化合物，和藥學(xué)上可接受載體，任選包含一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。
[0069] 此外，本發(fā)明還包括一種適于腸胃外給予哺乳動(dòng)物的藥物組合物，包含上述通式 (I)的任一化合物，和藥學(xué)上可接受載體，任選包含一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。
[0070] 發(fā)明詳述
[0071] 所用定義和術(shù)語：
[0072] "各種氨基酸制備的胺基"是指將各種氨基酸的氨基，優(yōu)選疏水性氨基酸，如甘氨 酸，丙氨酸，纈氨酸，亮氨酸，異亮氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸，絲氨酸，蘇氨酸，甲硫氨酸。
[0073] "芳氨基"是指芳香族碳環(huán)末端連有氨基的基團(tuán)，優(yōu)選的芳環(huán)含有6-10個(gè)碳原子。 [0074] "環(huán)烷氨基"指取代或?yàn)槿〈?，飽和或不飽和的環(huán)狀末端連有胺基的基團(tuán)，其含 有碳原子和/或一個(gè)或多個(gè)雜原子。該環(huán)可以是單環(huán)或稠環(huán)，橋環(huán)或螺環(huán)的環(huán)系。單環(huán)通常 有3-9個(gè)原子，優(yōu)選有4-7個(gè)原子，多環(huán)含有7-17個(gè)原子，優(yōu)選含有7-13個(gè)原子。
[0075] "藥學(xué)上可接受的鹽"是指式（I)化合物具有療效且無毒的鹽形式。其可有任意酸 性基團(tuán)（如羧基)形成陰離子鹽，或由任意堿性基團(tuán)（如氨基)形成陽離子鹽。本領(lǐng)域已知許 多這樣的鹽。在任何酸性基團(tuán)（如羧基)上形成的陽離子鹽，或是在任何堿性基團(tuán)（如氨基） 上形成的陰離子鹽，這些鹽有許多是本領(lǐng)域已知的，如陽離子鹽包括堿金屬（如鈉和鉀）和 堿土金屬(鎂和鈣）的鹽以及有機(jī)鹽（如銨鹽）。還可通過使用相應(yīng)的酸處理堿性形式的（I) 方便的獲得陰離子鹽，這樣的酸包括無機(jī)酸如硫酸，硝酸，磷酸等;或有機(jī)酸如乙酸，丙酸， 羥基乙酸，2-羥基丙酸，2-氧代丙酸，草酸，丙二酸，琥珀酸，馬來酸，富馬酸，蘋果酸，酒石 酸，2-羥基-1，2，3-丙二酸，乙磺酸，苯甲磺酸，4-甲基苯磺酸，環(huán)己基亞磺酸，2-羥基苯甲 酸，4-氨基-2-羥基苯甲酸等。此外，熟練技術(shù)人員可根據(jù)溶解度，穩(wěn)定性，容易制劑等因素 取某種鹽而舍另一種鹽。這些鹽的測定和最優(yōu)化在熟練技術(shù)人員的經(jīng)驗(yàn)范圍內(nèi)。
[0076] "溶劑合物"是溶質(zhì)(如金屬蛋白酶抑制劑)和溶劑(如水)組合形成的配合物。參見 J.Honig等，The Van Nostrand Chemist's Dictionary，p.650(1593)。本發(fā)明米用的藥學(xué) 上可接受的溶劑包括不干擾金屬蛋白酶抑制劑的生物活性的那些溶劑（例如水，乙醇，乙 酸，N，N-二甲基甲酰胺，二甲基亞砜以及該領(lǐng)域技術(shù)人員所指的或容易確定的溶劑）。
