一種色調(diào)為Firebrick2的梔子紅色素的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種色調(diào)為FirebriCk2的梔子紅色素的制備方法，本發(fā)明方法所生產(chǎn) 出的梔子紅色素是一種接近大紅的顏色，將其配制成吸光值為0.500的梔子紅色素液體，置 于比色管中觀察，得到它的R值為238，G值為44，B值為44。
【背景技術(shù)】
[0002] 目前，國(guó)內(nèi)對(duì)梔子紅色素的研究較多，但大多數(shù)都是集中在如何制取梔子紅色素， 并沒(méi)有對(duì)梔子紅色素的色調(diào)做進(jìn)一步的研究。如中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枮?01110058988.3,名稱(chēng) 為一種梔子紅色素的制備方法，該方法以吸附了京尼平苷的樹(shù)脂為反應(yīng)介質(zhì)，進(jìn)行異相酯 水解、酸化和酶解化轉(zhuǎn)化，經(jīng)酸沉淀富集和后續(xù)工藝，制備梔子紅色素；中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枮?201310227865.7，名稱(chēng)為一種梔子紅色素的生產(chǎn)和精制方法，是將梔子黃水提液經(jīng)大孔樹(shù) 脂吸附平衡后，上柱，經(jīng)去離子水和20 %乙醇洗脫得到梔子苷液，梔子苷液濃縮去醇后加入 氫氧化鈉進(jìn)行堿解反應(yīng)，再加入檸檬酸進(jìn)行酸化，將預(yù)處理后的梔子苷和谷氨酸鈉加入黑 曲霉發(fā)酵液中，保溫反應(yīng)得到梔子紅色素轉(zhuǎn)化液；中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)枮?01010186757.6，名稱(chēng) 為一種利用固定化酶制備梔子紅色素的方法，是以京尼平苷為原料，通過(guò)堿解、酸化、加入 固定化酶酶解，過(guò)濾得酶解液，再加入伯胺基化合物反應(yīng)，過(guò)濾得梔子紅色素溶液。
[0003] 但是以上這些方法均只是籠統(tǒng)的對(duì)梔子紅色素的生產(chǎn)方法以及工藝條件方面的 研究，通過(guò)各種各樣的方法制備出梔子紅色素，而并沒(méi)有對(duì)梔子紅色素的色調(diào)做進(jìn)一步的 研究，我們通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，不同方法、不同工藝條件下，制備出的梔子紅色素在色調(diào)上有很 大差別，如大紅色、暗紅色、紫紅色、深紅色等。目前在市場(chǎng)上最常見(jiàn)的梔子紅色素就是用檸 檬酸和丙氨酸制備得到的，這種色素顯示出的顏色是紅中帶著一些紫色，是一種紫紅色色 素，而不同區(qū)域、不同用途的客戶往往對(duì)色素的顏色要求是不同的，如韓國(guó)、日本等國(guó)家的 客戶，需要的色素其R值為238，G值為44，B值為44,名稱(chēng)為Firebrick2的一種接近大紅的色 彩。因此，如何按照客戶需求，制備出特定色調(diào)的梔子紅色素，成為行業(yè)內(nèi)亟待解決的問(wèn)題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的就是提供一種色調(diào)為FirebriCk2的梔子紅色素的制備方法，本發(fā)明 方法所生產(chǎn)出的梔子紅色素是一種接近大紅的顏色，將其配制成吸光值為0.500的梔子紅 色素液體，置于比色管中觀察，得到它的R值為238，G值為44，B值為44。
[0005] 本發(fā)明的一種色調(diào)為Firebrick2的梔子紅色素的制備方法，包括下述步驟：
[0006] (1)京尼平苷酸的制備；
[0007] 取色價(jià)=2000的京尼平苷液體，加入液體質(zhì)量15%的氫氧化鈉固體，置于室 溫下，放置9天，得到京尼平苷酸，過(guò)濾，備用；
[0008] (2)酶解、氨基酸反應(yīng)
