分組成明確，有效成分純度高、功效穩(wěn)定，藥物使用劑 量小。
[0020] 本
【發(fā)明內(nèi)容】
是通過系統(tǒng)研究和大量創(chuàng)造性實驗完成的，以下述具體實施例進行說 明。
【附圖說明】
[0021] 圖1次為采用本發(fā)明實施例1制備的油茶籽皂苷CSB的高效液相色譜圖。圖中， 色譜峰la/lb、2a/2b、3a/3b依次為油茶皂苷la/lb、2a/2b、3a/3b。
[0022] 圖2為采用本發(fā)明實施例2制備的油茶根皂苷CSB的高效液相色譜圖。圖中，色 譜峰4a/4b依次為油茶皂苷4a/4b。
【具體實施方式】
[0023] 本發(fā)明所述的三萜皂苷化合物及其組合物是按以下實施例所表示的方法制造，所 涉及到的方法是本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠掌握和運用的技術(shù)手段。但以下實施例不得理解為 任何意義上的對本領(lǐng)域發(fā)明權(quán)利要求的限制。
[0024] 實施例1:油茶籽皂苷的制備
[0025] 選用油茶籽（Camellia oleifera，批次20120901，采自云南廣南）經(jīng)榨油后獲得 的餅柏。
[0026] (1)稱取油茶籽餅800g，粉碎后加入10倍量80 %乙醇浸泡一夜，回流提取兩次，每 次2h，減壓濃縮至約3L。取其中2L濃縮溶液經(jīng)AB-8大孔吸附樹脂柱（15X60cm，柱體積 2L)吸附后，依次用水（8L)、10%乙醇（8L)、30%乙醇（8L)、75%乙醇（8L)洗脫，75%乙醇 洗脫部分減壓濃縮，干燥，得油茶總皂苷CSA40. 9g。
[0027] (2)取CS-A10g，加入 100ml2mol/LNaOH溶液中，95°C水解 5h，用 5mol/LHC1 中 和至pH4-6,上AB-8大孔吸附樹脂（柱體積400ml)，依次用水（1. 6L)、75%乙醇（1. 6L)，收 集75 %乙醇洗脫液減壓濃縮，干燥，得油茶皂苷CSB(5. 62g)。
[0028] (3)取CSB2.80g，用 30% 甲醇 50ml溶解，上DaisogelRP-18 柱（40-60μπι，柱體 積 150ml)，依次用 30%，40% (F1)，45% (F2)，50% (F3)，55%，60%，65%，70%，75%，80% 甲醇各400mL洗脫，分別濃縮獲得相應流分，TLC檢識茶皂苷類組分主要在F1~F3。F1~ F3分別用50%甲醇為洗脫劑上S印hadexLH-20柱（柱體積160ml)，每15mL-份收集，TLC 檢測，合并，濃縮，依次獲得組分B1 (40mg)、B2 (皂苷2a，200mg)、B3 (45mg)。
[0029] 結(jié)構(gòu)鑒定：采用ABSciexQTRAP4000液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)進行電噴霧（ESI)MS/MS分 析，獲得組分B1~B3中的主成分主要離子碎片信息（表1)。從表1可以觀察到：（1)該3 個組分都分別含有兩個主要化合物，組內(nèi)兩個化合物的分子量差異都是30,結(jié)合二級碎片 離子差異，容易判斷源自五碳糖與六碳糖之間的質(zhì)量差異；(2)正離子模式下，組分間含有 相同或相似的碎片離子峰，可以推測它們具有相同或者相似的糖鏈結(jié)構(gòu)；(3)負離子模式 下，都可以獲得苷元的分子離子峰，有的還給出了依次丟失末端單糖基的離子碎片。經(jīng)和 文獻報道已知物結(jié)構(gòu)信息對照[李夏，油茶根化學成分研究（II)，蘇州大學碩士學位論文， 2014]，推測其可能結(jié)構(gòu)見表2。
[0030] 表1正負離子模式下油茶皂苷組分B1-B3中皂苷的主要離子碎片
[0031]
[0032]表2推導的油茶皂苷組分結(jié)構(gòu)
[0035] 組分B2中存在的主要化合物油茶皂苷2a，為文獻報道茶皂苷 Bl(CamelliasaponinB1)經(jīng)堿水解脫去酯基的次生阜苷，在常規(guī)提取的油茶阜苷CSA中未 發(fā)現(xiàn)。組分B1-B3中存在的其他5個化合物，也均為其前體皂苷脫去酯基后形成的新成分。
