豆渣水解液高密度酵母工藝的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及酶化學(xué)處理技術(shù)，具體地說是豆渣水解液高密度酵母工藝。
【背景技術(shù)】
[0002]大豆又名黃豆、青仁烏豆、泥豆，其品種多樣，有冬豆、秋豆和四季豆，大豆的形狀有球形、橢圓形等，具有多種顏色，例如:淡綠色、黑色、黃色等。大豆的用途有很多多，可加工成多種豆制品或加工成大豆油等。是一種種子含有豐富植物蛋白和糖類的作物，大豆的營養(yǎng)價(jià)值很高，我國主要生產(chǎn)于東北地區(qū)。
[0003]豆渣是豆制品如豆腐、豆奶等生產(chǎn)加工過程中的副產(chǎn)物，雖是副產(chǎn)物，但仍具有豐富的營養(yǎng)元素。目前豆渣主要是用做飼料、肥料，利用效率較低，有些甚至被作為垃圾被拋棄，直接污染環(huán)境。豆渣產(chǎn)量大、有利用價(jià)值，目前利用率較低。因此，如何對豆渣進(jìn)行綜合利用，提高產(chǎn)品的附加值，

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種新型工藝白酒工段生產(chǎn)工藝。
[0005]為了解決【背景技術(shù)】問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:豆渣水解液高密度酵母工藝，其特征在于，包括以下操作步驟:
[0006]I)培養(yǎng)基配制:酵母篩選用固體培養(yǎng)基:水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0007]酵母馴化用固體培養(yǎng)基;水解液200?700ml/L、硫酸銨5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L、瓊脂20g/L;
[0008]種子用培養(yǎng)基;水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0009]酵母發(fā)酵用培養(yǎng)基;水解液200?700ml/L、硫酸銨10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L;
[0010]2)種子培養(yǎng):篩選培養(yǎng)前經(jīng)兩次傳代培養(yǎng)后用微量移液槍移取3ml的菌液接種于裝有300ml種子培養(yǎng)基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28°C恒溫振蕩培養(yǎng)。
[0011]3)生長曲線的測定:取種子培養(yǎng)液于新的發(fā)酵液中每隔2小時(shí)測吸光度，繪制酵母生長曲線，確定酵母生長的穩(wěn)定期；
[0012]4)目標(biāo)菌株的篩選:選取200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/l、700ml/L6個(gè)水解液濃度梯度，配制成濃度不同的液體培養(yǎng)基，用微量移液槍逐個(gè)接種3ml的處于生長期的種子培養(yǎng)菌液于一系列濃度梯度的培養(yǎng)基中，28°C振蕩培養(yǎng)18-24小時(shí)后取菌液稀釋平板涂布培養(yǎng)，進(jìn)一步純化，重復(fù)操作直至篩選出單個(gè)菌落，最后即可制備斜面固體培養(yǎng)基保藏菌種，以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用；
[0013]5)選取處于培養(yǎng)至生長期左右的種子培養(yǎng)液，于超凈工作臺中用微量移液槍分別向配置好的濃度梯度為 200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L 的液體培養(yǎng)基中移取3ml的種子培養(yǎng)液，從而將酵母菌轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基中，28°C恒溫振蕩培養(yǎng)18-24小時(shí)。
[0014]綜上所述，此發(fā)明有益效果如下:本發(fā)明中依據(jù)現(xiàn)代酶工程技術(shù)原理和輔助物理與化學(xué)處理技術(shù)，采用有針對性的高效酶制劑生物活性物質(zhì)材料，高效地降解豆渣營養(yǎng)成分為五碳糖、氨基酸，主要作為白酒發(fā)酵主要原料。研究降解的最適酶解工藝，為豆渣的高值化利用及后期微生物發(fā)酵研究作前提優(yōu)。
【具體實(shí)施方式】
[0015]實(shí)施例一
[0016]豆渣水解液高密度酵母工藝，其特征在于，包括以下操作步驟:
[0017]I)培養(yǎng)基配制:酵母篩選用固體培養(yǎng)基:水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0018]酵母馴化用固體培養(yǎng)基;水解液200?700ml/L、硫酸銨5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L、瓊脂20g/L;
[0019]種子用培養(yǎng)基;水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0020]酵母發(fā)酵用培養(yǎng)基;水解液200ml/L、硫酸銨10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L;
[0021]2)種子培養(yǎng):篩選培養(yǎng)前經(jīng)兩次傳代培養(yǎng)后用微量移液槍移取3ml的菌液接種于裝有300ml種子培養(yǎng)基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28°C恒溫振蕩培養(yǎng)。
[0022]3)生長曲線的測定:取種子培養(yǎng)液于新的發(fā)酵液中每隔2小時(shí)測吸光度，繪制酵母生長曲線，確定酵母生長的穩(wěn)定期；
[0023]4)目標(biāo)菌株的篩選:選取200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/l、700ml/L6個(gè)水解液濃度梯度，配制成濃度不同的液體培養(yǎng)基，用微量移液槍逐個(gè)接種3ml的處于生長期的種子培養(yǎng)菌液于一系列濃度梯度的培養(yǎng)基中，28°C振蕩培養(yǎng)18小時(shí)后取菌液稀釋平板涂布培養(yǎng)，進(jìn)一步純化，重復(fù)操作直至篩選出單個(gè)菌落，最后即可制備斜面固體培養(yǎng)基保藏菌種，以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用；