[0009]取步驟（1)中制備的京尼平苷酸，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為85%的磷酸調(diào)節(jié)pH至5.20，再加 入京尼平苷酸質(zhì)量0.01 %的β-糖苷酶和京尼平苷酸質(zhì)量2.0 %的L-組氨酸，置于45°C水浴 鍋中，反應(yīng)72小時(shí)，得反應(yīng)液；
[0010] ⑶滅菌、過(guò)濾
[0011]將反應(yīng)液升溫到95°C，保溫30min，滅活，在攪拌下用冷卻水循環(huán)快速冷卻至室溫， 得梔子紅色素粗液，將梔子紅色素粗液先進(jìn)行板框過(guò)濾，再向?yàn)V液中加入濾液質(zhì)量12%的 硅藻土，攪拌均勻，抽濾，得梔子紅色素澄清液；
[0012] ⑷上樹(shù)脂柱吸附、洗脫
[0013] 將梔子紅色素澄清液上經(jīng)過(guò)活化處理的LS-300樹(shù)脂柱，控制流出液流速為5ml/ min，待所有澄清液上柱后，先用3-4BV純水沖洗樹(shù)脂柱，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50 %的乙醇水溶液 洗脫，控制洗脫流速為4ml/min，直至流出的洗脫液顏色變?yōu)闊o(wú)色，收集解析液；
[0014] (5)濃縮、噴干
[0015] 將洗脫液用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至色價(jià)=25,再用噴干塔噴干，用紫外-可見(jiàn)分 光光度計(jì)檢測(cè)，并配制成吸光值為0.500的梔子紅色素液體，置于比色管中觀察，得到它的R 值為238，G值為44，B值為44，即得色調(diào)為Firebrick2的梔子紅色素。
[0016] 本發(fā)明方法是發(fā)明人在經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上得到的，發(fā)明人在實(shí)驗(yàn)中發(fā) 現(xiàn)，不同的京尼平苷含量、不同種類(lèi)的酸以及不同種類(lèi)的氨基酸，都會(huì)對(duì)反應(yīng)液生成梔子紅 色素的色調(diào)有很大影響，針對(duì)不同的反應(yīng)條件，得到的反應(yīng)液顏色也會(huì)有很大差別，因此， 為獲得本發(fā)明需求的梔子紅色素，發(fā)明人進(jìn)行了一系列的實(shí)驗(yàn)研究，具體實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下： [00 17] 1.色調(diào)的檢測(cè)方法
[0018] 取京尼平苷酸、水解酶、與氨基酸的反應(yīng)液，在分光光度計(jì)上，用純凈水配制吸光 值在0.500處得色素稀釋液，置于比色管中觀察，并確定其R、G、B值。
[0019] 2.京尼平苷含量的選擇
[0020] 取不同色價(jià)的京尼平苷，加入不同質(zhì)量的氫氧化鈉，在不同溫度下，反應(yīng)不同天 數(shù)，用磷酸調(diào)節(jié)液體pH至5.20，加入L-組氨酸、β-糖苷酶，在45°C的水浴鍋中反應(yīng)72小時(shí)，得 到京尼平苷酸。結(jié)果測(cè)試梔子紅色素的色價(jià)（Eff)?見(jiàn)下表1、表2。
[0021] 表1因素水平表
[0022]
[0023] 表2正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0024]
[0025]從上表1及表2可以看出，實(shí)驗(yàn)號(hào)為8號(hào)時(shí)，梔子紅色素的色調(diào)與我們的目標(biāo)色調(diào)一 樣，且它的梔子紅色素的色價(jià)值最高，綜合各個(gè)方面，選用的最優(yōu)工藝條件是京尼平苷含量 E=°=2000,氫氧化鈉添加量:15% (京尼平苷的重量百分比），溫度:室溫，時(shí)間：9天。
[0026] 3.無(wú)機(jī)酸的選擇