[0036] 采用HPLC法分析油茶皂苷CSB中的皂苷成分，色譜條件：色譜柱Cosmosi1 C18-AR-II柱（4.6mmX250mm，5ym);流動相甲醇（A)-水（含0.3%乙酸，B)，梯度洗脫條件 0-20min為 40 % - 80 %A，20-30min為 80 % - 100 %A，30-40min為 100 %A;ELSD檢測；流 速1.OmL·minS柱溫40°C;進樣量20μL;分析時間40min。CSB中檢測出6個皂苷成分， 其中皂苷2a含量為15.7%。參見附圖1。
[0037] 采用堿水解結(jié)合大孔樹脂精制方法，獲得的油茶皂苷CSB由脫去酯基的固定組成 的化合物組成，增加了茶皂苷的水溶性，同時提高了該提取物產(chǎn)品的穩(wěn)定性和質(zhì)量可控性。
[0038] 實施例2 :油茶根皂苷的制備
[0039] 選用油茶（批次20110901，采自湖北省蘄春縣）根，參考實施例1制備。
[0040] (1)稱取油茶根100g，粉碎后加入10倍量60 %乙醇浸泡一夜，回流提取兩次，每次 1. 5h，減壓濃縮至500mL，上AB-8大孔吸附樹脂柱（柱體積300mL)吸附后，依次用水（5L)、 30%乙醇（1L)、60%乙醇（1L)洗脫，60%乙醇洗脫部分減壓濃縮，干燥，得油茶總皂苷CSA 21. 4g〇
[0041] (2)取CSA10g，加入 100ml2mol/LNaOH溶液中，95°C水解 5h，用 5mol/LHC1 中 和至pH4-6,上AB-8大孔吸附樹脂（柱體積400ml)，依次用水（1. 6L)、75%乙醇（1. 6L)，收 集75 %乙醇洗脫液減壓濃縮，干燥，得油茶皂苷CSB(6. 41g)。
[0042] (3)取CSBlg，用 40% 甲醇 50ml溶解，上DaisogelRP-18 柱（40-60μπι，柱體積 150ml)，依次用40 %，45 %，50 % (F1)，55 %，100 %甲醇各300mL洗脫，分別濃縮獲得相應 流分。F2用50%甲醇為洗脫劑上S印hadexLH-20柱純化，獲得組分Μ(皂苷4a和4b， 380mg)。
[0043] 結(jié)構(gòu)鑒定：采用實施例1相同HPLC/ELSD分析方法，檢測油茶皂苷CSB中的皂苷 成分，參見附圖2。經(jīng)和文獻報道已知物[李夏，油茶根化學成分研究（II)，蘇州大學碩 士學位論文，2014]水解產(chǎn)物對比，確定CSB中油茶皂苷4a、4b依次為15α，16α，21β， 22α，28_五羥基齊墩果-12-烯-23-醛-3 0-〇_a-L-吡喃阿拉伯糖-(1 - 2)-β-?_半 乳糖-(1 - 3)-[i3_D-半乳糖-(1 - 2)]-i3_D-葡萄糖醛酸苷（4a)、15a，16α，21β， 22α，28_五羥基齊墩果-12-烯-23-醛-3β-0-β-?-木糖-(1 - 2)-β-?-半乳 糖-(1 - 3)-[β-D-半乳糖-(1 - 2)]-β-D-葡萄糖醛酸苷（4b)，皂苷4a和4b含量總和 為 38. 5%。
[0044] 實施例3 :茶種子皂苷的制備
[0045] 選用茶（Camelliasinensis，批次20131001，采自云南廣南）種子，參考實施例1 制備。
[0046] (1)稱取茶種子100g，粉碎后加入10倍量60%乙醇浸泡一夜，回流提取兩次，每次 1. 5h，減壓濃縮至500mL，上AB-8大孔吸附樹脂柱（柱體積300mL)吸附后，依次用水（5L)、 30%乙醇（11^)、60%乙醇（11^)洗脫，60%乙醇洗脫部分減壓濃縮，干燥，得茶總皂苷〇5八 27g〇
[0047] (2)取CSA10g，加入 100ml2mol/LNaOH溶液中，95°C水解 5h，用 5mol/LHC1 中 和至pH4-6,上AB-8大孔吸附樹脂（柱體積400ml)，依次用水（1. 6L)、75%乙醇（1. 6L)，收 集75 %乙醇洗脫液減壓濃縮，干燥，得茶皂苷CSB(3. 7g)。
[0048] (3)取CSBlg，用 30% 甲醇 50ml溶解，上DaisogelRP-18 柱（40-60μm，柱體積 150ml)，依次用30 %，40 % (F1)，45 % (F2)，50 %，100 %甲醇各300mL洗脫，分別濃縮獲得相 應流分。F1、F2分別用50%甲醇為洗脫劑上S印hadexLH-20柱純化，依次獲得組分B5 (5a 和 5b，280mg)、B6 (6a，76mg)。
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