一種王棗子活性成分的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物活性成分提取分離技術(shù)領(lǐng)域，設(shè)及到中藥王要子成分的提取技 術(shù)，特別設(shè)及到王要子功能活性成分的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 王要子又名王嫂子，蚊蟲不吃，百病不生，是世界上稀有的名貴食用植物。在中國 植物學(xué)和藥典《本草綱目》中尚無記載，是被遺漏的珍寶，集中生長在安徽宿州的一種地方 草藥。王要子中含有多種有效藥用成分，具有抗菌消炎，抗氧化，抗腫瘤，抗血栓等功能，民 間流傳"是瘡不是瘡，Ξ碗王要子湯"其中王要子甲素，王要子乙素和王要子丙素是Ξ種研 究較多的成分，王要子中單體成分的研究W及在藥物方面具有較好的應(yīng)用前景，因此王要 子活性成分的提取分離成為一項技術(shù)難題。隨著天然產(chǎn)物提取技術(shù)的規(guī)?；?、集約化使得 傳統(tǒng)的分離提取技術(shù)不能廣泛應(yīng)用，王要子活性成分的傳統(tǒng)加熱回流提取技術(shù)采用有機(jī)溶 劑對大量原材料加熱回流，使易揮發(fā)性有機(jī)溶劑大量消耗，普遍存在提取時間長、提取效率 低、嚴(yán)重污染環(huán)境的問題，它影響王要子活性成分藥用的經(jīng)濟(jì)效益。采取大批量王要子原材 料采用加熱回流的方法提取王要子活性成分，不僅使提取不夠充分而且使得部分不穩(wěn)定化 合物在高溫下變性，不能滿足活性成分的有效提取進(jìn)而無法發(fā)揮其活性成分原有的藥效作 用，使得提取效率降低。
[0003] 微切助互作技術(shù)作為近年來高效提取動植物活性成分的新方法，其基本原理是： 動植物原料顆粒團(tuán)經(jīng)過微切變細(xì)胞破碎，細(xì)胞表面產(chǎn)生新鮮切面，助劑與有效成分之間發(fā) 生基團(tuán)或分子間的相互吸附或作用，改變有效成分的微觀性能，表面能增加，比表面積增 大，吸附性和極性增加，通過微切助互作技術(shù)處理后得到的微切助粉在水中的溶解性大大 提高。發(fā)明專利:一種用于植物有效成分提取方法，授權(quán)專利號:ZL200510130852.3,其主要 的技術(shù)方案是將被提取的植物原料粉碎，向植物粗粉中添加〇.5%-20%固體堿、固體酸、薦 糖或鹽類化合物粉末的化學(xué)助劑，W及脆性或銳性的惰性材料一起進(jìn)行處理，選用水或乙 醇溶解處理產(chǎn)物，分離收集可溶性組份獲得有效成分。因此，植物活性成分提取效率低，消 耗時間長等是亟待解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供王要子活性成分提取新技術(shù)即超聲輔助微切助 互作技術(shù)提取王要子活性成分，目的是提供一種從王要子中提取活性成分的新方法。該技 術(shù)綜合利用超聲技術(shù)與微切助互作新技術(shù)的有效結(jié)合提取王要子活性成分且能夠有效提 高其提取率，減少有機(jī)溶劑的消耗量改善存在的環(huán)境污染問題。
[0005] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0006] -種王要子活性成分的提取方法，利用微切助互作技術(shù)處理王要子根，40~60目 王要子根粗粉與化學(xué)助劑放在一起進(jìn)行超微研磨40min后，助劑的質(zhì)量為粗粉質(zhì)量的2 %~ 4% ;過200~300目篩，精確稱量2~化g，按料液比1:24加入質(zhì)量百分比為80%的乙醇，攬拌 均勻；在45°C，功率250W條件下超聲提取50min，提取液進(jìn)行減壓蒸饋，饋分乙醇回收再利 用，濃縮液分別用石油酸、氯仿、乙酸乙醋和正下醇萃取，萃取液減壓濃縮，饋分回收再利 用，濃縮干粉即為不同相的粗提物。粗提物進(jìn)行不同藥理活性的檢測分析W確定目標(biāo)成分。
[0007] 所述的助劑為Na肥〇3、化2C〇3或β-環(huán)糊精助劑。
[0008] 本發(fā)明作為王要子活性成分提取新技術(shù)，能夠有效提取王要子活性成分，與傳統(tǒng) 提取方法相比，2.0kg原材料能提取有效粗成分208.4g~262.96g，節(jié)省成本。利用超聲輔助 提取，由原來的浸泡24h縮短為50min，大大減少活性成分溶出時間，節(jié)省操作時間，提高提 取效率。微切助互作技術(shù)的使用，使得活性成分的溶出度提高且有效保護(hù)活性成分的完整 性，大大提高了活性成分的提取率。本發(fā)明工藝作簡單，節(jié)省成本，更有利于工業(yè)化。
【附圖說明】
[0009] 圖1A是普通處理X畑結(jié)果圖。
[0010] 圖1B是微切助處理邸D結(jié)果圖。
[0011] 圖2A是普通處理掃描結(jié)果。
[0012] 圖2B是微切助處理掃描結(jié)果圖。
[0013] 圖3是固體萃取物經(jīng)分析型高效液相色譜檢測圖。
【具體實施方式】
[0014] W下結(jié)合技術(shù)方案和附圖詳細(xì)敘述本發(fā)明的具體實施例。
