反應(yīng)容器、核酸分析裝置及核酸分析方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及反應(yīng)容器、具備該反應(yīng)容器的核酸分析裝置及核酸分析方法。
[0002]本申請基于2013年9月30日于日本申請的日本特愿2013-205852號主張優(yōu)先權(quán)，其內(nèi)容援引于此。
【背景技術(shù)】
[0003]基于免疫學(xué)/科學(xué)的依據(jù)、提供對應(yīng)于患者所具有的遺傳背景的有效的治療/給藥方法的所謂“定制醫(yī)療”不僅會提高每個人的QOL(生活質(zhì)量)、而且還期待抑制伴隨藥劑副作用的醫(yī)療費(fèi)用的增加。在判定藥劑的效果、副作用等時，存在各種手法，對個人之間的基因差異進(jìn)行分析的基因診斷也是有效的手段之一。定制醫(yī)療期待能夠在現(xiàn)場進(jìn)行簡單且迅速的診斷。作為用于實現(xiàn)簡單且迅速的診斷的手段，可舉出對含有基因的微量的試樣溶液進(jìn)行處理的反應(yīng)裝置的被稱作y-TAS(Total Analysis System，全分析系統(tǒng))、Lab-on_Chip的技術(shù)的利用。
[0004]此為在I個芯片或樣品盒中具有多個反應(yīng)室或流路的裝置，可以同時處理多個檢體的分析或者多種項目。這些技術(shù)是具有通過對芯片或樣品盒進(jìn)行小型化而能夠使所處理的藥品變得少量等的各種優(yōu)點的手法?；蚍治龃蟾啪哂幸韵逻^程:從自患者采集的血液或口腔粘膜、痰等生物體樣品中提取或純化用于基因分析的核酸并取出，利用PCR等對欲研究的基因區(qū)域或者核酸序列進(jìn)行擴(kuò)增，對基因型等欲檢查的對象所固有的序列進(jìn)行檢測。
[0005]專利文獻(xiàn)1、專利文獻(xiàn)2、非專利文獻(xiàn)I中公開了自生物體樣品取出核酸之后進(jìn)行擴(kuò)增、檢測的工序全自動地進(jìn)行的基因診斷裝置。
[0006]現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0007]專利文獻(xiàn)
[0008]專利文獻(xiàn)I:日本特開2004-212050號公報
[0009]專利文獻(xiàn)2:日本特開2004-093297號公報
[0010]專利文獻(xiàn)3:日本專利第4962658號公報
[0011]專利文獻(xiàn)4:日本專利第4911264號公報
[0012]非專利文獻(xiàn)
[0013]非專利文獻(xiàn)l:ClinicalChemistry 51:882-890，2005

【發(fā)明內(nèi)容】

[0014]發(fā)明要解決的技術(shù)問題
[0015]當(dāng)核酸的提取工序與之后的擴(kuò)增和檢測的工序相獨(dú)立時，通過使用了外部裝置的操作可以確認(rèn)核酸的量。但是，專利文獻(xiàn)1、專利文獻(xiàn)2或非專利文獻(xiàn)I所示的裝置中，由于在自生物體樣品的核酸提取后使擴(kuò)增、檢測的工序全自動地進(jìn)行，因此無法確認(rèn)所得核酸的量。因此，所取出的核酸量不明確、檢查對象在以檢測基因突變等為目的時并不足夠。
[0016]例如，在以癌癥等代表的基因突變的情況下，全體中有99.9%為正常的野生型，當(dāng)要檢測剩余0.1%的突變型時，在擴(kuò)增前所需的核酸的量若不是1000拷貝以上、則無法擔(dān)保突變?yōu)?.1%。
[0017]另外還認(rèn)為，在有無特定的核酸序列或者基因多態(tài)的分析中，當(dāng)輸出發(fā)生異常的結(jié)果時，無法區(qū)別是核酸量不足、還是在體系中混入了反應(yīng)抑制物等而引起的現(xiàn)象。
[0018]如此，在全自動的基因分析系統(tǒng)中有核酸的量不明確、有分析結(jié)果的可靠性被檢查項目的特性所左右的情況。
[0019]本發(fā)明鑒于上述事實而完成，其目的在于提供適用于全自動基因分析系統(tǒng)、能夠進(jìn)行通過自生物體試樣提取而獲得的核酸的定量和該核酸的分析的反應(yīng)容器，具備該反應(yīng)容器的核酸分析裝置以及核酸分析方法。
[0020]用于解決技術(shù)問題的方法
[0021]本發(fā)明第一方式的反應(yīng)容器具備基材，設(shè)置在所述基材上且配置有用于核酸的分析的核酸分析試劑、能夠?qū)泻怂岬臉悠愤M(jìn)行分析的分析槽(well)，和設(shè)置在所述基材上且配置有能夠特異性地對核酸進(jìn)行檢測的定量試劑、能夠?qū)λ鰳悠分泻械乃龊怂岬牧窟M(jìn)行定量的定量槽;所述樣品含有的所述核酸被分配到所述定量槽和所述分析槽中。