[0077] 本文所用的"光學(xué)異構(gòu)體"，"對映體"，"非對映體"，"消旋體"等定義了本發(fā)明化合 物或生理上的衍生物所有可能的立體異構(gòu)體的形式。除非另有指示，本發(fā)明化合物的化學(xué) 命名包括所有可能的立體化學(xué)形式的混合物，所屬混合物包含基本結(jié)構(gòu)分子的所有非對映 體和對映體，以及基本純凈的本發(fā)明化合物的單個(gè)異構(gòu)體形式，即其中含有低于10%，優(yōu)選 低于5%，特別是低于2%，最優(yōu)選低于1%的其他異構(gòu)體。本發(fā)明類肽化合物各種立體異構(gòu) 體形式均明顯包含于本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0078] 式I化合物還可以其他被保護(hù)的形式或衍生物的形式存在，這些形式對本領(lǐng)域技 術(shù)人員而言是顯而易見的，均應(yīng)該包含于本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0079] 如上所述的取代基自身還可被一個(gè)或多個(gè)取代基取代，優(yōu)選的取代基包括，例如 烷基，烯基，烷氧基，羥基，氧基，硝基，氣基，氣基烷基(如氣甲基等），氛基，齒，駿基，幾基燒 氧基(如幾基乙氧基等），硫基，芳基，環(huán)烷基，雜芳基，雜環(huán)烷基(如呢陡基，嗎琳基，啦略基 等），亞氨基，羥烷基，芳基氧基，芳基烷基，及其結(jié)合。
[0080] 對化合物的抑酶活性的評價(jià)，我們以hela細(xì)胞提取物(含HDAC1，2,3,8的混合酶）， 用HDACs熒光分析方法進(jìn)行測試，分為兩步，第一步，HDAC熒光底物(含一個(gè)乙?；馁嚢彼?側(cè)鏈-8〇〇-1^8(&〇的71)41〇用含!104(：活性的樣本孵育（如此1 &細(xì)胞核提取液，表達(dá)的 HDAC8等），使底物去乙?；?，激活底物。第二步，用胰酶水解Boc-Lys-AMC，產(chǎn)生AMC這一熒 光基團(tuán)（或發(fā)色團(tuán)），在發(fā)射波長/激發(fā)波長(390nm/460nm)測定熒光強(qiáng)度。見下面的反應(yīng)式 II：
[0082] 反應(yīng)式II中Histone deacetylase為組蛋白去乙?；福琓rypsin為胰蛋白酶，4-amino-7-methylcoumarin為4-氨基-7-甲基香豆素。化合物的體外抗腫瘤細(xì)胞活性的測試 我們采用價(jià)1'比色法，]\0'1'全稱為3-(4,5)-(1丨1116讓71訃丨31^32〇(-211)-3,5-(1卜 phenytetrazol iumromide，漢語化學(xué)名為3_(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽， 商品名為噻唑藍(lán)。是一種黃顏色的染料。
[0083]化合物的細(xì)胞活性的測試使用噻唑蘭檢測法(MTT法），MTT比色法是一種檢測細(xì)胞 存活和生長的方法。其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為 水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜(Formazan)并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜 (DMS0)能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶標(biāo)儀在570nm波長處測定其光吸收值可間接反映活細(xì)胞 數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比，進(jìn)而測得目標(biāo)化合物對腫 瘤細(xì)胞的抑制率。
[0084] 四、含有本發(fā)明化合物的藥物組合物
[0085] 本發(fā)明的部分延伸物可以游離形式或以鹽形式存在。本領(lǐng)域技術(shù)人員已知許多化 合物類型的藥學(xué)上可接受的鹽及其制備方法。藥學(xué)上可接受的鹽包括常規(guī)的無毒性的鹽， 包括這樣的化合物堿與無機(jī)或有機(jī)酸形式的季銨鹽。