[0024]5)選取處于培養(yǎng)至生長期左右的種子培養(yǎng)液，于超凈工作臺中用微量移液槍分別向配置好的濃度梯度為 200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L 的液體培養(yǎng)基中移取3ml的種子培養(yǎng)液，從而將酵母菌轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基中，28°C恒溫振蕩培養(yǎng)18小時(shí)。
[0025]實(shí)施例二
[0026]豆渣水解液高密度酵母工藝，其特征在于，包括以下操作步驟:
[0027]I)培養(yǎng)基配制:酵母篩選用固體培養(yǎng)基:水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0028]酵母馴化用固體培養(yǎng)基;水解液700ml/L、硫酸銨5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L、瓊脂20g/L;
[0029]種子用培養(yǎng)基;水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L;
[0030]酵母發(fā)酵用培養(yǎng)基;水解液700ml/L、硫酸銨10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L;
[0031]2)種子培養(yǎng):篩選培養(yǎng)前經(jīng)兩次傳代培養(yǎng)后用微量移液槍移取3ml的菌液接種于裝有300ml種子培養(yǎng)基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28°C恒溫振蕩培養(yǎng)。
[0032]3)生長曲線的測定:取種子培養(yǎng)液于新的發(fā)酵液中每隔2小時(shí)測吸光度，繪制酵母生長曲線，確定酵母生長的穩(wěn)定期；
[0033]4)目標(biāo)菌株的篩選:選取200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/l、700ml/L
6個(gè)水解液濃度梯度，配制成濃度不同的液體培養(yǎng)基，用微量移液槍逐個(gè)接種3ml的處于生長期的種子培養(yǎng)菌液于一系列濃度梯度的培養(yǎng)基中，28°C振蕩培養(yǎng)24小時(shí)后取菌液稀釋平板涂布培養(yǎng)，進(jìn)一步純化，重復(fù)操作直至篩選出單個(gè)菌落，最后即可制備斜面固體培養(yǎng)基保藏菌種，以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用；
[0034]5)選取處于培養(yǎng)至生長期左右的種子培養(yǎng)液，于超凈工作臺中用微量移液槍分別向配置好的濃度梯度為 200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L 的液體培養(yǎng)基中移取3ml的種子培養(yǎng)液，從而將酵母菌轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基中，28°C恒溫振蕩培養(yǎng)24小時(shí)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.豆渣水解液高密度酵母工藝，其特征在于，包括以下操作步驟: 1)培養(yǎng)基配制:酵母篩選用固體培養(yǎng)基:水解液200ml/L、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L; 酵母馴化用固體培養(yǎng)基;水解液200?700ml/L、硫酸銨5g/L、尿素5g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L、瓊脂20g/L; 種子用培養(yǎng)基;水解液200ml、蛋白胨20g/L、酵母膏10g/L; 酵母發(fā)酵用培養(yǎng)基；水解液200?700ml/L、硫酸銨10g/L、酵母膏2g/L、牛肉膏2g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L; 2)種子培養(yǎng):篩選培養(yǎng)前經(jīng)兩次傳代培養(yǎng)后用微量移液槍移取3ml的菌液接種于裝有300ml種子培養(yǎng)基的500ml三角瓶中，用封口膜封口，28°C恒溫振蕩培養(yǎng)。 3)生長曲線的測定:取種子培養(yǎng)液于新的發(fā)酵液中每隔2小時(shí)測吸光度，繪制酵母生長曲線，確定酵母生長的穩(wěn)定期； 4)目標(biāo)菌株的篩選:選取2001111/1、3001111/1、40011111/1、5001111/1、6001111/1、7001111/16 個(gè)水解液濃度梯度，配制成濃度不同的液體培養(yǎng)基，用微量移液槍逐個(gè)接種3ml的處于生長期的種子培養(yǎng)菌液于一系列濃度梯度的培養(yǎng)基中，28°C振蕩培養(yǎng)18-24小時(shí)后取菌液稀釋平板涂布培養(yǎng)，進(jìn)一步純化，重復(fù)操作直至篩選出單個(gè)菌落，最后即可制備斜面固體培養(yǎng)基保藏菌種，以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用； 5)選取處于培養(yǎng)至生長期左右的種子培養(yǎng)液，于超凈工作臺中用微量移液槍分別向配置好的濃度梯度為 200ml/L、300ml/L、4001ml/L、500ml/L、600ml/L、700ml/L 的液體培養(yǎng)基中移取3ml的種子培養(yǎng)液，從而將酵母菌轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基中，28°C恒溫振蕩培養(yǎng)18-24小時(shí)。
【專利摘要】本發(fā)明公開了豆渣水解液高密度酵母工藝，依據(jù)現(xiàn)代酶工程技術(shù)原理和輔助物理與化學(xué)處理技術(shù)，采用有針對性的高效酶制劑生物活性物質(zhì)材料，高效地降解豆渣營養(yǎng)成分為五碳糖、氨基酸，主要作為白酒發(fā)酵主要原料。研究降解的最適酶解工藝，為豆渣的高值化利用及后期微生物發(fā)酵研究作前提優(yōu)。
【IPC分類】C12N1/16
【公開號】CN105543117
【申請?zhí)枴緾N201610076990
【發(fā)明人】孫傳伯, 韓邦興, 陳存武, 陳乃富
【申請人】安徽楚井坊酒業(yè)有限公司
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2016年1月31日