[0027] 取EL了Λ=2000的京尼平苷，加入其重量15%的氫氧化鈉，經(jīng)過(guò)9天反應(yīng)得到京尼平 苷酸液體，取其液體l〇〇g六份，分別編號(hào)，加入不同的無(wú)機(jī)酸調(diào)節(jié)ρΗ= 5.2，再各加入0.0lg 的β-糖苷酶，2.0g的L-組氨酸，置于45°C水浴鍋中，反應(yīng)72小時(shí)，結(jié)果見(jiàn)下表3。
[0028] 表3無(wú)機(jī)酸的選擇對(duì)梔子紅色素色調(diào)的影響
[0029]
[0030] 由上表3可以看出，不同的無(wú)機(jī)酸對(duì)梔子紅色素的色調(diào)影響較大，甚至能導(dǎo)致我們 的反應(yīng)液不變顏色，從上述色差值上可以看出，只有用磷酸調(diào)節(jié)京尼平苷酸液體的pH值，得 到的梔子紅色素的色調(diào)才是我們需要的，其他酸均不可用。
[0031] 4.氨基酸的選擇
[0032] 取京尼平苷酸液體100g六份，分別編號(hào)，用磷酸液體調(diào)節(jié)pH=5.2，再各加入0.Olg 糖苷酶，2.0g的不同種類(lèi)的氨基酸，置于45°C水浴鍋中，反應(yīng)72小時(shí)，結(jié)果如下表4所示。
[0033]表4氨基酸的選擇對(duì)梔子紅色素色調(diào)的影響
[0034]
[0035]由上表4可以看出，不同的氨基酸，在相同條件下反應(yīng)，得到的梔子紅色素的色調(diào) 是不一樣的，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，氨基酸為L(zhǎng)-組氨酸時(shí)反應(yīng)液顏色的1?:238,6:44,8:44，與我們 目標(biāo)色調(diào)一致，其他氨基酸所得色差值相差較遠(yuǎn)，故選擇L-組氨酸為所需氨基酸。
[0036]本發(fā)明方法工藝簡(jiǎn)單，操作方便，通過(guò)采用特定的工藝條件和原料，得到目標(biāo)色調(diào) 的梔子紅色素，為不同色調(diào)的梔子紅色素的生產(chǎn)方法提供了新的思路，擴(kuò)大了梔子紅色素 的應(yīng)用范圍。
【具體實(shí)施方式】
[0037] 實(shí)施例1
[0038]-種色調(diào)為Firebrick〗的梔子紅色素的制備方法，其特征在于包括下述步驟： [0039] (1)京尼平苷酸的制備；
[0040] 取色價(jià)E丨：°=2〇()()的京尼平苷液體，加入液體質(zhì)量15%的氫氧化鈉固體，置于室 溫下，放置9天，得到京尼平苷酸，過(guò)濾，備用；
[0041] (2)酶解、氨基酸反應(yīng)
[0042]取步驟（1)中制備的京尼平苷酸，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為85 %的磷酸調(diào)節(jié)pH至5.20，再加 入京尼平苷酸質(zhì)量0.01 %的β-糖苷酶和京尼平苷酸質(zhì)量2.0 %的L-組氨酸，置于45°C水浴 鍋中，反應(yīng)72小時(shí)，得反應(yīng)液；
[0043] ⑶滅菌、過(guò)濾
[0044]將反應(yīng)液升溫到95°C，保溫30min，滅活，在攪拌下用冷卻水循環(huán)快速冷卻至室溫， 得梔子紅色素粗液，將梔子紅色素粗液先進(jìn)行板框過(guò)濾，再向?yàn)V液中加入濾液質(zhì)量12%的 硅藻土，攪拌均勻，抽濾，得梔子紅色素澄清液；
[0045] (4)上樹(shù)脂柱吸附、洗脫
[0046] 將梔子紅色素澄清液上經(jīng)過(guò)活化處理的LS-300樹(shù)脂柱，控制流出液流速為5ml/ min，待所有澄清液上柱后，先用3-4BV純水沖洗樹(shù)脂柱，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50 %的乙醇水溶液 洗脫，控制洗脫流速為4ml/min，直至流出的洗脫液顏色變?yōu)闊o(wú)色，收集解析液；
[0047] (5)濃縮、噴干
