一種可用于制備抗乳腺癌藥物的化合物及其制備方法、用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及與乳腺癌相關(guān)的藥物領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及對(duì)乳腺癌有治療作 用的一種含肉桂酸骨架的化合物，其制備方法以及含有它們的藥物組合物。
【背景技術(shù)】
[0002] 腫瘤是機(jī)體在各種致瘤因素作用下，局部組織的細(xì)胞在基因水平上失去對(duì)其生長(zhǎng) 的正常調(diào)控導(dǎo)致異常增生與分化而形成的新生物。新生物一旦形成，不因病因消除而停止 生長(zhǎng)，他的生長(zhǎng)不受正常機(jī)體生理調(diào)節(jié)，而是破壞正常組織與器官，這一點(diǎn)在惡性腫瘤尤其 明顯。與良性腫瘤相比，惡性腫瘤生長(zhǎng)速度快，呈浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，易發(fā)生出血、壞死、潰瘍等，并 常有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，造成人體消瘦、無(wú)力、貧血、食欲不振、發(fā)熱以及嚴(yán)重的臟器功能受損等，最 終造成患者死亡。
[0003] 惡性腫瘤的病因尚未完全了解。多年的流行病學(xué)研究及實(shí)驗(yàn)和臨床觀察，發(fā)現(xiàn)環(huán) 境與行為對(duì)人類惡性腫瘤的發(fā)生有重要影響。據(jù)估計(jì)約80%以上的惡性腫瘤與環(huán)境因素有 關(guān)。各種環(huán)境的和遺傳的致癌因素可能以協(xié)同或序貫的方式引起細(xì)胞非致死性的DNA損害， 從而激活原癌基因或（和)滅活腫瘤的抑制基因，加上凋亡調(diào)芐基因和(或)DNA修復(fù)基因的 改變，使細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的細(xì)胞可先呈多克隆性增生，經(jīng)過一個(gè)漫長(zhǎng)的多階段演進(jìn)過 程，其中某個(gè)克隆相對(duì)無(wú)限制擴(kuò)增，通過附加突變，選擇性形成不同特點(diǎn)的亞克隆，從而獲 得浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移能力，形成惡性腫瘤。因此，腫瘤從本質(zhì)上來(lái)說(shuō)是一種基因病。
[0004] 乳腺癌是全世界女性最為常見的癌癥，是由于癌細(xì)胞浸潤(rùn)并破壞正常乳房組織而 形成的一種惡性腫瘤。乳腺癌后期，癌細(xì)胞往往會(huì)擴(kuò)散到其他器官。在歐美國(guó)家，平均每四 個(gè)女性癌癥患者中就有一個(gè)患有乳腺癌。世界每年約有50萬(wàn)人死于乳腺癌。隨著當(dāng)今醫(yī)藥 科技的迅猛發(fā)展，盡管抗乳腺癌的化療藥物已不在少數(shù)，但是乳腺癌對(duì)于化療藥物的低敏 感性及化療藥物造成的副作用均已引起了醫(yī)學(xué)界的關(guān)注。
[0005] 本發(fā)明公開了一種肉桂酸骨架的化合物，可用于制備抗乳腺癌藥物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的一個(gè)目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)和不足，提供一種具有良好抗乳腺癌活 性的式I化合物。
[0007] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供制備式I的化合物的方法。
[0008] 本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供含有式I的化合物作為有效成分與一種或多種藥學(xué)上 可接受的載體、賦形劑或稀釋劑的藥用組合物共同用于治療乳腺癌。
[0009] 本發(fā)明具有式I結(jié)構(gòu)的化合物具有下述結(jié)構(gòu)式：
[0011]本發(fā)明所述式I化合物通過以下步驟合成：
[0013]化合物A與甲磺酰氯在TEA存在的條件下以DCM為溶劑反應(yīng)得到化合物B，化合物B 與化合物C在碳酸鉀存在的條件下以DMF為溶劑反應(yīng)得到化合物D，化合物D用溴化試劑處理 得到化合物E，E與四氮唑反應(yīng)得到化合物F，化合物F與化合物G在堿存在下反應(yīng)得到化合物 1〇