[0015] 王要子根用普通粉碎機(jī)粉碎，過40目篩得到王要子根粗粉，精確稱量王要子根粗 粉5.0Kg，加入60g化H(X)3助劑混合均勻，在超級磨中研磨40min。過300目篩，精確稱量 2.0kg放于燒杯中，按料液比1:24加入體積分?jǐn)?shù)為80 %的乙醇水溶液，攬拌均勻，在溫度為 45°C，頻率43曲Z，功率250W的超聲波條件下超聲提取50min。提取液真空抽濾，得濾液，在40 °C，6化/min的條件下減壓濃縮得濃縮液。濃縮液依次用石油酸，氯仿，乙酸乙醋，正下醇按 比例1:1萃取，分別萃取1次，2次，2次，2次，得各相萃取液。減壓濃縮得四相萃取物固體分別 為0.1840g，10.2480g，4.2765g，53.6481g。各相固體萃取物進(jìn)行抗炎活性的檢測。
[0016] 將上述氯仿濃縮物進(jìn)行硅膠柱層析，石油酸-乙酸乙醋，二氯甲燒-甲醇為洗脫劑 進(jìn)行梯度洗脫，洗脫成分進(jìn)行薄層色譜檢測，Ξ氯化錬/乙酸試劑顯色，二氯甲燒-甲醇-乙 酸展開，收集合并含相同點的饋分，減壓濃縮，得到結(jié)晶物1.8g，（提取量明顯高于傳統(tǒng)提取 方法2.01^得到0.5旨相同結(jié)晶物）。將上述結(jié)晶物配成0.1111旨/1111的甲醇溶液，采用高效液相 色譜法，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)W及核磁共振技術(shù)檢測分析純度，確定結(jié)晶物結(jié)構(gòu)。
[0017] 普通處理與微切助處理結(jié)果，通過X射線衍射檢測結(jié)果參見圖1A和圖1B，圖2A和圖 2B，白色針晶產(chǎn)物經(jīng)分析型高效液相色譜檢測，純度大于98.9%。參見圖3。
[0018] 主要單體結(jié)構(gòu)分析：
[0019]白色針晶，分子量：332.20，分子式：C20出8〇4
[0020] 經(jīng)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測得到：333[M+H]，315[^r_0H]，314[M_此0]，299[M_ 出0-CH3]，271，257,253,229,215,201，163,258，135，105。
[0021] 紅外光譜（11〇分析：3150(-(^)，1723 1709(〔 = 0)，1653化=(：出），1250，1126， 1082,943。
[0022]核磁共振波譜數(shù)據(jù)如下：
[002；3] 1 歷 MR(CDCl3)Sppm:1.08(細(xì)，S，2XC曲），1.12(3H，S，Ol3)，3.02(lH，m，Ci3-H)， 4.10(lH，dd，J = 10,5.5Hz，C7_H)，4.82(lH，brs，Cl4_H)，5.49,6.25(各lH，S，Cl7_2H)。
[0024]得到結(jié)構(gòu)式為
【主權(quán)項】
1. 一種王棗子活性成分的提取方法，其特征包括以下步驟， (1) 利用微切助互作技術(shù)處理王棗子根； (2) 將40~60目王棗子根粗粉與化學(xué)助劑放在一起進(jìn)行超微研磨40min，助劑與王棗子 根粗粉的質(zhì)量百分比為2%~4% ; (3) 過200~300目篩，按料液比1:24加入質(zhì)量百分比為80 %的乙醇，攪拌均勻； (4) 在45°C、功率250W條件下超聲提取50min，提取液分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和 正丁醇萃取，萃取液減壓濃縮，餾分回收再利用，濃縮干粉即為不同相的粗提物。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種王棗子活性成分的提取方法，其特征在于，所述的助劑為 NaHC03、Na2C03或β-環(huán)糊精助劑。
【專利摘要】一種王棗子活性成分的提取方法，屬于植物活性成分提取技術(shù)領(lǐng)域。先用微切助互作技術(shù)處理王棗子根，再將王棗子根粗粉與化學(xué)助劑放在一起進(jìn)行超微研磨后，過篩后加入乙醇，攪拌均勻；超聲提取后，提取液進(jìn)行減壓蒸餾，餾分乙醇回收再利用，濃縮液分別用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液減壓濃縮，餾分回收再利用，濃縮干粉即為不同相的粗提物。粗提物進(jìn)行不同藥理活性的檢測分析以確定目標(biāo)成分。作為王棗子活性成分提取新技術(shù)，能夠有效提取王棗子活性成分，與傳統(tǒng)提取方法相比，能更有效地提取有效成分。本發(fā)明利用超聲輔助提取，大大減少活性成分溶出時間，提高了提取效率。本發(fā)明工藝作簡單，節(jié)省成本，更有利于工業(yè)化。
【IPC分類】C07C49/743, C07C45/78
【公開號】CN105585471
【申請?zhí)枴緾N201610031386
【發(fā)明人】薛宏宇, 張亞楠, 孫明申, 劉勇, 姜麗麗, 劉亞軍, 史美云
【申請人】大連理工大學(xué)
【公開日】2016年5月18日
【申請日】2016年1月18日