[0086] 本發(fā)明的化合物可形成水合物或溶劑合物。本領(lǐng)域數(shù)熟練人員已知將化合物與水 一起凍干時(shí)形成的水合物或在溶液中與合適的有機(jī)溶劑濃縮時(shí)形成溶劑合物的方法。
[0087] 本發(fā)明包含含有治療量本發(fā)明化合物的藥物，和一種或多種藥學(xué)上可接受載體 和/或賦形劑的藥物組合物。載體包括鹽水，緩沖鹽水，葡萄糖，水，甘油，乙醇和他們的結(jié)合 物，下文更詳細(xì)的論述。如果需要，該組合物還可以包含較小量的潤濕劑或乳化劑，或pH緩 沖劑。該組合物可以是液體，懸浮液，乳液，片劑，丸劑，膠囊，持續(xù)釋放制劑或粉末。該組合 物可以用傳統(tǒng)的黏合劑和載體如三酸甘油酯配置成栓劑?？诜苿┛梢园?biāo)準(zhǔn)載體如藥 物品級的甘露糖醇，乳糖，淀粉，硬脂酸鎂，糖精鈉，纖維素和碳酸鎂等。視需要制劑而定，配 置成可以設(shè)計(jì)混合，制粒和壓縮或溶解成分。在另一途徑中，該組合物可以配置成納米顆 粒。
[0088] 使用的藥物載體可以為固體或者液體。
[0089] 典型的固體載體包括乳糖，石膏粉，蔗糖，滑石，凝膠，瓊脂，果膠，阿拉伯膠，硬脂 酸鎂，硬脂酸等。固體載體可以包括一種或多種可能同時(shí)作為增香劑，潤滑劑，增溶劑，懸浮 劑，填料，助流劑，壓縮助劑，粘合劑或片劑-崩解劑的物質(zhì)；他還可以是包封材料。在粉末 中，載體為精細(xì)粉碎的固體，它與精細(xì)粉碎的活性成分混合。在片劑中活性成分與具有必要 的壓縮性質(zhì)的載體以合適的比例混合，以需要的形狀和大小壓縮。粉末和片劑優(yōu)選包含至 多99 %活性成分。合適的固體載體包括，例如，磷酸鈣，硬脂酸鎂，滑石，糖，乳糖，糊精，淀 粉，凝膠，纖維素，甲基纖維素，羧甲基纖維素鈉鹽，聚乙烯吡咯烷酮，低熔點(diǎn)蠟和離子交換 樹脂。
[0090] 典型的液體載體包括糖漿，花生油，橄欖油，水等。押題載體用于制備溶液，懸浮 液，乳劑，糖漿，酊劑和密封的組合物。活性成分可以溶解或懸浮于藥學(xué)上可以接受的液體 載體如水，有機(jī)溶劑，而這的混合物或藥學(xué)上可接受的油類或脂肪。液體載體可以包含其他 合適的藥物添加劑如增溶劑，乳化劑，緩沖劑，防腐劑，增甜劑，增香劑，懸浮劑，增稠劑，顏 料，粘度調(diào)節(jié)劑，穩(wěn)定形或滲透壓-調(diào)節(jié)劑。用于口服和腸胃外給藥的液體載體的合適的例 子包括水（部分地包含如同上述的添加劑，例如纖維素衍生物，優(yōu)選羧甲基纖維素鈉鹽溶 液），醇(包括一元醇和多元醇，例如乙二醇)和他們的衍生物，和油類(例如分餾椰子油和花 生油）。用于腸胃外給藥的載體還可以為油脂如油酸乙酯和異丙基肉豆蔻酸鹽。無菌的液體 載體用于腸胃外給藥的無菌的液態(tài)組合物。用于加壓組合物的液態(tài)載體可以為鹵代烴或其 他藥學(xué)上可接受的推進(jìn)劑。無菌溶液或懸浮溶液液體藥物組合物可以用來，例如，靜脈內(nèi)， 肌內(nèi)，腹膜內(nèi)或皮下注射。注射時(shí)可單次推入或逐漸注入，入30分鐘的經(jīng)脈內(nèi)灌注。該化合 物還可以以液體或者固體組合物的形式口服給藥。
[0091] 載體或賦形劑可以包括本領(lǐng)域抑制的時(shí)間延遲材料，如單硬脂酸甘油酯或二硬脂 酸甘油酯，還可包括蠟，乙基纖維素，羥丙基甲基纖維素，異丁烯酸甲酯等。當(dāng)知己用于口服 時(shí)，公認(rèn) PH0SALPG-50 (磷酸（phosphol ipid)與 1，2-丙二醇濃縮，A · Nattermann&Cie · GmbH) 中的0.01%吐溫80用于其他化合物的可接受的口服制劑的配制，可以適應(yīng)于本發(fā)明各種化 合物的配制。