[0014]本發(fā)明通過體外MTT抗腫瘤活性評(píng)價(jià)發(fā)現(xiàn)，式I結(jié)構(gòu)的化合物對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株 MCF-7、4T1、MDA-MB-231、MCF-7B的生長(zhǎng)也具有顯著的抑制作用，其抑制這4株細(xì)胞生長(zhǎng)的 IC5。值分別為1.73±0.12以111、2.25±0.794111、3.72±0.534111、1.02±0.324111。因此，式1結(jié)構(gòu)的 化合物能用于制備抗乳腺癌藥物，具有良好的開發(fā)應(yīng)用前景。
[0015]以下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。
【附圖說(shuō)明】
[0016]圖1為本發(fā)明制備得到的式I化合物的1HNMR圖。
[οοπ]圖2為本發(fā)明制備得到的式I化合物的結(jié)構(gòu)式。
[0018]圖3為本發(fā)明制備得到的式I化合物的制備路線。
【具體實(shí)施方式】[0019] 實(shí)施例1:
[0020] 將3.36g(15mmol)化合物A用50mL二氯甲烷溶解在100mL圓底燒瓶中，再加入 lOOmmol三乙胺，然后在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，0°C下滴加甲磺酰氯25mmol，邊滴加邊攪拌，20分鐘后 自然升至室溫，繼續(xù)攪拌0.5小時(shí)。再加入100mL二氯甲烷，用蒸餾水lOOmLX3次洗滌，無(wú)水 硫酸鈉干燥，減壓濃縮有機(jī)相，最后采用硅膠柱色譜分離方式進(jìn)行提純，洗脫劑為石油醚/ 乙酸乙酯= 2:1，得油狀化合物B，ESI-MS，m/e= 380.02([M+NH4] + )。
[0021 ] 將15mmol化合物C用50mLDMF溶解，加入上一步得到的13mmol油狀化合物B，在80 °C下攪拌2小時(shí)，加入200mL蒸餾水淬滅，反應(yīng)結(jié)束。用飽和食鹽水100mLX3次洗滌反應(yīng)液， 無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮有機(jī)相，最后采用硅膠柱色譜分離方式進(jìn)行提純，洗脫劑為石油 醚 / 乙酸乙酯= 2:1，得化合物D，ESI-MS，m/e= 418.09([M+NH4] + )。
[0022] 1lmmol化合物D溶于20mL甲苯中，冰水浴冷卻下慢慢攪拌，慢慢滴加2 · 9g( 1lmmol) PBr3溶于2mL干燥的二氯甲烷制成的溶液，滴加完畢后反應(yīng)混合物在室溫下攪拌半小時(shí)后 傾入100mL冰水中，攪拌，用50mLX3的二氯乙烷萃取，合并萃取相，鹽水洗滌一次，無(wú)水硫酸 鈉干燥，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸去溶劑得到殘余物，而后柱層析純化，得到E的純品，ESI-MS，m/z= 480·00([Μ+Η]+)。
[0023] 將lOmmol化合物Ε和8mmol四氮唑溶于lOmLDMF中，攪拌，加入3 · 32g(24mmol)K2C03， 100°C下繼續(xù)攪拌直到原料消耗完畢（10小時(shí)）。反應(yīng)混合物傾入100mL冰水中，攪拌，用濃鹽 酸調(diào)節(jié)pH= 2，用50mLX3的二氯乙烷萃取，合并萃取相，鹽水洗滌一次，無(wú)水硫酸鈉干燥，在 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸去溶劑得到殘余物，而后柱層析純化，得到F的純品，ESI-MS，m/z= 470.11([M +H].)。
[0024] 將8mmol化合物F和8mmol二氯亞砜溶于20mL甲苯中，室溫下攪拌反應(yīng)30分鐘，后加 入3mmolTEA、lOmmol化合物G并在室溫下攪拌反應(yīng)5小時(shí)。反應(yīng)混合物傾入100mL冰水中，攪 拌，用50mLX3的二氯乙烷萃取，合并萃取相，鹽水洗滌一次，無(wú)水硫酸鈉干燥，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 儀蒸去溶劑得到殘余物，而后柱層析純化，得到I的純品，ESI-MS，m/z= 585.16([M-Hr)。
[0025] 其物理性質(zhì)：
[0026] ^-NMRiaHCDMSO):3.63(s,3H),3.63(s,3H),4.19(s,2H),4.19(d,2H),6.67(d, 1H),6.9(d,lH),7.0(d,lH),7.58(d,lH),7.72(d,lH),7.82(s,lH),8.0(s,lH),8.07(s, 1H),8.07(s,1H),8.20(s,1H),8.23(s,1H),8.92(s,1H),12.4(s,1H)〇
[0027] 元素分析:理論值:C: 51 · 27,H: 3 · 96,N: 31 · 09,S: 10 · 95。
