075]更優(yōu)選地，所述的崩解劑選自羧甲基淀粉鈉、羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素或碳 酸氫鈉。
[0076]本發(fā)明使用崩解劑的量是以所述藥物組合物總重量計5.0-15.0%。
[0077]根據(jù)本發(fā)明，所述的潤滑劑應(yīng)該理解是一種有利于提高片劑在制粒過程中的流動 性，防止片劑材料粘附在制片機模子上，有利于片劑脫模的化學(xué)物質(zhì)。
[0078]所述的潤滑劑選自滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、微粉硅膠或聚乙二醇。
[0079]優(yōu)選地，所述的潤滑劑選自滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂或聚乙二醇。
[0080] 更優(yōu)選地，所述的潤滑劑選自滑石粉或硬脂酸鈣。
[0081] 本發(fā)明使用潤滑劑的量是以所述藥物組合物總重量計0.5-3.0%。
[0082] 根據(jù)本發(fā)明，所述的矯味劑應(yīng)該理解是在藥品中用以改善或屏蔽藥物不良?xì)馕逗?味道，使病人難以覺察藥物強烈苦味或其它異味，例如辛辣、刺激等的藥用輔料。
[0083] 所述的矯味劑例如選自單糖漿、蔗糖、卵磷脂、橙皮糖漿或櫻桃糖漿的甜味劑;檸 檬、茴香或薄荷油的芳香劑;海藻酸鈉、阿拉伯膠、明膠、甲基纖維素或羧甲基纖維素鈉的膠 漿劑;檸檬酸、酒石酸與碳酸氫鈉混合物的泡騰劑。
[0084] 優(yōu)選地，所述的矯味劑選自單糖漿、蔗糖、橙皮糖漿或櫻桃糖漿的甜味劑;檸檬或 薄荷油的芳香劑;海藻酸鈉、阿拉伯膠、明膠或羧甲基纖維素鈉的膠漿劑;酒石酸與碳酸氫 鈉混合物的泡騰劑。
[0085] 更優(yōu)選地，所述的矯味劑選自蔗糖、橙皮糖漿或櫻桃糖漿的甜味劑;檸檬油芳香 劑;海藻酸鈉或阿拉伯膠的膠漿劑;酒石酸與碳酸氫鈉混合物的泡騰劑。
[0086] 本發(fā)明使用矯味劑的量是以所述藥物組合物總重量計0.5%_2.0%。
[0087]本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM737菌劑可以與在藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑組合制 成各種劑型，例如顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑或口服液，其中在藥學(xué)上可接受的載體或賦形 劑可以根據(jù)不同劑型進行選擇，所使用的這些載體或賦形劑及其用量對于制藥技術(shù)領(lǐng)域的 普通技術(shù)人員都是容易確定的，也是顯而易見的。
[0088]在本發(fā)明中，采用制藥技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員熟知的普遍使用的方法和設(shè)備制 備本發(fā)明藥物顆粒劑、膠囊劑、片劑、丸劑或口服液。
[0089]所述的"劑型"一般應(yīng)該理解是適用于人的單劑量藥物形式，單個劑型含有為達到 所需藥量的預(yù)定活性物質(zhì)，例如本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM737菌劑。
[0090]在本發(fā)明中，所述的發(fā)酵劑是將植物乳桿菌CCFM737菌種重懸于保護劑并通過冷 凍干燥后得到的活體菌粉。
[0091]所述發(fā)酵劑的制備方法如下：
[0092]A、培養(yǎng)基的制備：使用以所述培養(yǎng)基總重量計87.7 %水將10 %酶水解脫脂乳、 0.5%葡萄糖、1.5%胰蛋白胨與0.3%酵母浸膏溶解，然后調(diào)整其pH為6.8,這樣得到所述的 培養(yǎng)基；
