)生的活性氧氧化 為有熒光的DCF(二氯熒光素），通過測細(xì)胞內(nèi)的熒光強(qiáng)度來檢測細(xì)胞內(nèi)活性氧產(chǎn)生能力。
[0099] (2)細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧的能力，即相對熒光強(qiáng)度FL值通過下列公式計算而得：
[0100] FL = DCFtreated/DCF untreated
[0101] 其中，DCFtraatad為給藥組產(chǎn)生DCF的熒光強(qiáng)度，DCFuntraatad為空白對照組產(chǎn)生DCF的 熒光強(qiáng)度。
[0102] (3)通過與空白對照組比較可知，兩種酞菁均具有良好的活性氧產(chǎn)生能力，且 2,9, 16, 23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁?xì)涞馑猁}（I )的細(xì)胞內(nèi)活性氧產(chǎn)生能力明 顯強(qiáng)于2, 9, 16, 23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁鹽酸鹽（II )。
[0103] 實(shí)施例6
[0104] (1)用噻唑藍(lán)（MTT)法研究2, 9, 16, 23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁?xì)涞馑?鹽的體外抗腫瘤活性，細(xì)胞給藥后孵育24h，通過用LED燈（665nm)對其光照5min來檢測藥 物的光毒性，不光照的實(shí)驗(yàn)組用來檢測暗毒性。
[0105] (2)細(xì)胞存活率是由給藥組和空白對照組細(xì)胞所測得的吸光度值決定，細(xì)胞存活 率V可由下列公式計算而得：
[0106] V = A/A^lOO%
[0107] 其中，&為給藥組吸光度值，A2為空白對照組吸光度值。
[0108] (3)2, 9, 16, 23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁?xì)涞馑猁}具有很好的細(xì)胞 安全性，此外，2,9，16,23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁?xì)涞馑猁}（1)相比于 2,9，16,23_四-((4-氨甲基）苯氧基）鋅酞菁鹽酸鹽（II )具有更好的光敏活性。
【主權(quán)項】
1. 一種鋒獻(xiàn)菁氨艦酸鹽光敏劑，其特征在于，具有下式I的結(jié)構(gòu)：式中，Μ=化。2. -種權(quán)利要求1所述的鋒獻(xiàn)菁氨艦酸鹽光敏劑的制備方法，包括W下步驟： 1) 堿性催化劑催化條件下，對徑基節(jié)胺與4-硝基鄰苯二臘反應(yīng)得到中間體4- (4-氨甲 基）苯氧基）鄰苯二臘（3);2) 堿性催化劑催化條件下，4-((4-氨甲基）苯氧基）鄰苯二臘與Ξ苯基氯甲燒反應(yīng)， 生成中間體4-(4-((Ξ苯甲氨基）甲基）苯氧基）鄰苯二臘（4)，對氨基進(jìn)行保護(hù)；，化為Ξ苯甲基 3) 4-(4-((Ξ苯甲基-氨基）甲基）苯氧基）鄰苯二臘與醋酸鋒采用DBU催化進(jìn)行環(huán) 化反應(yīng)，得到非離子獻(xiàn)菁巧）；4) 非離子獻(xiàn)菁（5)與Ξ氣乙酸反應(yīng)脫去Ξ苯甲基保護(hù)基，生成2, 9, 16, 23-四-((4-氨 甲基）苯氧基）鋒獻(xiàn)菁化）；5)2,9, 16,23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋒獻(xiàn)菁（6)與氨艦酸反應(yīng)，重結(jié)晶后，得到 2,9，16,23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋒獻(xiàn)菁氨艦酸鹽。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的鋒獻(xiàn)菁氨艦酸鹽光敏劑的制備方法，其特征在于：所述的堿 性催化劑為無機(jī)堿催化劑或有機(jī)堿催化劑，其中無機(jī)堿催化劑為Na2〇)3、K2C〇3或LiOH，有機(jī) 堿催化劑為Ξ乙胺。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的鋒獻(xiàn)菁氨艦酸鹽光敏劑的制備方法，其特征在于：步驟（1) 中，所述的4-硝基鄰苯二臘、對徑基節(jié)胺和堿性催化劑的摩爾比為1:1~5:2~4 ;反應(yīng)溶 劑為N，N-二甲基甲酯胺（DMF);反應(yīng)溫度在20~100°C之間，在保護(hù)氣氛為氮?dú)鈼l件下進(jìn) 行。5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的鋒獻(xiàn)菁氨艦酸鹽光敏劑的制備方法，其特征在于：步驟（2) 中，所述的4-((4-氨甲基）苯氧基）鄰苯二臘（3)、Ξ苯基氯甲燒和堿性催化劑摩爾比為 1:1~5:2~4 ;溶劑為二氯甲燒，保護(hù)氣氛為氮?dú)?，常溫下反?yīng)。6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的鋒獻(xiàn)菁氨艦酸鹽光敏劑的制備方法，其特征在于：步驟（3) 中，所述的4-(4-((Ξ苯甲氨基）甲基）苯氧基）鄰苯二臘（4)、醋酸鋒和DBU的摩爾比為 1:0. 5~2:1~4,保護(hù)氣氛為氮?dú)猓軇檎齑?，反?yīng)溫度為120~160°C。7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的鋒獻(xiàn)菁氨艦酸鹽光敏劑的制備方法，其特征在于：步驟（4) 中，非離子獻(xiàn)菁（5)與Ξ氣乙酸的摩爾比為1:4~16,反應(yīng)溫度為0~30°C，溶劑為氯仿或 二氯甲燒。8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的鋒獻(xiàn)菁氨艦酸鹽光敏劑的制備方法，其特征在于：步驟巧） 中，所述的2, 9, 16, 23-四-((4-氨甲基）苯氧基）鋒獻(xiàn)菁（6)與過量的HI反應(yīng)，溶劑為水， 反應(yīng)溫度為25°C~回流溫度，重結(jié)晶溶劑為丙酬。9. 權(quán)利要求1所述的鋒獻(xiàn)菁氨艦酸鹽作為光敏劑在制備光動力藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種2,9,16,23-四-((4-氨甲基)苯氧基)鋅酞菁?xì)涞馑猁}、它的制備方法和其在光動力療法中的應(yīng)用。所述的2,9,16,23-四-((4-氨甲基)苯氧基)鋅酞菁?xì)涞馑猁}光敏劑不僅合成方法簡單，而且在水中具有好的溶解性(基于質(zhì)子化原理)、高的抗腫瘤活性(基于重原子效應(yīng))和低的暗毒性，具有良好的光動力療法應(yīng)用前景。
【IPC分類】C07D487/22, A61K41/00
【公開號】CN105315289
【申請?zhí)枴緾N201510788797
【發(fā)明人】魏少華, 靳維維, 周林, 周家宏, 林云
【申請人】南京師范大學(xué)
【公開日】2016年2月10日
【申請日】2015年11月17日