[0048]將洗脫液用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至色價(jià)Ε^=25,再用噴干塔噴干，用紫外-可見(jiàn)分 光光度計(jì)檢測(cè)，并配制成吸光值為0.500的梔子紅色素液體，置于比色管中觀察，得到它的R值為238，G值為44，B值為44，即得色調(diào)為Firebrick2的梔子紅色素。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種色調(diào)為Firebrick〗的梔子紅色素的制備方法，其特征在于包括下述步驟： (1) 京尼平苷酸的制備； 取色價(jià)El: :=2000的京尼平苷液體，加入液體質(zhì)量15%的氫氧化鈉固體，置于室溫下，放 置9天，得到京尼平苷酸，過(guò)濾，備用； (2) 酶解、氨基酸反應(yīng) 取步驟（1)中制備的京尼平苷酸，加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為85%的磷酸調(diào)節(jié)pH至5.20,再加入京 尼平苷酸質(zhì)量〇. 01%的β-糖苷酶和京尼平苷酸質(zhì)量2.0%的L-組氨酸，置于45°C水浴鍋中，反 應(yīng)72小時(shí)，得反應(yīng)液； (3) 滅菌、過(guò)濾 將反應(yīng)液升溫到95°C，保溫30min，滅活，在攪拌下用冷卻水循環(huán)快速冷卻至室溫，得梔 子紅色素粗液，將梔子紅色素粗液先進(jìn)行板框過(guò)濾，再向?yàn)V液中加入濾液質(zhì)量12%的硅藻 土，攪拌均勻，抽濾，得梔子紅色素澄清液； (4) 上樹(shù)脂柱吸附、洗脫 將梔子紅色素澄清液上經(jīng)過(guò)活化處理的LS-300樹(shù)脂柱，控制流出液流速為5ml/min，待 所有澄清液上柱后，先用3-4BV純水沖洗樹(shù)脂柱，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為50%的乙醇水溶液洗脫，控 制洗脫流速為4ml/min，直至流出的洗脫液顏色變?yōu)闊o(wú)色，收集解析液； (5) 濃縮、噴干 將洗脫液用真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至色價(jià)較1=25,再用噴干塔噴干，用紫外-可見(jiàn)分光光 度計(jì)檢測(cè)，并配制成吸光值為0.500的梔子紅色素液體，置于比色管中觀察，得到它的R值為 238，G值為44，B值為44，即得色調(diào)為Fir ebr i ck2的梔子紅色素。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種色調(diào)為Firebrick2的梔子紅色素的制備方法，是先在色價(jià)？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？？=2000的京尼平苷液中加入氫氧化鈉，置于室溫下反應(yīng)得到京尼平苷酸，然后調(diào)節(jié)京尼平苷酸的pH至5.20，再加入β-糖苷酶和L-組氨酸，45℃水浴下反應(yīng)72小時(shí)，升溫到95℃，保溫30min，滅活，快速冷卻至室溫，得梔子紅色素粗液，把粗液經(jīng)過(guò)板框布過(guò)濾，在與濾液中加入硅藻土過(guò)濾得到梔子紅色素澄清液，再將澄清液上LS-300樹(shù)脂柱吸附、洗脫，洗脫液真空濃縮至色價(jià)=25，噴干，即得到R值為238，G值為44，B值為44，色調(diào)為Firebrick2的梔子紅色素；本發(fā)明方法通過(guò)特定的工藝條件和原料，得到特定色調(diào)的色素，為梔子紅色素的推廣應(yīng)用提供新的途徑。
【IPC分類(lèi)】C12P17/12, C09B61/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105463039
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510876114
【發(fā)明人】胡銀銀, 倪建輝
【申請(qǐng)人】武漢綠孚生物工程有限責(zé)任公司
【公開(kāi)日】2016年4月6日
【申請(qǐng)日】2015年12月2日