[0093]B、保護劑的制備:使用水與保護劑原料制備得到含有100g/L脫脂奶粉、30mlVL甘 油、l〇〇g/L麥芽糊精、150g/L海藻糖、10g/LL-谷氨酸鈉的保護劑；
[0094]C、植物乳桿菌CCFM737按照以所述培養(yǎng)基的重量計2-4%接種量接種到在溫度 110-120°C下滅菌8-12min的所述培養(yǎng)基中，然后在溫度37°C下培養(yǎng)18h，用pH7.2磷酸鹽緩 沖液清洗2-4次，用所述保護劑重懸達到濃度101()CFU/ml;接著，讓該懸浮液在溫度37°C下預(yù) 培養(yǎng)60min，再采用凍干法制成所述的發(fā)酵劑。
[0095]本發(fā)明的植物乳桿菌CCFM737具有耐酸性，在體外對PF0S有良好的耐受和吸附能 力，可緩解小鼠PF0S暴露導(dǎo)致的毒性損傷。所述的植物乳桿菌CCFM737可用于制備具有緩解 PF0S毒性損傷功能的藥物組合物與發(fā)酵劑，具有非常廣泛的應(yīng)用前景。 【【附圖說明】】
[0096]圖1是10株乳酸菌和717陰離子交換樹脂對PF0S的吸附情況比較。
[0097] 其中：CCFM737，CCFM240和CCFM241為植物乳桿菌；CCFM14為羅伊氏乳桿菌； CCFM419為發(fā)酵乳桿菌;CCFM15為加氏乳桿菌;CCFM29和CCFM4為保加利亞乳桿菌;CCFM136 為高加索酸奶乳桿菌。CCFM6為嗜酸乳桿菌;CCFM5為干酪乳桿菌;717樹脂為717陰離子交換 樹脂。
[0098] 圖2是植物乳桿菌CCFM737對PF0S暴露導(dǎo)致的小鼠血清41^431'41^，丫-61'活性異 常的恢復(fù)作用；a，b，a'，b'A，B，A'，B'表示不同字母所代表的組別都存在顯著性差異(p〈0.05)〇
[0099] 圖3是植物乳桿菌CCFM737對PF0S暴露導(dǎo)致的小鼠肝臟中氧化酶(SOD，CAT，GSH，T- A0C)以及MDA酶的活性異常的緩解作用；不同字母所代表的組別都存在顯著性差異（p〈0.05)〇
[0100] 圖4是植物乳桿菌CCFM737對PF0S暴露導(dǎo)致的小鼠血清炎癥因子IL-2，IL-4，IL-6， TNF-β，IFN-γ水平異常的恢復(fù)作用;不同字母所代表的組別都存在顯著性差異(p〈0.05)。 [0101] 圖5是植物乳桿菌CCFM737的菌體形態(tài)(1000X)。
[0102] 圖6是植物乳桿菌CCFM737的菌落形態(tài)。 【【具體實施方式】】
[0103]實施例1:植物乳桿菌CCFM737對PF0S的耐受能力實驗
[0104] 植物乳桿菌CCFM737對PF0S耐受能力通過最低抑制濃度（MIC)方法測定。配制 100mg/L的PF0S溶液作為PF0S的母液，然后用孔徑大小為0.22μπι的無菌過濾器進行過濾。將 除菌后的PF0S母液按比例添加于MRS瓊脂培養(yǎng)基中混勻，使其終濃度分別為1.0，2.0，5.0， 10,20,30,50!^/1，并分別澆注平板。將每個瓊脂平板劃分為四等份，各在每個分區(qū)各滴加 10yL植物乳桿菌CCFM737菌懸液，每個PF0S濃度的平板做2個平行，并以不添加PF0S的瓊脂 平板作為空白對照。在37°C下培育48h后記錄每個分區(qū)中滴加菌的生長情況。抑制菌株生長 的最低PF0S濃度即為菌株的PFOSMIC。從而得到如附表1所示的植物乳桿菌CCFM737對PF0S 的MIC值。由附表1可以看出，本發(fā)明植物乳桿菌CCFM737對PF0S的具有良好的耐受能力。 [0105] 表1PF0S對植物乳桿菌CCFM737的最低抑制濃度(MIC)
[0107]實施例2:植物乳桿菌CCFM737對PF0S的吸附能力實驗 [0108]在體外含PF0S水溶液中孵育，對PF0S有良好的吸附能力