[0092]給予本發(fā)明化合物時(shí)可以使用各式各樣的藥物形式。如果使用固體載體，制劑可 以為片劑，被放入硬膠囊中的粉末或小藥丸形式或錠劑或糖錠形式。固體載體的量在很大 程度上的變化，但是優(yōu)選從約25mg到約l.Og。如果使用液體載體，制劑可以為糖漿，乳劑，軟 膠囊，在安剖小瓶或非水的液體懸浮液中的無菌注射溶液或懸浮液。
[0093]為了獲得穩(wěn)定的水溶性的劑型，可以將化合物或其要學(xué)上可接受的鹽榮譽(yù)有機(jī)或 無機(jī)酸的水溶液，〇. 3M琥珀酸或檸檬酸溶液。選擇性地，酸性的衍生物可以榮譽(yù)合適的堿性 溶液。如果得不到可溶形式，可將化合物溶于合適的共溶劑或他們的結(jié)合。這樣的合適的共 溶劑的例子包括，但是不局限于，濃度范圍從0-60%總體積的乙醇，丙二醇，聚乙二醇300， 聚山梨酸酯80,甘油，聚氧乙烯脂肪酸酯，脂肪醇或甘油羥基脂肪酸酯等。
[0094]各種釋放系統(tǒng)是已知的并且可以用于化合物或其他各種制劑的給藥，這些制劑包 括片劑，膠囊，可注射的溶液，脂質(zhì)體中的膠囊，微粒，微膠囊等。引入非方法包括但是不局 限于皮膚的，皮內(nèi)，肌內(nèi)，腹膜內(nèi)，靜脈內(nèi)的，皮下的，鼻腔內(nèi)的，肺的，硬膜外的，眼睛的和 (通常優(yōu)選的）口服途徑?；衔锟梢酝ㄟ^任何方便的或者其他適當(dāng)?shù)耐緩浇o藥，例如通過 注入或快速濃注，通過上皮的或粘膜線路(例如，口腔黏膜，直腸和腸粘膜等)吸收或通過負(fù) 載藥物的支架以及可以與其他生物活性劑一起給藥?？梢匀砘蚓植拷o藥。用于鼻，支氣管 或肺疾病的治療或預(yù)防時(shí)，優(yōu)選的給藥途徑為口服，鼻給藥或支氣管煙霧劑或噴霧器。
【具體實(shí)施方式】
[0095] 下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明，但不限于此。
[0096] 實(shí)施例1本發(fā)明化合物10a-10t的合成，以10a為例 [0097]化合物3-甲?；交撬徕c(2)的合成：
[0098] 在0°C將苯甲醛（2.(^，18.84111111〇1)緩慢滴加入發(fā)煙硫酸（511^)中，40°(3反應(yīng)16小 時(shí)，將反應(yīng)液倒入冰水（150mL)中，用乙酸乙酯(2 X 50mL)萃取，緩慢加入碳酸鈣至PH為6-7， 過濾，濾液中加入少量碳酸鈉至PH為8，過濾，濾液蒸干，用甲醇溶解，過濾，濾液蒸干得化合 物2(1.9g，產(chǎn)率49%)。咕 MMR(400MHz，DMS0)Sl0.05(s，lH) ,8.14(s，lH)，7.91(dd，J = 20.2,7.6Hz,2H),7.59(t ,J = 7.6Hz,lH).
[0099]化合物(E) -3- (3-乙氧基-3-氧代-1 -烯-1 -基)苯磺酸鈉(3)的合成：
[0100] 將化合物2(0.5g，2.4mmol)，碳酸鉀（0.7g，4.8mmol)，磷酰基乙酸三乙酯（0.7g， 2.9mmo 1)和水(5mL)在室溫下攪拌30分鐘，過濾生成的沉淀，用甲醇（2 X 2ml)洗滌，濾液蒸 干得到化合物3粗產(chǎn)品。
[0101] 化合物(E)-乙基3-(3-(氯磺?；?苯基)丙烯酸酯(4)的合成：
[0102] 將化合物 3(0.538,2_〇1)，二氯亞砜（1.7!1^，13.8_〇1)，11二甲基甲酰胺(2滴） 在室溫?cái)嚢杈鶆?，?5°C下回流5小時(shí)，反應(yīng)完畢，蒸干溶劑得到化合物4粗產(chǎn)品。
[0103] 化合物(S)-2-((叔-叔丁基羰基)氨基)-2-苯乙酸(6)的合成：
[0104] 將L-苯甘氨酸（15. lg，lOOmmol)置于反應(yīng)瓶中，加入200mL甲醇：水（3:1)，室溫?cái)?拌溶解，后加入Et3N(15·lmL，150mmol)，將(Boc)20(32·7g，150mmol)滴加入反應(yīng)液中，室溫 下攪拌8小時(shí)，旋蒸除掉溶劑，用100