[0022]上述第一方式中，所述基材還可以由具有透光性的樹脂形成。
[0023]上述第一方式的反應(yīng)容器還可以進(jìn)一步具備設(shè)置在所述基材上的流路和設(shè)置在所述基材上且能夠注入溶液的注入口，其中，通過所述流路，所述樣品含有的所述核酸被分配到所述定量槽和所述分析槽中。
[0024]上述第一方式中，所述定量試劑及所述核酸分析試劑中的至少I個還可以以干燥狀態(tài)進(jìn)行配置。
[0025]上述第一方式中，所述定量試劑及所述核酸分析試劑中的至少I個還可以以干燥狀態(tài)且與海藻糖混合的狀態(tài)進(jìn)行配置。
[0026]本發(fā)明的第二方式的核酸分析裝置具備上述第一方式的反應(yīng)容器和用于提取所述核酸的提取部。
[0027]上述第二方式的核酸分析裝置還可以進(jìn)一步具備用于對所述核酸進(jìn)行純化的純化部。
[0028]本發(fā)明第三方式的核酸分析方法使用了上述第一方式的反應(yīng)容器或上述第二方式的核酸分析裝置，所述核酸分析方法包含下述核酸定量工序:將含有與在所述分析槽中分析的核酸相同的核酸的樣品注入到所述定量槽中，在所述定量槽中使所述樣品所含有的所述核酸與所述定量試劑締合、形成締合狀態(tài)，對以所述締合狀態(tài)產(chǎn)生的信號進(jìn)行測定，由所測定的所述信號計算在所述分析槽中分析的所述核酸的量。
[0029]上述第三方式的核酸分析方法還可以包含以下工序:在所述核酸定量工序之前進(jìn)行的、從生物體試樣提取核酸的核酸提取工序，和在所述核酸提取工序之后進(jìn)行的、將含有所述核酸的所述樣品注入到所述分析槽中、在分析槽中進(jìn)行所述核酸的識別的核酸分析工序;其中，所述核酸是在所述核酸提取工序中獲得的。
[0030]上述第三方式的核酸分析方法還可以包含以下工序:在所述核酸定量工序之后進(jìn)行的、基于通過所述核酸定量工序計算的所述核酸的量來判斷通過所述核酸分析工序獲得的分析結(jié)果的妥當(dāng)性的工序。
[0031]上述第三方式的核酸分析方法還可以進(jìn)一步包含在所述核酸提取工序之后且所述核酸定量工序之前進(jìn)行的核酸純化工序。
[0032]上述第三方式中還可以所述核酸分析工序在所述核酸定量工序之后進(jìn)行，并且包含在所述核酸定量工序之后且所述核酸分析工序之前進(jìn)行的核酸純化工序。
[0033]上述第三方式中還可以所述核酸分析工序在所述核酸定量工序之后進(jìn)行，并且包含在所述核酸定量工序之后且所述核酸分析工序之前進(jìn)行、由通過所述核酸定量工序計算的核酸的量來判斷可否移行至所述核酸分析工序的工序。
[0034]上述第三方式的核酸分析方法可以進(jìn)一步包含在所述核酸定量工序之后且所述核酸純化工序之前進(jìn)行的、由通過所述核酸定量工序計算的核酸的量來判斷可否移行至所述核酸純化工序的工序。
[0035]上述第三方式中，所述生物體試樣可以為選自全血、血清、唾液、痰、口腔粘膜和組織片中的至少I種。
[0036]本發(fā)明第四方式的反應(yīng)容器具備基材，設(shè)置在所述基材上且配置有用于核酸分析的核酸分析試劑、能夠?qū)泻怂岬臉悠愤M(jìn)行分析的分析槽，和設(shè)置在所述基材上且能夠?qū)λ鰳悠分泻械乃龊怂岬牧窟M(jìn)行定量的定量槽，其中，所述樣品含有的所述核酸被分配在所述定量槽和所述分析槽中。
[0037]上述第四方式中，所述基材還可以由具有透光性的樹脂形成。
[0038]上述第四方式的反應(yīng)容器還可以進(jìn)一步具備設(shè)置在所述基材上的流路和設(shè)置在所述基材上且能夠注入溶液的注入口，其中，通過所述流路，所述樣品所含有的所述核酸被分配到所述定量槽和所述分析槽中。
[0039]本發(fā)明第五方式的核酸分析裝置具備上述第四方式的反應(yīng)容器和用于提取所述核酸的提取部。
[0040]上述第五方式的核酸分析裝置還可進(jìn)一步具備用于對所述核酸進(jìn)行純化的純化部。
[0041]本發(fā)明第六方式的核酸分析方法使用上述第四方式的反應(yīng)容器或上述第五方式的核酸分析裝置，其包含下述核酸定量工序:將含有與所述分析槽中所分析的核酸相同的核酸的樣品注入到所述定量槽中，在所述定量槽中對所述樣品的紫外線的吸光度進(jìn)行測定，由所測定的紫外線的吸光度計算在所述分析槽中分析的所述核酸的量。
[0042]上述第六方式的核酸分析方法還可以