[0109]菌體吸附：在無菌條件下，按照耐酸性(在pH3.0能夠生長）的篩選標(biāo)準(zhǔn)，從我國傳 統(tǒng)食品，例如泡菜，發(fā)酵奶酒中篩選出10株乳酸菌。對這10株乳酸菌進行純化和活化培養(yǎng) 后，按1%(ν/ν)接種量接于MRS液體培養(yǎng)基，37°C培養(yǎng)20h。然后在10000r/min條件下離心 20min，取沉淀用超純水清洗后繼續(xù)在10000r/min條件下離心20min，取沉淀得到活菌體細(xì) 胞，即濕菌體。將濕菌體重懸在50mg/LPF0S溶液中，并使最終菌體濃度達到lg干菌體/L(將 濕菌體重懸在不含PF0S的超純水中作為空白對照）。使用0.1M的NaOH或HC1溶液將含菌液的 PF0S溶液的pH迅速調(diào)整至3.0，添加少量的NaOH或HC1 (小于0.5mL)其離子強度對PF0S吸附 的影響可以忽略。隨后將裝有l(wèi)〇〇mL樣液的250mL錐形瓶置于37°C、150rpm搖床培養(yǎng)，6h后取 樣測定，2次平行試驗取平均值。
[0110] 717陰離子交換樹脂吸附：在250mL錐形瓶中加入lOOmLPFOS溶液和定量717陰離子 交換樹脂，并使最終吸附劑濃度達到lg吸附劑/L，使用0.1M的NaOH或HC1溶液將含717陰離 子交換樹脂的PF0S溶液的pH迅速調(diào)整至3.0。將錐形瓶置于恒溫?fù)u床中在37°C、150rpm條件 下進行吸附實驗。6h時取少量上清液(O.lmL)，并用0.22mm的水膜過濾，以期測定717陰離子 交換樹脂對PF0S的吸附能力。
[0111] PF0S吸附量的測定：
[0112] 吸附實驗后，樣液在10000r/min下離心20分鐘，并用0.22μπι的水膜過濾。PF0S的濃 度用具有WatersSYNAPTMS系統(tǒng)的UPLC-MS測定，采用AcquityUPLCBEHC18柱（2·lX 100mm，1.7ym，WatersCo·)，柱溫35°C，進樣量為lyL。用100% (ν/ν)的乙腈溶液(溶液Α)和 0.1 % (ν/ν)甲酸水溶液(溶液Β)作為洗脫液，進行梯度清洗，流速是0.3mL/min，進樣量lyL。 梯度洗脫條件如表2所示：
[0113] 表2梯度洗脫條件
[0114]
[0115] 質(zhì)譜條件：電離源為ESI源；MRM檢測；MS+檢測；Capi1lary(毛細(xì)管）：3 ·OkV;Cone (椎體）：40.00V;SourceTemperature(放射源溫度）：120°C;Desolvation(去溶劑化)溫度： 400°C;ConcGasFlow:50L/h;DesolvationGasFlow:700L/h。氣體流速為O.lmL/min;質(zhì) 荷比掃描范圍：100-2000;掃面時間Is，間隔0.061s。結(jié)果用MassLynxV4.1 (Waters公司）分 析;在這項研究中，PF0S的檢測限為:0.1-5.Oppm。根據(jù)吸附前后PF0S的濃度差異計算乳酸 菌和717陰離子交換樹脂分別對PF0S的吸附量。這些測定結(jié)果列于附圖1中。
[0116] 附圖1清楚地表明，與其它試驗菌株相比，本發(fā)明植物乳桿菌CCFM737對PF0S的吸 附量最大，且其干重吸附率超過等質(zhì)量717陰離子交換樹脂的吸附率，因此，植物乳桿菌 CCFM737對PF0S具有良好的吸附能力。
[0117]實施例3:植物乳桿菌CCFM737灌喂小鼠的耐受劑量實驗
[0118] 將植物乳桿菌CCFM737凍干菌粉重懸于脫脂乳中，制成濃度為5.0X109cfu/mL的 懸液。取約20-25g健康雄性C57BL/6J小鼠10只，每日給予該濃度懸液灌胃一次，觀察一周， 記錄死亡和體重情況