[0028] 實(shí)測(cè)值:C: 51.21 ,H: 3.97,N: 31.11 ,S: 10.96。
[0029] 實(shí)施例2:
[0030] 本發(fā)明所述式I化合物的最大耐受性實(shí)驗(yàn)：
[0031]取體重20 ± 2g的小鼠40只，雌雄各半，按0.8mg/20g灌胃如式I化合物的濃度為 100mg/ml的混懸液，連續(xù)觀察30天內(nèi)動(dòng)物的死亡情況，結(jié)果，30天內(nèi)，所有動(dòng)物進(jìn)食活動(dòng)正 常，沒有死亡，未檢測(cè)到LD5〇，認(rèn)為其無(wú)毒。
[0032] 實(shí)施例3:
[0033] 本發(fā)明所述式I所述化合物的抗腫瘤細(xì)胞活性的測(cè)試 [0034]通過MTT法評(píng)價(jià)化合I對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制作用。
[0035] 1、主要試劑及方法：
[0036] 處于生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期的細(xì)胞:人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7、4T1、MDA-MB-231、MCF-7B(購(gòu)買自 中國(guó)科學(xué)院細(xì)胞庫(kù)以1.5X104濃度種于96孔板中。）細(xì)胞培養(yǎng)24h貼壁后吸去原來(lái)的培養(yǎng) 基。試驗(yàn)分為空白對(duì)照組、藥物處理組。空白組更換含10%胎牛血清的1640培養(yǎng)基；藥物處 理組更換含濃度為100μπι、50μπι、ΙΟμL?、ΙμπκΟ.ΙμπκΟ.ΟΙμπκΟ.ΟΟΙμL?的化合物I的培養(yǎng)基。培 養(yǎng)48h后，加入濃度5mg/mL的MTT，繼續(xù)放于C〇2培養(yǎng)箱培養(yǎng)4h，然后沿著培養(yǎng)液上部吸去100 yL上清液，加入100yLDMS0，暗處放置lOmin，利用酶標(biāo)儀（Sunrise公司產(chǎn)品）測(cè)定吸光值 (波長(zhǎng)570nm)，并根據(jù)吸光值計(jì)算細(xì)胞存貨情況，每個(gè)處理設(shè)6個(gè)重復(fù)孔。細(xì)胞存活率（％) = ΔOOmmM/ΔODs&i*x100ο
[0037] 2、結(jié)果:化合物I對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7、4T1、MDA-MB-231、MCF-7B的生長(zhǎng)具有顯 著的抑制作用。該化合物抑制人乳腺癌細(xì)胞株1〇?-7、411、1〇^-1?-231、1?^-78生長(zhǎng)的1(：50值 分別為1·73±0·12μπι、2·25±0·79μπι、3·72±0·53μπι、1·02±0·32μπι。
[0038] 由上述實(shí)施例表明，本發(fā)明的化合物I對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7、4T1、MDA-MB_231、 MCF-7B的生長(zhǎng)具有很好的抑制作用。由此證明，本發(fā)明的式I化合物具有抗乳腺癌活性，能 用制備抗乳腺癌藥物。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種式I結(jié)構(gòu)的化合物： 2. 合成權(quán)利要求1所定義的式I結(jié)構(gòu)的化合物的方法，包括以下步驟：3. 如權(quán)利要求1所定義的式I結(jié)構(gòu)的化合物在制備治療抗乳腺癌藥物方面的用途。。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種可用于制備抗乳腺癌藥物的化合物，并公開了其制備方法和用途。本發(fā)明通過體外MTT抗腫瘤活性評(píng)價(jià)發(fā)現(xiàn)，如式I化合物對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7、4T1、MDA-MB-231、MCF-7B的生長(zhǎng)也具有顯著的抑制作用。因此，本發(fā)明的化合物能用于制備抗乳腺癌藥物，其開發(fā)應(yīng)用前景良好。
【IPC分類】C07D403/14, A61P35/00
【公開號(hào)】CN105461700
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510874132
【發(fā)明人】劉久美, 慕強(qiáng), 王翠平
【申請(qǐng)人】青島市中心醫(yī)院
【公開日】2016年4月6日
【申請(qǐng)日】2015年12月2日